CTX bunky

CTX (označovaná aj ako CTX0E03) je podmienečne imortalizovaná línia ľudských neurálnych kmeňových buniek odvodená z kortikálneho neuroepitelu ľudského plodu v prvom trimestri. Táto línia bola vytvorená retrovirovou integráciou fúzného transgenu c-mycER^TAM, ktorý stimuluje proliferáciu buniek iba v prítomnosti 4-hydroxytamoxifénu (4-OHT). V neprítomnosti 4-OHT a v médiu bez mitogénov dochádza u buniek CTX0E03 k zastaveniu rastu a k diferenciácii na neuróny a astrocyty, pričom si zachovávajú multipotentnú diferenciáciu. Táto bunka je klonálna, má normálny ľudský karyotyp (46,XY) a bola vyvinutá v podmienkach kompatibilných s GMP pre potenciálne klinické použitie.

CTX0E03 bola hodnotená v predklinických modeloch ischemickej cievnej mozgovej príhody (model potkanov s okluziou strednej mozgovej artérie – MCAo), kde implantované bunky podporili významné zotavenie senzorimotorických funkcií. Táto línia vstúpila do klinických štúdií zameraných na liečbu cievnej mozgovej príhody. Používa sa tiež ako in vitro model pre biológiu neurálnych kmeňových buniek, diferenciáciu kortikálnych neurónov, výskum Alzheimerovej choroby (štúdie toxicity Abeta) a neurofarmakologický skríning. Systém podmienečnej imortalizácie robí CTX0E03 obzvlášť vhodným pre štúdie bezpečnosti a účinnosti, keďže proliferáciu je možné vypnúť odstránením 4-OHT pred transplantáciou.

CTX0E03 sa kultivuje v médiu DMEM/F12 doplnenom o doplnok N2, EGF (20 ng/ml) a FGF-2 (20 ng/ml) s 4-OHT (1 μM) na povrchoch potiahnutých laminínom pri 37 °C v 5 % CO₂. Na diferenciáciu sa rastové faktory a 4-OHT odstránia. Táto línia je zaradená do úrovne biologickej bezpečnosti 1 (v Nemecku ako GMO-S1 kvôli integrovanému transgenu c-mycERTAM). Používatelia by mali dodržiavať platné predpisy týkajúce sa GMO vo svojej jurisdikcii.