EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS
Eagleovo minimálne esenciálne médium (EMEM) je jedným z najčastejšie používaných bazálnych médií na kultiváciu širokého spektra cicavčích buniek, najmä adhezívnych bunkových línií. Toto klasické zloženie, pôvodne vyvinuté Harrym Eaglom, obsahuje esenciálne aminokyseliny, vitamíny a anorganické soli potrebné na podporu rastu primárnych buniek aj etablovaných bunkových línií za štandardných kultivačných podmienok.
Táto pripravená na použitie, sterilne filtrovaná tekutá formulácia je doplnená o Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutamín, D-glukózu (1,0 g/l) a 2,2 g/l hydrogenuhličitanu sodného (NaHCO3), vďaka čomu je vhodná na použitie v atmosfére inkubátora s regulovaným obsahom CO2 (zvyčajne 5 % CO2). Pridaný fenolový červený slúži ako indikátor pH, čo umožňuje pohodlné vizuálne sledovanie stavu média počas kultivácie buniek.
Kľúčové vlastnosti
- Klasické zloženie Eagle’s MEM s Earleho vyváženým soľným roztokom (EBSS)
- Obsahuje 2 mM L-glutamínu – pripravené na okamžité použitie
- 2,2 g/l hydrogenuhličitanu sodného – pufrované pre inkubáciu pri 5 % CO2
- S D-glukózou (1,0 g/l) ako primárnym zdrojom uhlíka
- S fenolovou červenou ako indikátorom pH
- Bez HEPES a bez pyruvátu sodného
- Sterilne filtrované tekuté médium, pripravené na použitie
- pH 7,0 – 7,6
Typické použitie
EMEM podporuje kultiváciu širokej škály bunkových línií cicavcov, vrátane HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 a mnohých primárnych buniek. Bežné použitie zahŕňa:
- Rutinnú údržbu a expanziu adhezívnych bunkových línií
- Pracovné postupy pri šírení vírusov a výrobe vakcín
- Aplikácie v oblasti cytotoxicity a biologických testov
- Štúdie transfekcie a expresie proteínov
- Základný výskum v oblasti bunkovej a molekulárnej biológie
Pre optimálny rast buniek sa EMEM zvyčajne dopĺňa 5–10 % fetálnym bovinným sérom (FBS) a v závislosti od buneckej línie aj neesenciálnymi aminokyselinami (NEAA) a antibiotikami, ako je penicilín/streptomycín.
Manipulácia a skladovanie
Neotvorenú fľašu skladujte pri teplote +2 °C až +8 °C, chránenú pred svetlom. Po otvorení používajte za aseptických podmienok. L-glutamín v roztoku podlieha postupnej degradácii – pre dosiahnutie najlepších výsledkov odporúčame médium spotrebovať do 4 týždňov od otvorenia alebo v prípade dlhšieho skladovania doplniť čerstvý L-glutamín pred použitím. Pred pridaním do buniek nechajte médium zohriať na 37 °C.
Kvalita
Vyrobené podľa prísnych noriem kvality. Každá šarža je testovaná na sterilitu, pH, osmolalitu a hladiny endotoxínov, aby sa zabezpečil konzistentný výkon pri aplikáciách v bunkových kultúrach.
Špecifikácie produktu
| Špecifikácia | Podrobnosti |
|---|---|
| Typ produktu | MEM |
| Kategória produktu | Médiá pre bunkové kultúry |
| Formát | Tekuté |
| Sterilné | Áno |
| Veľkosť | 500 ml |
| L-glutamín | S L-glutamínom (2 mM) |
| Glukóza | S glukózou (1,0 g/l) |
| Hydrogénuhličitan sodný | S NaHCO3 (2,2 g/l) |
| HEPES | Bez HEPES |
| Pyruvát sodný | Bez pyruvátu sodného |
| Fenolová červená | S fenolovou červenou |
| Soľný roztok | Earleho vyvážený soľný roztok (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Obsah endotoxínov | Nešpecifikované |
| Skladovanie | +2 °C až +8 °C |
Zloženie (zloženie na liter)
| Zložka | Koncentrácia (mg/l) |
|---|---|
| Anorganické soli | |
| Chlorid vápenatý · 2H2O | 265,00 |
| Síran horečnatý | 97,72 |
| Chlorid draselný | 400,00 |
| Chlorid sodný | 6 800,00 |
| Dihydrogénfosforečnan sodný, bezvodý | 122,00 |
| Hydrogénuhličitan sodný (NaHCO3) | 2 200,00 |
| Aminokyseliny | |
| L-arginín · HCl | 126,00 |
| L-cystín · 2HCl | 31,30 |
| L-glutamín | 292,00 |
| L-histidín · HCl · H2O | 42,00 |
| L-izoleucín | 52,00 |
| L-leucín | 52,00 |
| L-lyzín · HCl | 72,50 |
| L-metionín | 15,00 |
| L-fenylalanín | 32,00 |
| L-treonín | 48,00 |
| L-tryptofán | 10,00 |
| L-tyrozín · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-valín | 46,00 |
| Vitamíny | |
| D-pantotenát vápenatý | 1,00 |
| Cholínchlorid | 1,00 |
| Kyselina listová | 1,00 |
| myo-inozitol | 2,00 |
| Nikotínamid | 1,00 |
| Pyridoxal · HCl | 1,00 |
| Riboflavín | 0,10 |
| Tiamín · HCl | 1,00 |
| Ostatné zložky | |
| D(+)-glukóza | 1 000,00 |
| Fenolová červená | 10,00 |