DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3
DMEM:Ham's F12 je všeobecne uznávané a široko používané základné médium v bunkových kultúrach pre biologický výskum. Slúži ako základný zdroj živín pre rast rôznych línií cicavčích buniek, najmä ak je doplnené o fetálne bovinné sérum (FBS).
Toto jedinečné zloženie kombinuje Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) a Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) v presnom pomere 1:1. Pridanie L-glutamínu ďalej vylepšuje jeho zloženie.
DMEM, odvodené od Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), ponúka v porovnaní so svojím predchodcom zvýšenú koncentráciu aminokyselín a vitamínov. Naopak, Ham's F-12 je založené na médiu Ham's F-10 a poskytuje doplnkový súbor esenciálnych zložiek.
Na podporu optimálneho rastu buniek je bežnou praxou dopĺňať DMEM:Ham's F12 o FBS v typickej koncentrácii 5–10 %. Toto doplnenie je nevyhnutné, pretože médiu chýbajú rastové hormóny, lipidy a proteíny, ktoré sú kľúčové pre vývoj buniek.
DMEM:Ham's F12 obsahuje systém pH pufrov a je často doplnené fenolovou červenou, indikátorom pH. Kultivované bunky v DMEM:Ham's F12 alebo v akomkoľvek médiu využívajúcom bikarbonátový pufrový systém vyžadujú kontrolované prostredie s obsahom CO2 5–10 % na udržanie primeranej hladiny pH.
Kontrola kvality
- Sterilne filtrované
Skladovanie a trvanlivosť
- Skladujte pri teplote +2 °C až +8 °C, chránené pred svetlom.
- Po otvorení skladujte pri teplote 4 °C a spotrebujte do 6–8 týždňov.
Prepravné podmienky
- Okolitá teplota
Skladovanie
- Skladujte v chladničke pri teplote +2 °C až +8 °C v tme. Vyhnite sa zmrazeniu a častému otepľovaniu na +37 °C, pretože to znižuje kvalitu produktu.
- Nezahrievajte médium nad 37 °C a nepoužívajte nekontrolované zdroje tepla, ako sú mikrovlnné rúry.
- Ak sa má použiť len časť média, odoberte potrebné množstvo a pred použitím ho zahrejte na izbovú teplotu.
Zloženie
| Kategória | Zložky | Koncentrácia (mg/l) |
| Aminokyseliny | Glycín | 18,75 |
| L-alanín | 4,45 | |
| L-arginín HCl | 147,50 | |
| L-asparagín H₂O | 7,50 | |
| Kyselina L-asparagová | 6,65 | |
| L-cysteín HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystín 2 HCl | 31,29 | |
| Kyselina L-glutámová | 7,35 | |
| L-glutamín | 365,00 | |
| L-histidín HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleucín | 54,47 | |
| L-leucín | 59,05 | |
| L-lyzín HCl | 91,25 | |
| L-metionín | 17,24 | |
| L-fenylalanín | 35,48 | |
| L-prolín | 17,25 | |
| L-serín | 26,25 | |
| L-treonín | 53,45 | |
| L-tryptofán | 9,02 | |
| L-tyrozín 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valín | 52,85 | |
| Vitamíny | D-biotín | 0,0035 |
| Cholínchlorid | 8,98 | |
| D-pantotenát vápenatý | 2,24 | |
| Kyselina listová | 2,66 | |
| myo-inozitol | 12,60 | |
| Nikotínamid | 2,02 | |
| Pyridoxín HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal HCl | 2,00 | |
| Riboflavín | 0,219 | |
| Tiamín HCl | 2,17 | |
| Vitamín B12 | 0,68 | |
| Anorganické soli | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Ostatné zložky | D-glukóza | 3151,00 |
| Hypoxantín | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Kyselina linolová | 0,042 | |
| Kyselina lipoová | 0,105 | |
| Fenolová červená sodná soľ | 8,63 | |
| Putrescín 2 HCl | 0,081 | |
| Pyruvát sodný | 55,00 | |
| Tymidín | 0,365 |