Bunky RBL-2H3 – Význam buniek RBL-2H3 v alergickej reakcii a imunologických štúdiách
Bunka RBL-2H3 je bunková línia bazofilnej leukémie pochádzajúca z potkanov, ktorá sa používa v imunologickom výskume. Slúži ako modelový systém na štúdium fyziológie, správania a funkcií žírnych buniek. Tieto bunky sa tiež využívajú na štúdium alergických reakcií, imunologických procesov, ako aj na testovanie a vývoj liekov.
- Rastové médium
- Na kultiváciu buniek RBL-2H3 sa používa médium EMEM obsahujúce 10 % FBS, 2 mM L-glutamín, 2,2 g/l NaHCO3 a soľ EBSS. Médium by sa malo vymieňať 2 až 3-krát týždenne.
- Doba zdvojnásobenia
- Doba zdvojnásobenia počtu žírnych buniek RBL-2H3 je približne 50–60 hodín.
- Typ rastu
- RBL-2H3 je adhezívna bunková línia.
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- BSL-2
- K dispozícii od
- Cytion — Objednajte si RBL-2H3
- Bunky RBL-2H3: Pôvod a všeobecné charakteristiky
- Bunky RBL-2H3: Informácie o kultivácii
- Výhody a obmedzenia bazofilnej buneckej línie RBL-2H3
- Bunka RBL-2H3: Základný kameň imunologického výskumu
- Bunka RBL-2H3: Dôležité otázky a odpovede pre výskumníkov
- Referencie
- Bunka RBL-2H3 pre pokročilý imunologický výskum
- Bunky RBL-2H3: Vedecké publikácie
- Zdroje pre bunkovú líniu RBL-2H3: protokoly, videá a ďalšie materiály
- Často kladené otázky
Bunky RBL-2H3: Pôvod a všeobecné charakteristiky
Pred použitím bazofilnej buneckej línie vo vašom výskume by ste mali poznať jej pôvod a všeobecné vlastnosti. Táto časť článku vás oboznámi so základnými informáciami o bunkách RBL-2H3. Napríklad: Čo sú to žírne bunky RBL-2H3? Prečo používať bunky RBL-2H3? Čo sú bunky RBL-2H3 pri bazofilnej leukémii potkanov? Aká je morfológia buniek RBL-2H3? Sú bunky RBL-2H3 nesmrteľné?
- RBL-2H3 sú bazofilné leukemické bunky odvodené z bazofilných buniek potkanov Wistar v roku 1978 v Laboratóriu imunológie Národného inštitútu zubného výskumu.
- Bunky RBL-2H3 majú receptory tyrozínkinázy c-kit a receptory proteázy II žírnych buniek (RMCP-II), čo z nich robí potenciálny model žírnych buniek. Preto sa bežne nazývajú žírne bunky, hoci pochádzajú z bazofilov potkanov [1].
- Po aktivácii uvoľňujú histamín a iné mediátory a exprimujú receptory IgE s vysokou afinitou.
- Bunky RBL-2H3 vykazujú morfológiu podobnú fibroblastom.
Bunky RBL-2H3: Informácie o kultivácii
Táto časť vám pomôže zoznámiť sa s niektorými kľúčovými aspektmi kultivácie buneckej línie RBL-2H3. Dozviete sa: Aký je čas zdvojnásobenia buniek RBL-2H3? Aká je hustota výsevu buniek RBL-2H3? Aký je protokol kultivácie buniek RBL-2H3? Aké je mrazové médium pre bunkovú líniu RBL-2H3?
Kľúčové body kultivácie buniek RBL-2H3
Doba zdvojnásobenia populácie:
Doba zdvojnásobenia počtu žírnych buniek RBL-2H3 je približne 50 – 60 hodín.
Adherentné alebo v suspenzii:
RBL-2H3 je adhezívna bunková línia.
Pomer pri subkultivácii:
Pre bunky RBL-2H3 sa pomer subkultivácie udržiava v rozmedzí 1:2 až 1:4. Adherentné bunky sa premyjú roztokom 1 x PBS bez obsahu horčíka a vápnika. Do roztoku na pasážovanie sa pridá Accutase a bunky sa nechajú 10 minút pri izbovej teplote, aby sa oddelili od dna kultivačnej nádoby. Pridá sa čerstvé médium a bunky sa odstreďujú. Zozbierané bunky sa opatrne resuspendujú v čerstvom médiu a prelejú do nových fliaš obsahujúcich rastové médium.
Rastové médium:
Na kultiváciu buniek RBL-2H3 sa používa médium EMEM obsahujúce 10 % FBS, 2 mM L-glutamín, 2,2 g/l NaHCO₃ a soľ EBSS. Médium by sa malo vymieňať 2 až 3-krát týždenne.
Podmienky kultivácie:
Bunky RBL-2H3 sa kultivujú vo zvlhčenom inkubátore nastavenom na teplotu 37 °C a pripojenom k zdroju 5 % CO₂.
Skladovanie:
Bunky sa skladujú v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C v elektrickom mrazničke, aby sa dlhodobo zachovala ich životaschopnosť.
Proces zmrazovania a médium:
Na zmrazenie buniek RBL-2H3 sa používa zmrazovacie médium CM-1 alebo CM-ACF s využitím postupu pomalého zmrazovania. Stručne povedané, táto metóda umožňuje pokles teploty o 1 °C za minútu a chráni bunky pred teplotným šokom.
Proces rozmrazovania:
Bunky RBL-2H3 sa rozmrazujú v prednastavenom vodnom kúpeli (37 °C) približne 60 sekúnd. Následne sa bunky pridajú do čerstvého kultivačného média a odstreďujú sa. Tento krok je nevyhnutný na odstránenie zložiek mraziaceho média. Následne sa bunka v pelete resuspenduje v rastovom médiu a bunky sa nanesú do banky na kultiváciu.
Úroveň biologickej bezpečnosti:
Bunky RBL-2H3 by sa mali udržiavať v laboratóriách s úrovňou biologickej bezpečnosti 1.
Uverejnené: 2023 | Posledná revízia: máj 2026
Výhody a obmedzenia bazofilnej buneckej línie RBL-2H3
Bunky RBL-2H3 sa bežne využívajú v imunologickom výskume. V tejto časti sú uvedené ich hlavné výhody a obmedzenia.
Výhody
- Ľahká kultivácia: Bunky RBL-2H3 sa dajú ľahko kultivovať a udržiavať v laboratórnom prostredí. To umožňuje nákladovo efektívne a reprodukovateľné experimentovanie, vďaka čomu sú obľúbenou voľbou pre počiatočné štúdie v imunológii.
Obmedzenia
- Neľudský pôvod: Keďže bunky RBL-2H3 pochádzajú z bazofilov potkanov, nemusia presne napodobňovať ľudské biologické procesy, čo môže obmedzovať ich použiteľnosť v štúdiách zameraných špecificky na človeka. To si vyžaduje opatrnú interpretáciu údajov pri extrapolácii výsledkov na ľudské systémy.
- Zjednodušený model žírnych buniek: Hoci tieto bunky poskytujú základný model na štúdium funkcií žírnych buniek, nepredstavujú v plnej miere komplexnú povahu interakcií žírnych buniek v rámci ľudského imunitného systému. V dôsledku toho nemusia adekvátne modelovať mnohostranné úlohy žírnych buniek v imunitných reakciách alebo chorobných stavoch in vivo.
Bunka RBL-2H3: Základný kameň imunologického výskumu
Výskum bazofilov a žírnych buniek s využitím buneckej línie RBL-2H3
Bunka RBL-2H3, odvodená z Rattus norvegicus, slúži ako kľúčový model na štúdium biológie bazofilov a žírnych buniek. Tieto žírne bunky potkanov poskytujú zásadné poznatky o uvoľňovaní mediátorov žírnych buniek, ktoré sú kľúčové pre pochopenie alergických stavov, ako je alergická rinitída. Prostredníctvom týchto buniek výskumníci skúmajú dynamiku bunkových receptorov a vytváranie imunologických synáps, ktoré sú kľúčové pre reakciu imunitného systému na alergény. Zaujímavá štúdia uverejnená v roku 2019 využila bunkovú líniu RBL-2H3 a skúmala mechanizmy stojace za pseudoalergickými reakciami vyvolanými injekciou Qingkailing. Štúdia zistila, že signálna kaskáda PI3K-RAC1 čiastočne vyvoláva túto alergickú reakciu v bunkách [2].
Dynamika imunologických synáps v alergologickom výskume
Bunky RBL-2H3, ktoré sa vo veľkej miere využívajú v imunologickom výskume, sú obzvlášť účinné pri skúmaní dynamiky imunologických synáps. To pomáha objasniť komunikačné procesy imunitného systému, s aplikáciami pri štúdiu žírnych buniek v periférnej krvi aj v peritoneálnej tekutine. Takýto výskum je kľúčový pre komplexné pochopenie imunitnej reakcie v systémovom aj lokalizovanom kontexte.
Skríning liekov a testovanie toxicity
Pri skríningu a testovaní liekov sa využíva citlivosť buniek RBL na rôzne podnety, vrátane štúdia toho, ako H₂O₂ inhibuje reakcie sprostredkované IgE. Tieto bunky zohrávajú kľúčovú úlohu pri vývoji liečby ochorení, ako sú streptokokové infekcie, pri ktorých streptokoky skupiny mitis inhibujú aktiváciu žírnych buniek. Okrem toho výskumníci pomocou tohto modelu RBL 2H3 mc hodnotia toxické účinky rôznych látok, vrátane chemikálií, liekov a nanočastíc. Napríklad v nedávnej štúdii (2022) sa hodnotila cytotoxicita mikroplastov z polystyrénu na bunky RBL-2H3. Zistilo sa, že mikroplasty poškodzujú organely buniek RBL-2H3 a podporujú bunkovú smrť [3]. Ďalšia štúdia z roku 2021 hodnotila antialergický a protizápalový potenciál prírodného produktu, neferínu, s využitím modelu RBL 2H3 mc. Štúdia odhalila dobré antialergické a protizápalové vlastnosti tejto zlúčeniny [4].
Pokročilé metodiky v imunologickom meraní
Konzistentné a merateľné uvoľňovanie mediátorov z buniek RBL-2H3 z nich robí ideálny materiál pre praktickú fluorometriu, čo uľahčuje presné a spoľahlivé merania, ktoré sú kľúčové pre štúdium ochorení a hodnotenie terapeutických látok.
Bunka RBL-2H3, pochádzajúca z Rattus norvegicus, je neoceniteľným prínosom v základnom aj aplikovanom výskume v oblasti imunológie. Ponúka rozsiahle možnosti pre rozvoj našich poznatkov a liečbu imunologických ochorení.
Bunková línia RBL-2H3 pre pokročilý imunologický výskum
Bunky RBL-2H3: Vedecké publikácie
Nižšie uvádzame niekoľko zaujímavých vedeckých publikácií venovaných žírnym bunkám RBL-2H3:
Inhibičná aktivita narirutínu na degranuláciu buniek RBL-2H3
Táto vedecká štúdia bola uverejnená v časopise Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Štúdia navrhla, že narirutín, prírodná zlúčenina, má inhibičné účinky na degranuláciu buniek RBL-2H3 prostredníctvom regulácie signálnych dráh NF-κB, MAPK a tyrozínkinázy.
Táto štúdia uverejnená v časopise International Journal of Molecular Sciences (2020) navrhla, že zlúčenina apigenín významne potláča alergické a zápalové reakcie buniek RBL-2H3 a RAW264.7. Preto môže slúžiť ako potenciálny prostriedok na boj proti ochoreniam súvisiacim s imunitným systémom.
Táto vedecká štúdia uverejnená v časopise International Journal of Molecular Sciences (2021) hodnotila antialergické a protizápalové účinky prírodnej látky saponarínu s využitím rôznych bunkových línií, vrátane RBL-2H3.
Táto štúdia uverejnená v časopise „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2014) zistila, že extrakty z Benchalokawichianu a niektoré jeho aktívne zložky majú potenciálny inhibičný účinok na uvoľňovanie β-hexosaminidázy z buniek RBL-2H3.
Tento článok bol uverejnený v roku 2018 v časopise International Journal of Biological Macromolecules. Štúdia uvádza, že prírodný produkt Spirulina maxima inhibuje degranuláciu buniek RBL 2H3 tým, že zabraňuje fosforylácii MAPK a AKT.
Zdroje týkajúce sa buneckej línie RBL-2H3: protokoly, videá a ďalšie informácie
RBL-2H3 je široko používaná línia žírnych buniek. Dostupné zdroje týkajúce sa protokolov kultivácie a transfekcie RBL-2H3 sú uvedené tu:
- Model RBL-2H3 MC: Tento vedecký článok obsahuje protokoly na udržiavanie kultúr RBL-2H3 a na transfekciu RBL-2H3.
Tu je niekoľko zdrojov vysvetľujúcich protokol kultivácie buniek RBL-2H3:
- Bunky RBL-2H3: Táto webová stránka je užitočná na zoznámenie sa s protokolmi kultivácie buniek pre bunkovú líniu RBL-2H3. Okrem toho obsahuje informácie o kultivačných médiách a podmienkach kultivácie buniek RBL-2H3.
Bunková línia RBL-2H3: Najdôležitejšie otázky a odpovede pre výskumníkov
Referencie
- Passante, E. a N. Frankish, Bunková línia RBL-2H3: jej pôvod a vhodnosť ako modelu žírnej bunky. Inflamm Res, 2009. 58(11): s. 737–45.
- Li, Q. a kol., Pseudoalergická reakcia vyvolaná injekciou Qingkailing čiastočne prostredníctvom signálnej dráhy PI3K-Rac1 v bunkách RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): s. 353–360.
- Liu, L., et al., Mikro- (nano-)plasty z polystyrénu poškodzujú organely buniek RBL-2H3 a podporujú MOAP-1 pri indukcii apoptózy. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: s. 129550.
- Chiu, K.-M., a kol., Antialergické a protizápalové účinky neferínu na bunky RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): s. 10994.