HROG59 Celler

800,00 €*

Produkterna levereras frysta på torris i kryorör. Varje kryorör innehåller vanligtvis 3 × 10 ⁶ celler för adherenta cellinjer eller 5 × 10⁶ celler för suspensionscellinjer (se batchens CoA för mer information).

Priserna är exklusive skatter och fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300880

Säkerhetsdatablad

Produktblad

Avtal med tredje part

Beskrivning	HROG59 är en primär human glioblastoma multiforme (GBM)-cellinje som etablerats från nyligen resekterad tumörvävnad från en vuxen patient som diagnostiserats med WHO-grad IV glioblastom. Cellinjen genererades som en del av ett systematiskt arbete för att utveckla gliommodeller med extremt låg passage som bevarar patientspecifika biologiska och molekylära egenskaper. HROG59-celler växer vidhäftande in vitro och uppvisar en fibroblastliknande morfologi som är typisk för primära GBM-kulturer. Linjen har hållits under standardiserade odlingsförhållanden för att minimera genetisk drift och upprätthålla fenotypisk stabilitet. HROG59 har använts för att utvärdera känsligheten för standardbehandling och prövningsläkemedel vid glioblastombehandling, inklusive alkylerande medel och målinriktade hämmare. Som en lågpassage, patienthärledd GBM-modell, tillhandahåller HROG59 ett kliniskt relevant in vitro-system för att studera glioblastombiologi, intertumoral heterogenitet och terapeutiska responsmekanismer, samtidigt som den bibehåller en hög trohet till det ursprungliga tumörprovet.
Organism	Människan
Vävnad	Hjärna, R, parietooccipital
Sjukdom	Glioblastom

Ålder	49 år
Kön	Kvinna
Etnisk tillhörighet	Kaukasisk
Egenskaper för tillväxt	Följsam

Citationstecken	HROG59 (Cytion katalognummer 300880)
Biosäkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_4U51
Insättare	M. Linnebacher

Kulturmedium	DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukos, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Kosttillskott	Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens	Accutase
Subkulturering	Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Frys mediet	Som kryokonserveringsmedium använder vi 50% basalt medium + 40% FBS + 10% DMSO, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Upptining och odling av celler	Bekräfta att flaskan är djupfryst vid leverans, eftersom cellerna skickas på torris för att bibehålla optimala temperaturer under transporten. Vid mottagandet ska du antingen förvara kryovialen omedelbart vid temperaturer under -150 °C för att säkerställa att cellernas integritet bevaras, eller gå vidare till steg 3 om omedelbar odling krävs. Vid omedelbar odling ska injektionsflaskan snabbt tinas genom att den sänks ned i ett 37 °C vattenbad med rent vatten och ett antimikrobiellt medel och omrörs försiktigt i 40-60 sekunder tills en liten isklump återstår. Utför alla efterföljande steg under sterila förhållanden i en flödeshuv och desinficera kryovialerna med 70 % etanol innan de öppnas. Öppna försiktigt den desinficerade flaskan och överför cellsuspensionen till ett 15 ml centrifugrör som innehåller 8 ml rumstempererat odlingsmedium och blanda försiktigt. Centrifugera blandningen vid 300 x g i 3 minuter för att separera cellerna och kassera försiktigt supernatanten som innehåller resterande frysmedium. Resuspendera försiktigt cellpelleten i 10 ml färskt odlingsmedium. För adherenta celler, fördela suspensionen mellan två T25-kulturkolvar; för suspensionskulturer, överför allt medium till en T25-kolv för att främja effektiv cellinteraktion och tillväxt. Följ fastställda subkulturprotokoll för fortsatt tillväxt och underhåll av cellinjen, vilket säkerställer tillförlitliga experimentella resultat.
Inkubationsatmosfär	37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.
Ytbeläggning av flaska	Ingen
Frysningsprocedur	Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
Leveransvillkor	Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
Förvaringsförhållanden	För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Sterilitet	Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik. För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Observera att denna cellinje inte är tillgänglig enligt Cytions standard MTA, eftersom den kräver ett tredjepartsavtal och/eller är föremål för förhandling med den ursprungliga licensgivaren.

HROG59 Celler

Allmän information

Egenskaper

Lagstadgade uppgifter

Biomolekylära data

Hantering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Avtal med tredje part