SVI-celler
800,00 €*
Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 6 celler for vedheftende linjer eller 5 × 106 celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).
Ikke lenger tilgjengelig
Generell informasjon
| Beskrivelse | SVI-cellelinjen er klonet fra utveksten av glomeruli som ble isolert fra H-2kb-tsA58-transgene mus. Musene bærer en temperaturfølsom variant av SV40 large T-antigenet under kontroll av den IFN-g-inducerbare H-2kb-promotoren. Cellene formerer seg ved 33 grader Celsius, og de differensierer ved 37 grader Celsius. Cellene har blitt dyrket i mer enn 40 passasjer uten at det har skjedd fenotypiske endringer. SVI er svært like E11 når det gjelder morfologi og uttrykk av flere markører. For eksempel uttrykkes podocin og WT1 i mindre grad sammenlignet med E11. Differensiering: Start differensieringsprosessen ved å plassere de ikke-flytende kolbene i en inkubator ved 38 grader Celsius / 5 % CO2 i minst 14 dager for å fullføre differensieringen. Tilsetning av interferon-gamma (INF-gamma) er ikke nødvendig. |
|---|---|
| Organisme | Mus |
| Vev | Nyre |
Kjennetegn
| Rase/underart | (CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58) Immort |
|---|---|
| Alder | Voksen |
| Kjønn | Uspesifisert |
| Celletype | Podocytt |
| Vekstegenskaper | Vedhengende |
Regulatoriske data
| Sitat | SVI (Cytion-katalognummer 400495) |
|---|---|
| Biosikkerhetsnivå | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_5943 |
| Innskyter | Dr. N. Endlich |
| GMO-status | GMO-S1: Denne podocyttcellelinjen fra mus (SVI) inneholder et betinget aktivt SV40 Large T-antigen-transgen som en del av ImmortoMouse-modellen, som støtter temperaturfølsom udødeliggjøring. Konstruktet er stabilt til stede i podocyttavledede celler. Denne klassifiseringen gjelder bare i Tyskland og kan variere andre steder. |
Biomolekylære data
| Proteinuttrykk | WT1, Lmx1b, nefrin, NEPHI, FAT, P-cadherin, CD2AP, ZO-I, podocalyxin, podoplanin, synpo, podocin, TRPC6 og GAPDH. |
|---|
Håndtering
| Kulturmedium | RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a) |
|---|---|
| Kosttilskudd | Suppler mediet med 10 % FBS |
| Dissosiasjonsreagens | Accutase |
| Subkulturer | Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium. |
| Delingsforhold | Et forhold på 1:3 til 1:5 anbefales Under differensieringsforhold, dvs. inkubering av ikke-konfluerende til konfluente kulturer ved 38 grader Celsius, opphører celleproliferasjonen i løpet av de første to ukene og stanser etter ca. fire uker |
| Såtetthet | Inokulere T75-cellekulturflasker med 1x 104 celler/cm2 (ca. 60 000 celler/ml, 12 ml medium i en T75) for proliferasjonsprosessen. Hold cellene ved 33 grader Celsius / 5 % CO2, til flasken er ca. 75 % konfluent. |
| Fornyelse av væske | 3 ganger per uke |
| Frys medium | Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress. |
| Opptining og dyrking av celler |
|
| Inkubasjonsatmosfære | 33 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære. |
| Flaskebelegg | Ingen |
| Fryseprosedyre | Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass. |
| Leveringsbetingelser | Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass. |
| Lagringsforhold | For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen. |
Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA
| Sterilitet | Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag. |
|---|---|
| STR-profil |
Amelogenin: x,x
|
Analysesertifikat (CoA)
| Partienummer | Sertifikattype | Dato | Katalognummer |
|---|---|---|---|
| 400495-1221 | Analysesertifikat | 23. May. 2025 | 400495 |