Accutase-lösning för cellavskiljning – 100 ml

Accutase cellavskiljningslösning med EDTA och fenolrött – 100 ml

Accutase är en färdig att använda, sterilt filtrerad cellavskiljningslösning som är utformad som ett skonsamt alternativ till trypsin/EDTA för att separera vidhäftande däggdjursceller från standardplastutrustning för vävnadsodling och ytor med vidhäftningsbeläggning. Den kombinerar proteolytisk och kollagenolytisk enzymaktivitet i en balanserad saltlösning för att ge effektiv men kontrollerad separering, vilket bevarar proteiner på cellytan och främjar hög livskraft efter passage samt snabb återvidhäftning.

Accutase-formuleringen är baserad på Dulbeccos fosfatbuffrade saltlösning (DPBS) med EDTA och fenolrött som visuell pH-indikator. Enzymerna är av icke-däggdjurs- och icke-bakteriellt ursprung, vilket gör Accutase särskilt väl lämpad för stamcellsforskning, vaccinarbetsflöden och alla tillämpningar där föroreningar av animaliskt eller mikrobiellt ursprung måste minimeras. Lösningen autoinhiberas vid 37 °C, så inget neutraliserande reagens eller serumhaltigt medium krävs efter avskiljningen – cellerna kan överföras direkt till färskt medium.

Viktiga egenskaper

• Användningsfärdig 1x sterilfiltrerad vätska – ingen utspädning eller rekonstituering krävs
• Kombinerad proteolytisk och kollagenolytisk enzymaktivitet för skonsam dissociation
• Varje batch standardiserad till en definierad dissociationsaktivitet för konsistens mellan olika partier
• Enzymer av icke-mammaliskt och icke-bakteriellt ursprung
• Autoinhiberas vid 37 °C – ingen neutraliserande lösning behövs
• Formulerad i Dulbeccos PBS med EDTA
• Fenolrött ingår som visuell pH-indikator
• pH 6,8–7,8

Typiska tillämpningar

Accutase dissocierar skonsamt en mängd olika vidhäftande och känsliga celltyper, inklusive humana embryonala stamceller (hESCs), humana inducerade pluripotenta stamceller (iPSCs), neurala stamceller, primära neuroner och rutinmässigt odlade vidhäftande cellinjer såsom HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 och A549. Typiska användningsområden inkluderar:

• Rutinmässig subkultur och passering av vidhäftande däggdjursceller
• Skonsam dissociation av enskilda celler från hESCs, iPSCs och andra känsliga cellinjer
• Provberedning för flödescytometri och FACS-analys
• Analys av cellytmarkörer där epitopintegriteten är viktig
• Analyser av cellmigrering, proliferation och apoptos
• Quiescensanalyser genom serumdeprivation och studier av onkogen-transfektion
• Migrationsanalyser av tumörceller och neurala krestceller
• Uppskalning av produktionen i bioreaktorarbetsflöden

För rutinarbete, applicera cirka 10 ml Accutase per 75 cm² odlingsyta och inkubera i 5–10 minuter vid rumstemperatur. Den optimala inkubationstiden bör bestämmas för varje cellinje och bör inte överstiga en timme. Innan tillsats, skölj cellskiktet med en Ca²⁺/Mg²⁺-^fri saltlösning, såsom DPBS utan kalcium och magnesium, för att avlägsna kvarvarande serum och tvåvärda katjoner.

Hantering och förvaring

Förvara den oöppnade flaskan fryst vid -15 °C eller lägre. Tina antingen vid rumstemperatur eller över natten vid +2 °C till +8 °C. Tina inte Accutase i ett 37 °C varmt vattenbad, eftersom förhöjda temperaturer minskar enzymaktiviteten. Efter upptining kan lösningen förvaras i upp till 2 månader vid +2 °C till +8 °C; förvara inte vid rumstemperatur. Förvärm inte reagenset till 37 °C före användning – tillsätt det direkt till tvättade celler vid rumstemperatur. För långvarig hållbarhet rekommenderas engångsaliquotering för att undvika upprepade upptiningscykler. Arbeta alltid under aseptiska förhållanden.

Kvalitet

Tillverkat enligt strikta kvalitetsstandarder. Varje batch av Accutase är sterilt filtrerad och testad med avseende på sterilitet, pH, utseende och dissociationsaktivitet för att säkerställa enhetlig, reproducerbar prestanda från batch till batch.

Produktspecifikationer

Formulering (sammansättning per liter)

Accutase är ett registrerat varumärke som tillhör Innovative Cell Technologies, Inc.