Bunky HT55

430,00 €*

Produkty sa dodávajú zmrazené na suchom ľade v kryotrubkách. Každá kryotrubka obsahuje zvyčajne 3 × 10 ⁶ buniek pre adhezívne línie alebo 5 × 10⁶ buniek pre suspenzné línie (podrobnosti nájdete v certifikáte analýzy šarže).

Ceny bez daní plus náklady na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 305018

Karta bezpečnostných údajov

Karta výrobku

Dohoda o prenose materiálu

Popis	HT55 je ľudská bunková línia adenokarcinómu konečníka, izolovaná z primárneho nádoru konečníka 54-ročnej ženy kaukazského pôvodu. Táto línia rastie ako adhezívna monovrstva s epiteliálnou morfológiou a je zaregistrovaná v databáze Cellosaurus pod označením CVCL_1294. HT55 nesie viacero heterozygotných a homozygotných mutácií s stratou funkcie v tumor-supresorovom géne APC (adenomatózna polypóza hrubého čreva), vrátane p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr a p.Lys241Ter (všetky heterozygotné), ako aj homozygotnú substitúciu p.Arg213Leu. Tento mutačný profil robí z HT55 biologicky relevantný model kolorektálnej karcinogenézy riadenej génom APC, odrážajúci dysreguláciu kanonického WNT signálneho dráh, ktorá je hnacou silou väčšiny prípadov kolorektálneho karcinómu u ľudí. HT55 sa široko využíva vo výskume kolorektálneho karcinómu na štúdium WNT/β-katenínovej signalizácie, funkcie tumor-supresorového génu APC, citlivosti a rezistencie na lieky, ako aj na predklinické hodnotenie cielených liečiv namierených proti zložkám WNT dráhy. Táto línia je vhodná pre in vitro farmakologické testy a štúdie s xenotransplantátmi v imunokompromitovaných myšacích modeloch, čím poskytuje adhezívnu a ľahko manipulovateľnú in vitro platformu pre mechanistický a translačný výskum kolorektálneho karcinómu. Prítomnosť viacerých mutácií spôsobujúcich skrátenie génu APC robí z línie HT55 reprezentatívny príklad mikrosatelitovo stabilného, chromozómovo nestabilného podtypu kolorektálneho karcinómu, ktorý je bežne spôsobený stratou funkcie APC. HT55 sa kultivuje v médiu EMEM (MEM Eagle, w: 2 mM L-glutamín, w: 2,2 g/l NaHCO₃, w: EBSS; číslo výrobku Cytion 820100a) doplnenom o 10 % FBS pri 37 °C vo zvlhčenej atmosfére s 5 % CO₂. Bunky sa subkultivujú pomocou Accutase, keď dosiahnu približne 80–90 % konfluencie, s odporúčaným pomerom delenia 1:3 až 1:5 a hustotou výsevu 1–3 × 10⁴ buniek/cm². Médium sa obnovuje každé 2–3 dni. Doba zdvojnásobenia je približne 28 hodín.
Organizmus	Ľudské
Tkanivo	Konečník
Choroba	Adenokarcinóm
Aplikácie	Výskum kolorektálneho karcinómu; štúdie signálnej dráhy WNT/APC; testovanie citlivosti a rezistencie na lieky; predklinická onkológia; modely xenotransplantátov; hodnotenie cielených terapií
Synonymá	HT55

Vek	54 rokov
Pohlavie	Ženy
Etnická príslušnosť	Kaukazský
Morfológia	Epitelu podobné
Typ bunky	Epitelové bunky
Rastové vlastnosti	Adherent

Citácie	HT55 (katalógové číslo Cytion 305018)
Úroveň biologickej bezpečnosti	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1294

Mutačný profil	Mutácia: p.Gln1131Ter, heterozygotná; Mutácia: p.Gln1303Ter, heterozygotná; Mutácia: p.Arg1463Ser, heterozygotná; Mutácia: p.Asn581Tyr, heterozygotná; Mutácia: p.Lys241Ter, heterozygotná; Mutácia: p.Arg213Leu, homozygotná

Kultúrne médium	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Doplnky	Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo	Accutase
Zdvojnásobenie času	28 hodín
Subkultivácia	Odstráňte staré médium z priľnutých buniek a premyte ich PBS bez vápnika a horčíka. Pre T25 fľaše použite 3–5 ml PBS a pre T75 fľaše 5–10 ml. Potom bunky úplne zalejte prípravkom Accutase, pričom pre fľaše T25 použite 1–2 ml a pre fľaše T75 2,5 ml. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8–10 minút, aby sa uvoľnili. Po inkubácii bunky jemne premiešajte s 10 ml média, aby sa znovu suspendovali, a potom centrifugujte pri 300×g po dobu 3 minút. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu suspendujte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Pomer rozdelenia	1 až 5
Hustota výsevu	1 až 3 x 10⁴ ^buniek/cm²
Obnova tekutín	Každé 2 až 3 dni
Zmrazovacie médium	Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Rozmrazovanie a kultivácia buniek	Overte si, že injekčná liekovka zostane pri doručení hlboko zmrazená, pretože bunky sa prepravujú na suchom ľade, aby sa počas prepravy udržala optimálna teplota. Po prijatí buď okamžite uskladnite kryovialku pri teplote nižšej ako -150 °C, aby ste zabezpečili zachovanie bunkovej integrity, alebo prejdite na krok 3, ak je potrebná okamžitá kultivácia. V prípade okamžitej kultivácie injekčnú liekovku rýchlo rozmrazte ponorením do vodného kúpeľa s teplotou 37 °C s čistou vodou a antimikrobiálnym prostriedkom, pričom ju jemne miešajte 40 - 60 sekúnd, kým nezostane malý ľadový chumáč. Všetky ďalšie kroky vykonajte v sterilných podmienkach v prietokovom digestore a pred otvorením kryovialku dezinfikujte 70 % etanolom. Opatrne otvorte dezinfikovanú fľaštičku a preneste bunkovú suspenziu do 15 ml centrifugačnej skúmavky obsahujúcej 8 ml kultivačného média s izbovou teplotou a jemne premiešajte. Zmes odstreďujte pri 300 x g počas 3 minút, aby sa bunky oddelili, a opatrne zlikvidujte supernatant obsahujúci zvyšky zmrazovacieho média. Pelet buniek jemne resuspendujte v 10 ml čerstvého kultivačného média. V prípade adherentných buniek rozdeľte suspenziu medzi dve kultivačné banky T25; v prípade suspenzných kultúr preneste všetko médium do jednej banky T25, aby ste podporili účinnú interakciu a rast buniek. Dodržiavajte zavedené subkultivačné protokoly na nepretržitý rast a udržiavanie bunkovej línie, čím sa zabezpečia spoľahlivé výsledky experimentov.
Inkubačná atmosféra	37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.
Podmienky prepravy	Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
Podmienky skladovania	Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Ak máte v úmysle používať bunkové línie Cytion výlučne na interný výskum v jednom výskumnom zariadení, vyplňte a podpíšte našu Zmluvu o prevode materiálu (MTA) a odošlite ju spolu s objednávkou.

V prípade akéhokoľvek komerčného využitia – vrátane, ale nielen, práce za odmenu, testovania kontroly kvality, uvedenia produktu na trh, diagnostického využitia alebo regulačných štúdií – vyplňte formulár o zamýšľanom využití, aby sme mohli pripraviť zmluvu prispôsobenú vášmu projektu.

Upozornenie: Zmluva MTA sa vzťahuje iba na určité bunkové línie. Ak sa toto upozornenie a dokument MTA nachádzajú na stránke produktu, zmluva je platná. V prípade bunkových línií, na ktoré sa zmluva MTA nevzťahuje, nebude uvedený žiadny odkaz na zmluvu. Zmluva MTA nie je platná pre zákazníkov v Amerike, Číne alebo na Taiwane. Kontaktujte našu americkú pobočku, aby ste získali príslušnú zmluvu.

Bunky HT55

Všeobecné informácie

Charakteristika

Regulačné údaje

Biomolekulárne údaje

Spracovanie

Kontrola kvality a molekulárna analýza

Dohoda o prenose materiálu