Prejsť na domovskú stránku

Bunka MG-63: Podrobný sprievodca bunkami MG-63 vo výskume osteosarkómu

Bunky MG-63 sú fibroblastové bunky ľudského osteosarkómu, ktoré ponúkajú široké spektrum výskumných aplikácií v biomedicínskej oblasti. Môže to zahŕňať štúdium procesov súvisiacich s kosťami, ako je vývoj kostí, diferenciácia atď. Okrem toho slúži bunková línia MG-63 ako vhodný in vitro model na štúdium životaschopnosti, proliferácie a adhézie kostných buniek.

Všeobecné charakteristiky a pôvod buneckej línie MG-63

Táto časť článku sa bude venovať pôvodu a všeobecným charakteristikám buneckej línie MG-63. Dozviete sa: Čo je bunecka línia MG-63? Aký je pôvod buneckej línie MG-63? Aká je morfológia buniek MG-63? Aká je veľkosť buniek MG-63?

  • MG-63 je typ osteoblastovej buneckej línie pochádzajúcej z kosti 14-ročného pacienta s osteosarkómom (kaukazského pôvodu). A. Billiau a kolegovia túto bunecku líniu uložili v roku 1977.
  • Bunka MG-63 má morfológiu podobnú fibroblastom.
  • Ľudské osteosarkómové bunky (MG-63) vykazujú hypotriploidiu. Modálny počet chromozómov pre tieto bunky je 66, čo sa vyskytuje približne u 44 % buneckej populácie. Vyššie ploidie sa zaznamenávajú takmer u 2 % buneckej populácie. Okrem toho sa vo všetkých bunkách vo veľkom množstve vyskytuje 18–19 markerových chromozómov.

SEM snímka kultúry sarkómových buniek.

Informácie o kultivácii buniek línie MG-63

Dôležité informácie o požiadavkách na kultiváciu buniek vám môžu uľahčiť prácu. V tejto časti článku sú uvedené všetky kľúčové body, ktoré sú dôležité pre kultiváciu a udržiavanie buniek MG-63. Dozviete sa tu: Aký je čas zdvojnásobenia buniek MG-63? Aké rastové médiá sa používajú pre bunky MG-63? Aká je hustota výsevu buniek MG-63?

Kľúčové body pre kultiváciu buniek MG-63

Doba zdvojnásobenia

Doba zdvojnásobenia populácie buniek MG-63 sa pohybuje v rozmedzí 28–38 hodín v závislosti od kultivačných podmienok.

Rastové vlastnosti

MG-63 je adhezívna bunková línia.

Hustota výsevu

Pre bunky MG-63 sa odporúča hustota buniek 1 x 104 buniek/cm2. Adherentné bunky sa premyjú 1 x fosfátovým pufrom (PBS) bez horčíka a vápnika. Tieto bunky sa potom inkubujú s disociačným roztokom (Accutase), pridá sa čerstvé médium a centrifugujú sa. Získaný bunkový pelet sa resuspenduje v čerstvom médiu a nanesie do novej fľaše na rast.

Rastové médium

Na kultiváciu buniek MG-63 sa používajú kultivačné médiá DMEM alebo Ham's F12. Tieto médiá je možné obohatiť o 5 % fetálneho bovinného séra (FBS), 3,0 g/l glukózy, 2,5 mM L-glutamínu a 1,2 g/l NaHCO₃ pre optimálny rast buniek. Médiá by sa mali vymieňať 2–3-krát týždenne.

Podmienky kultivácie

Na kultiváciu buniek MG-63 je potrebný zvlhčený inkubátor pri teplote 37 °C a prívod 5 % CO₂.

Skladovanie

Tieto bunky podobné osteoblastom je možné skladovať v parnej fáze tekutého dusíka alebo pri teplote nižšej ako -150 °C, aby sa zachovala životaschopnosť buniek.

Proces zmrazenia a médium

Na zmrazenie buniek MG-63 sa používajú kultivačné médiá CM-1 alebo CM-ACF. Vo všeobecnosti sa odporúča postup pomalého zmrazenia, aby sa predišlo šoku buniek a zachovala sa ich životaschopnosť.

Proces rozmrazovania

Zmrazené bunky sa inkubujú 40 až 60 sekúnd v predhriatom vodnom kúpeli (37 stupňov Celzia). Bunky sa resuspendujú v čerstvom rastovom médiu a prelejú do novej banky. Po 24 hodinách inkubácie sa médium vymení, aby sa odstránili zložky mraziaceho média.  

Úroveň biologickej bezpečnosti

Na manipuláciu a udržiavanie kultúr MG-63 sú potrebné laboratórne podmienky úrovne biologickej bezpečnosti 1.

MG 63 cells

Bunky MG-63 pred dosiahnutím konfluencie a po ňom.

Bunka MG-63: Výhody a nevýhody

MG-63 je široko používaná osteoblastová bunková línia. Má niekoľko výhod a nevýhod. V tomto článku spomenieme niekoľko hlavných kladov a záporov bunkovej línie MG-63.

Výhody

Výhody buniek MG-63 sú:

  • Vlastnosti podobné osteoblastom

    Bunka MG-63 vykazuje vlastnosti podobné osteoblastom, vďaka čomu je vhodná na štúdium procesov a ochorení súvisiacich s kosťami. Môže sa tiež použiť na skúmanie adhézie, proliferácie a životaschopnosti buniek na titánových povrchoch [1].

  • Vhodnosť na transfekciu

    Bunky MG-63 sa vo veľkej miere využívajú v transfekčných štúdiách, čo umožňuje výskum génovej expresie, funkcie a bunkových procesov.

  • Vysoká produkcia interferónu

    Bunky MG-63 sú schopné vysokej produkcie interferónu. Pri indukcii cykloheximidom, kyselinou polyinozinovou a polycytidylovou a aktinomycínom môžu dosiahnuť 3,7-násobne vyšší výťažok interferónu na cm² v porovnaní s diploidnými fibroblastami [2].

Nevýhody

Nevýhody spojené s B-bunkami MG-63 sú:

  • Heterogenita

    Bunky MG-63 vykazujú heterogenitu v rámci buneckej populácie, čo môže ovplyvniť reprodukovateľnosť.

  • Nádorová bunková línia

    MG-63 je nádorová bunková línia a nemusí plne reprezentovať správanie a fyziológiu normálnych buniek, čo obmedzuje jej použitie v určitých laboratórnych experimentoch.

Objednajte si články MG-63 ešte dnes

Využitie buniek MG-63

Bunky MG-63 sú vynikajúcim výskumným nástrojom. Ponúkajú mnoho sľubných možností využitia vo výskume. Nižšie sú uvedené niektoré z hlavných oblastí využitia buniek MG-63 vo výskume.

  • Štúdium procesov a ochorení súvisiacich s kosťami: Bunky MG-63 sú bunky podobné osteoblastom (tvorivé kosti). Preto sa tieto bunky vo veľkej miere používajú na štúdium ochorení kostí a bunkových procesov, vrátane vývoja, diferenciácie a mineralizácie. Okrem toho sa tieto bunky vo veľkej miere používajú na skríning liekov na podporu hojenia kostí. Vo výskume sa bunky MG-63 použili na štúdium terapeutického potenciálu ekologicky syntetizovaných nanočastíc oxidu zinku z rastliny Scutellaria baicalensis na proliferáciu, mineralizáciu a diferenciáciu kostných buniek [3].
  • Výskum rakoviny: Bunky MG-63 sa široko využívajú vo výskume rakoviny. V niekoľkých štúdiách sa tieto osteosarkómové bunky použili na pochopenie signálnych dráh rakoviny a na hodnotenie cytotoxického a terapeutického potenciálu liekov. Štúdia vykonaná v roku 2019 skúmala protinádorové vlastnosti prírodnej zlúčeniny tomentosínu s využitím buniek MG-63. Zistenia ukázali, že tomentosín vykazuje protinádorové účinky tým, že spúšťa produkciu intracelulárnych reaktívnych foriem kyslíka (ROS) [4].

Vedecké publikácie zaoberajúce sa bunkami MG-63

Nižšie sú uvedené niektoré vedecké publikácie zaoberajúce sa bunkovou líniou MG-63, ktorá je podobná osteoblastom.

miR-192 zvyšuje citlivosť rakovinových buniek osteosarkómu MG-63 na liek metotrexát

Tento článok bol uverejnený v časopise Pathology – Research and Practice v roku 2020. V rámci tohto výskumu sa pomocou buniek MG-63 skúmali molekulárne mechanizmy podieľajúce sa na liekovej rezistencii v rakovinových bunkách osteosarkómu (MG-63). Výsledky ukázali, že miRNA-192 by mohla byť užitočným cieľom pri prekonávaní rezistencie voči metotrexátu pri osteosarkóme.

Ekologicky syntetizované nanočastice oxidu zinočnatého regulujú apoptotickú expresiu v rakovinových bunkách kostí MG-63

Tento výskum bol uverejnený v časopise „Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology“ (2020). Štúdia poukázala na protinádorový potenciál zelených syntetizovaných nanočastíc oxidu zinku (ZnONPs) z Rehmanniae Radix proti bunkám kostnej rakoviny (MG-63).

Osteogénna diferenciácia a mineralizačný potenciál nanočastíc oxidu zinku z rastliny Scutellaria baicalensis na ľudských osteoblastových bunkách MG-63

Tento výskumný článok bol uverejnený v roku 2021 v časopise „Materials Science and Engineering“. Táto štúdia poukazuje na vlastnosti podporujúce hojenie kostí biosyntetizovaných nanočastíc oxidu zinku z rastliny Scutellaria baicalensis s využitím buneckej línie MG-63.

Kurkumín inhibuje proliferáciu a inváziu buniek MG-63 prostredníctvom inaktivácie signálnej dráhy p-JAK2/p-STAT3

Táto štúdia bola uverejnená v roku 2021 v časopise „Onco Targets and Therapy“. Výskum poukázal na protinádorové vlastnosti kurkumínu proti bunkám osteosarkómu. Táto zlúčenina vykazovala tieto terapeutické účinky prostredníctvom inaktivácie signálnej dráhy p-JAK2/p-STAT3 pri rakovine.

Vplyv vitamínu D3 ošetreného biopoľom na proliferáciu, diferenciáciu a zrenie parametrov súvisiacich s kosťami v bunkovej línii MG-63

Táto štúdia bola uverejnená v roku 2018 v časopise International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. Štúdia zistila, že vitamín D3 ošetrený bioenergiou pozitívne ovplyvňuje proliferáciu, dozrievanie a diferenciáciu kostných buniek a zlepšuje parametre zdravia kostí.

Zdroje týkajúce sa buneckej línie MG-63: protokoly, videá a ďalšie materiály

K dispozícii je niekoľko zdrojov týkajúcich sa buneckej línie MG-63, ktoré objasňujú protokoly kultivácie buniek a transfekcie.

  • Transfekcia buniek MG-63: Toto video komplexne vysvetľuje protokol transfekcie buniek MG-63.
  • Pasážovanie adhezívnych buniek: Toto video poskytuje návod na subkultiváciu alebo pasážovanie adhezívnych bunkových línií. Pomôže vám osvojiť si základné protokoly kultivácie buniek.

Na nasledujúcom odkaze nájdete protokol kultivácie buniek MG-63.

  • Kultivácia buniek MG-63: Táto webová stránka poskytuje jednoduchý a podrobný protokol na subkultiváciu alebo rozdelenie bunkovej línie MG-63.

Často kladené otázky o bunkách MG-63

Bunky MG-63 sú ľudskou bunkovou líniou osteosarkómu, ktorá sa bežne používa vo výskume na štúdium biológie kostí, rakoviny a testovanie liekov. Sú odvodené z osteosarkómu 14-ročného muža a vykazujú vlastnosti typické pre osteoblastické bunky.

Bunky MG-63 pochádzajú z ľudského osteosarkómu, čo je typ rakoviny kostí. Konkrétne pochádzajú zo zhubného kostného tkaniva ľudského pacienta.

Čas zdvojnásobenia buniek MG-63 sa zvyčajne pohybuje od 24 do 36 hodín v závislosti od podmienok kultivácie a použitého média.

Bunky MG-63 vykazujú abnormálny karyotyp s viacerými chromozomálnymi abnormalitami. Zahŕňa to numerické aj štrukturálne aberácie, ktoré sú charakteristické pre rakovinové bunky.

Kým bunky MG-63 sú osteosarkómové bunky, ľudské fibroblasty pochádzajú zo spojivového tkaniva a podieľajú sa na hojení rán a tvorbe extracelulárnej matrix. Oba typy buniek sa používajú pri štúdiu bunkových interakcií, najmä v kontexte kostného a tkanivového inžinierstva.

Bunky MG-63 majú robustné vlastnosti prichytenia buniek, vďaka čomu sú vhodné na štúdie zahŕňajúce adhéziu, šírenie a interakciu buniek s rôznymi biomateriálmi. Tieto vlastnosti sú kľúčové pre pochopenie funkcií osteoblastov a optimalizáciu kostných implantátov.

Bunky MG-63 sa využívajú vo výskume na skúmanie úlohy adenozínu v kostnom metabolizme. Adenozínové receptory na týchto bunkách sprostredkúvajú rôzne funkcie vrátane tvorby a resorpcie kostí, vďaka čomu sú cenné pri štúdiu molekulárnych mechanizmov kostného metabolizmu.

Amelogenín, proteín nevyhnutný pre tvorbu skloviny v zuboch, možno študovať aj pomocou buniek MG-63 s cieľom preskúmať jeho účinky na kostné bunky a jeho potenciálnu úlohu v inžinierstve a regenerácii kostného tkaniva.

Bunky MG-63 sú dôležité pri štúdiu optimalizácie osseointegrácie, čo je proces integrácie kostného tkaniva s implantátmi. Výskumníci používajú tieto bunky na testovanie nových materiálov a úprav povrchu, ktoré môžu zlepšiť integráciu a stabilitu implantátov.

Fenotypová stabilita sa vzťahuje na konzistenciu bunkových charakteristík v priebehu času a počas viacerých pasáží. V prípade buniek MG-63 je zachovanie fenotypovej stability nevyhnutné na zabezpečenie spoľahlivých a reprodukovateľných výsledkov experimentov.

Bunky MG-63 slúžia ako model na štúdium funkcií osteoblastov vrátane tvorby kostí a mineralizácie, ako aj patofyziológie osteosarkómu, čo umožňuje nahliadnuť do progresie rakoviny a potenciálnych terapeutických cieľov.

Áno, bunky MG-63 možno použiť na skúmanie účinkov ľudských interferónov na bunky rakoviny kostí vrátane ich antivírusových, antiproliferačných a imunomodulačných vlastností, čo prispeje k pochopeniu imunoterapie rakoviny.

Referencie

  1. Wandiyanto, J.V., et al., Osud osteoblastových buniek MG-63 na predinfikovaných baktericídnych nanostruktúrovaných titánových povrchoch. Materials (Basel), 2019. 12(10).
  2. Billiau, A., et al., Ľudský interferón: hromadná produkcia v novo vytvorenej bunkovej línii MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): s. 11–5.
  3. Tang, Y., et al., Potenciál osteogénnej diferenciácie a mineralizácie nanočastíc oxidu zinočnatého z rastliny Scutellaria baicalensis na ľudských osteoblastových bunkách MG-63. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: s. 111656.
  4. Lee, C.M., et al., Tomentozín vykazuje antikarcinogénny účinok na ľudské osteosarkómové bunky MG-63 prostredníctvom indukcie intracelulárnych reaktívnych foriem kyslíka. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): s. 1508.