HepG2-celler

Cytions frysemedium CM-1 er et toppmoderne kryopreserveringsmedium som er utviklet for å sikre det høyeste nivået av cellelevedyktighet og funksjonalitet etter opptining. Dette allsidige mediet er egnet for et bredt spekter av celletyper, inkludert både humane og animalske celler, noe som gjør det til et viktig verktøy for ulike forskningsapplikasjoner. Freeze Medium CM-1 er formulert med en nøye balansert kombinasjon av kryobeskyttende midler og essensielle næringsstoffer, og minimerer dannelsen av iskrystaller og cellestress under fryseprosessen, slik at cellenes integritet bevares.
De viktigste egenskapene til Freeze Medium CM-1 inkluderer

Bred kompatibilitet: Effektivt for et bredt spekter av celletyper, inkludert primærceller, stamceller og etablerte cellelinjer.
Høy levedyktighet: Optimalisert for å maksimere cellegjenvinning og levedyktighet etter opptining, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Klar til bruk: Praktisk tilberedt og sterilisert for umiddelbar bruk, noe som reduserer forberedelsestiden og risikoen for kontaminering.
Forbedret stabilitet: Opprettholder konsistent ytelse under standard kryopreserveringsforhold, noe som sikrer reproduserbare resultater.
Lang holdbarhet: CM-1 er et serumholdig kryopreserveringsmedium som er klart til bruk, og som kan oppbevares i kjøleskapet i opptil ett år.


Bruk av CM-1 til nedfrysing av celler

Følg disse trinnene for å bruke CM-1 til nedfrysing av både adherente celler og suspensjonsceller

For adherente celler, vask og dissosier dem fra kultursubstratet. For suspensjonsceller går du direkte til neste trinn.
Tell cellene for å sikre at de har riktig konsentrasjon.
Sentrifuger cellene for å pelleter dem, og resuspender dem deretter i CM-1-frysemedium.
Overfør de resuspenderte cellene til kryovialer.
Bruk en langsom nedfrysingsmetode før du overfører cellene til langtidslagring





Metode
Beskrivelse
Trinn





❄️
Manuell frysing

En trinnvis metode som innebærer gradvis reduksjon av temperaturen for å sikre cellenes levedyktighet

1️⃣ Plasser celler i frysemedium i en fryser på 4 °C i 40 minutter.
2️⃣ Overfør til en fryser på -80 °C i 24 timer.
3️⃣ Oppbevar cellene i flytende nitrogen for langtidsoppbevaring



❄️
Bruk av Mr. Frosty

Et praktisk apparat som gjør det mulig å kontrollere frysehastigheten uten elektrisk strøm

1️⃣ Klargjør celler i kryovialer med frysemedium.
2️⃣ Plasser kryovialene i Mr. Frosty-beholderen.
3️⃣ Oppbevares ved -80 °C i 24 timer før de overføres til flytende nitrogen



❄️
Fryser med kontrollert hastighet

En høypresisjonsfryser fra Thermo Fisher eller andre produsenter som er utviklet for kontrollert temperaturreduksjon

1️⃣ Programmer enheten til å senke temperaturen gradvis.
2️⃣ Plasser de forberedte cellene i fryseren.
3️⃣ Etter frysesyklusen overføres cellene til flytende nitrogen









Oppbevar kryovialene ved temperaturer under -130 °C eller i flytende nitrogen for langtidsoppbevaring.


Ingredienser

Inneholder FBS, DMSO, glukose, salter
Bufferkapasitet: pH = 7,2 til 7,6


Cytions frysemedium CM-1 er en pålitelig løsning for kryopreservering som sikrer høy cellelevedyktighet og funksjonalitet etter opptining for et bredt spekter av forskningsapplikasjoner.

Ham's F-12 Medium, også kjent som Ham's F-12 Nutrient Mix, er et mye brukt basalmedium som er utviklet spesielt for cellekultur. Det har blitt mye brukt til serumfri, encellet plating av CHO-celler (Chinese Hamster Ovary), lungeceller og L-celler fra mus. I tillegg er Ham's F-12 det foretrukne mediet for klonal toksisitetsanalyse (CTA).
En av de viktigste fordelene er at mediet støtter cellevekst uten behov for serumtilskudd. Dette eliminerer potensiell interferens forårsaket av serumkomponenter, noe som sikrer konsistente og pålitelige forsøksresultater. Ved å tilby et serumfritt dyrkningsmiljø gir Ham's F-12 Medium forskere større kontroll over undersøkelsene sine.
En annen viktig egenskap ved Ham's F-12 Medium er at det egner seg for enkeltcelleplatering. Dette gjør det til et utmerket valg for en rekke cellelinjer, inkludert CHO-celler, lungeceller og L-celler fra mus. Mediets optimaliserte næringssammensetning legger til rette for effektiv feste og vekst av enkeltceller, noe som muliggjør etablering av homogene cellekulturer med bedre reproduserbarhet.
Ham's F-12 Medium har dessuten blitt anerkjent som det foretrukne mediet for klonal toksisitetsanalyse (CTA). Denne analysen spiller en avgjørende rolle når man skal vurdere de cytotoksiske effektene av stoffer på celler. Ved å bruke Ham's F-12 Medium i CTA kan forskere nøyaktig evaluere virkningen av ulike forbindelser eller behandlinger på individuelle celler, noe som gir verdifull innsikt i toksikologiske profiler.
Kvalitetskontroll

pH = 7,2 +/
- 0,02 ved 20-25 °C.
Hvert parti er testet for sterilitet og fravær av mykoplasma og bakterier.

Vedlikehold

Oppbevares i kjøleskap ved +2 °C til +8 °C i mørke. Frysing og oppvarming opp til +37 °C minimerer produktets kvalitet.
Ikke varm opp mediet til mer enn 37 °C eller bruk ukontrollerbare varmekilder (f.eks. mikrobølgeovner).
Hvis bare en del av mediet skal brukes, tar du denne mengden ut av flasken og varmer den opp i romtemperatur.
Holdbarheten for alle medier unntatt basismediet er 8 uker fra produksjonsdatoen.

Sammensetning




Komponenter
mg/L


Uorganiske salter
Kalsiumklorid x 2H2O
44,00



Kobber(II)sulfat x 5H2O
0,00



Jern(II)sulfat x 7H2O
0,83



Magnesiumklorid x 6H2O
122,00



Kaliumklorid
223,65



Natriumklorid
7599,00



di-Natriumhydrogenfosfatvannfritt
142,04



Sink sulfat x 7H2O
0,86


Andre komponenter
D(+)-Glukose vannfri
1801,60



Hypoksantin
4,08



Linolsyre
0,08



DL-α-liponsyre
0,21



Fenolrød
1,20



Putrescin x 2HCl
0,16



Natriumpyruvat
110,00



Tymidin
0,73



NaHCO3
1176,00


Aminosyrer
L-Alanin
8,91



L-arginin x HCl
210,70



L-asparagin x H2O
15,01



L-asparaginsyre
13,31



L-Cystein x HCl x H2O
35,12



L-Alanyl-L-glutamin
217,30



L-glutaminsyre
14,71



Glysin
7,51



L-Histidin x HCl x H2O
20,96



L-isoleucin
3,94



L-Leucin
13,12



L-Lysin x HCl
36,54



L-metionin
4,48



L-fenylalanin
4,96



L-prolin
34,53



L-Serin
10,51



L-Threonin
11,91



L-Tryptofan
2,04



L-Tyrosin
5,44



L-Valin
11,71


Vitaminer
D(+)-Biotin
0,01



D-kalsiumpantotenat
0,24



Kolinklorid
13,96



Folsyre
1,32



myo-Inositol
18,02



Nikotinamid
0,04



Pyridoksin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Tiamin x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

Accutase celleavløsningsløsning med EDTA og fenolrød – 100 ml

Accutase er en bruksklar, sterilt filtrert celleavløsningsløsning utviklet som et skånsomt alternativ til trypsin/EDTA for å løsne vedheftende pattedyrceller fra standard plastutstyr for vevskultur og overflater med vedheftbelegg. Den kombinerer proteolytisk og kollagenolytisk enzymaktivitet i en balansert saltløsning for å gi effektiv, men kontrollert løsning, samtidig som proteiner på celleoverflaten bevares og høy levedyktighet etter passering samt rask gjenfesting støttes.

Accutase-formuleringen er basert på Dulbeccos fosfatbufferte saltvann (DPBS) med EDTA og fenolrødt som en visuell pH-indikator. Enzymerne er av ikke-pattedyr
- og ikke-bakteriell opprinnelse, noe som gjør Accutase spesielt godt egnet til stamcelleforskning, vaksinearbeidsflyter og alle anvendelser der forurensninger av animalsk eller mikrobiell opprinnelse må minimeres. Løsningen hemmer seg selv ved 37 °C, så det kreves ikke noe nøytraliserende reagens eller serumholdig medium etter løsrivelse – cellene kan overføres direkte til ferskt medium.

Viktige egenskaper

Klar til bruk 1x sterilt filtrert væske – ingen fortynning eller rekonstituering nødvendig
Kombinert proteolytisk og kollagenolytisk enzymaktivitet for skånsom dissosiasjon
Hver batch er standardisert til en definert dissosiasjonsaktivitet for konsistens fra parti til parti
Enzymer av ikke-pattedyr
- og ikke-bakteriell opprinnelse
Selvhemmer ved 37 °C – ingen nøytraliserende løsning nødvendig
Formulert i Dulbeccos PBS med EDTA
Fenolrødt inkludert som visuell pH-indikator
pH 6,8–7,8


Typiske anvendelser
Accutase dissocierer skånsomt et bredt spekter av vedheftende og følsomme celletyper, inkludert humane embryonale stamceller (hESCs), humane induserte pluripotente stamceller (iPSCs), nevrale stamceller, primære nevroner og rutinemessig dyrkede vedheftende cellelinjer som HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 og A549. Typiske bruksområder inkluderer:

Rutinemessig subkultur og passering av vedheftende pattedyrceller
Skånsom enkeltcelle-dissociasjon av hESC, iPSC og andre følsomme linjer
Prøveforberedelse for strømningscytometri og FACS-analyse
Analyse av celleoverflatemarkører der epitopintegritet er viktig
Assayer for cellemigrasjon, proliferasjon og apoptose
Hvileassays ved serumdeprivasjon og onkogen-transfeksjonsstudier
Migrasjonstester av tumorceller og nevralkamceller
Oppskalering av produksjonen i bioreaktor-arbeidsflyter

For rutinearbeid, påfør ca. 10 ml Accutase per 75 cm2 kulturoverflate og inkuber i 5–10 minutter ved romtemperatur. Den optimale inkubasjonstiden bør bestemmes for hver cellelinje og bør ikke overstige en time. Før tilsetning, skyll cellelaget med en Ca2+/Mg2+-fri saltløsning, for eksempel DPBS uten kalsium og magnesium, for å fjerne rester av serum og toverdige kationer.

Håndtering og oppbevaring
Oppbevar den uåpnede flasken frosset ved -15 °C eller lavere. Tine enten ved romtemperatur eller over natten ved +2 °C til +8 °C. Ikke tine Accutase i et 37 °C vannbad, da høye temperaturer reduserer enzymaktiviteten. Etter tining kan løsningen oppbevares i opptil 2 måneder ved +2 °C til +8 °C; ikke oppbevar ved romtemperatur. Ikke forvarm reagensen til 37 °C før bruk – tilsett den direkte til vasket celler ved romtemperatur. For lang holdbarhet anbefales det å dele opp i engangsdoser for å unngå gjentatte tinesykluser. Arbeid alltid under aseptiske forhold.

Kvalitet
Produsert under strenge kvalitetsstandarder. Hver batch av Accutase er sterilt filtrert og testet for sterilitet, pH, utseende og dissosiasjonsaktivitet for å sikre konsistent, reproduserbar ytelse fra batch til batch.

Produktspesifikasjoner



Spesifikasjon
Detalj



ProdukttypeReagens for celleavløsning/dissosiasjon
FormatSterilfiltrert væske, klar til bruk
Volum100 ml
Arbeidskonsentrasjon1x (klar til bruk)
EnzymaktivitetKombinert proteolytisk og kollagenolytisk
Enzymets opprinnelseIkke-pattedyr og ikke-bakteriell
BuffersystemDulbeccos PBS med EDTA
pH-indikatorFenolrød
pH-område6,8 – 7,8
UtseendeKlar, lysrød til oransje løsning
Oppbevaringstemperatur-15 °C eller lavere
Stabilitet etter tiningOpptil 2 måneder ved +2 °C til +8 °C
Anbefalt bruksvolum~10 ml per 75 cm² kulturoverflate
Typisk inkubasjonstid5–10 minutter ved romtemperatur
FraktbetingelserFrosset på tørris
Tilsiktet brukKun til forskningsbruk og videre produksjon



Formulering (sammensetning per liter)



Komponent
Konsentrasjon (mg/L)




Uorganiske salter

Natriumklorid (NaCl)8000,00
Dinatriumhydrogenfosfat (Na2HPO4)1150,00
Kaliumklorid (KCl)200,00
Kaliumdihydrogenfosfat (KH2PO4)200,00

Andre komponenter

EDTA · 4Na (tetranatrium-EDTA)220,00
Fenolrød3,00
Proprietær enzymblanding (proteolytisk og kollagenolytisk aktivitet)1x



Accutase er et registrert varemerke tilhørende Innovative Cell Technologies, Inc.

Produktoversikt
Volum: 100 ml Oppbevaring: ≤-15 °C Sterilitet: Sterilfiltrert
Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) er et sterilt, bruksklart konsentrat som er utviklet for å redusere risikoen for mikrobiell kontaminering i cellekulturer og relaterte laboratorieapplikasjoner. Denne 100x-løsningen inneholder en veletablert kombinasjon av penicillin, streptomycin og amfotericin B, som gir bredspektret antimikrobiell aktivitet mot grampositive og gramnegative bakterier, gjærsopp og filamentøse sopper. Formuleringen er egnet for bruk i eukaryote cellekulturer, bakteriemedier og andre systemer som er følsomme for kontaminering, og støtter rene og konsekvente laboratorieoperasjoner.
Anvendelse og fordeler Denne løsningen er optimalisert for rutinemessige forskningsprotokoller og brukes i stor utstrekning for å opprettholde aseptiske forhold i arbeidsflyter for cellekulturer. Den gir pålitelig ytelse i kontamineringssensitive miljøer, og hjelper forskere med å redusere risikoen for mikrobiell overvekst uten at det går på bekostning av cellenes helse eller eksperimentell reproduserbarhet. Den sterilfiltrerte formuleringen eliminerer behovet for ytterligere solubiliseringstrinn, noe som bidrar til strømlinjeformet tilberedning av medier og reduserer variabiliteten i daglige laboratorieprosedyrer.
Bruk og kompatibilitet For å oppnå standard arbeidskonsentrasjoner fortynner du løsningen 1:100 i ditt komplette dyrkingsmedium. Produktet er kompatibelt med et bredt spekter av pattedyrcellelinjer og basalmedier. Med konsekvent lagertilgjengelighet kan forskere dra nytte av pålitelig forsyningskontinuitet og forenklet logistikkplanlegging. Løsningen skal oppbevares ved ≤ -15 °C og beskyttes mot gjentatte fryse-tine-sykluser for å opprettholde stabiliteten. Kun til forskningsbruk. Ikke til bruk i diagnostiske eller terapeutiske prosedyrer. Ikke til bruk på mennesker eller dyr.

Fosfatbufret saltvannsløsning (PBS)
Fosfatbufret saltvann (PBS) er en mye brukt bufferløsning i biologisk og kjemisk forskning. Den spiller en avgjørende rolle når det gjelder å opprettholde pH-balansen og osmolariteten under ulike eksperimentelle prosedyrer, inkludert vevsprosessering og cellekultur. Vår PBS-løsning er omhyggelig formulert med ingredienser av høy renhet for å sikre stabilitet og pålitelighet i hvert eneste eksperiment. Osmolariteten og ionekonsentrasjonene i PBS-løsningen vår etterligner i stor grad de som finnes i menneskekroppen, noe som gjør den isotonisk og ugiftig for de fleste celler.

Sammensetningen av vår PBS-løsning
Vår PBS-løsning er en pH-justert blanding av ultrarene fosfatbuffere og saltvannsløsninger. Ved en 1X arbeidskonsentrasjon inneholder den

8000 mg/L natriumklorid (NaCl)
200 mg/L kaliumklorid (KCl)
1150 mg/L vannfritt dibasisk natriumfosfat (Na2HPO4)
200 mg/L Vannfritt kaliumfosfat monobasisk (KH2PO4)

Denne sammensetningen sikrer en optimal pH
- og ionebalanse, og er egnet for et bredt spekter av biologiske anvendelser.

Bruksområder for vår PBS-løsning
Vår PBS-løsning er ideell for ulike bruksområder innen biologisk forskning. De isotone og giftfrie egenskapene gjør den egnet til fortynning av substanser og skylling av cellebeholdere. PBS-løsninger som inneholder EDTA, er effektive for å løsne celler som sitter fast og klumper seg sammen. PBS bør imidlertid ikke tilsettes toverdige metaller som sink, da dette kan føre til utfelling. I slike tilfeller anbefales Good's buffere. I tillegg er vår PBS-løsning et akseptabelt alternativ til viralt transportmedium for transport og lagring av RNA-virus, inkludert SARS-CoV-2.

Kvalitetskontroll

Sterilfiltrert


Oppbevaring og holdbarhet

Oppbevares ved +2 °C til +25 °C, beskyttet mot lys.
Etter åpning, oppbevares ved 2 °C til 25 °C og brukes innen 24 måneder.


Transportforhold

Omgivelsestemperatur


Vedlikehold

Oppbevares i kjøleskap ved +2 °C til +8 °C i mørke. Unngå frysing og hyppig oppvarming til +37 °C, da det reduserer produktkvaliteten.
Ikke varm opp mediet til mer enn 37 °C eller bruk ukontrollerte varmekilder som mikrobølgeovner.
Hvis bare en del av mediet skal brukes, ta ut den nødvendige mengden og varm den opp til romtemperatur før bruk.

Sammensetning



Kategori
Komponenter
Konsentrasjon (mg/L)


Salter
Kaliumklorid
200



Kaliumfosfat, vannfritt, monobasisk
200



Natriumklorid
8000



Natriumfosfat, vannfritt, dibasisk
1150

Organisme	Menneskelig
Vev	Lever
Sykdom	Hepatocellulært karsinom