HaCaT-celler
Viktige fakta om Hacat-celler
| Beskrivelse | HaCaT-celler er en sentral modell i dermatologisk forskning, og gir innsikt i de komplekse mekanismene bak hudens biologi og patologi. Den spontant udødeliggjorte HaCaT-cellelinjen er avledet fra voksne humane epidermisceller og har evnen til å spre seg og gjennomgå differensiering, på samme måte som basale keratinocytter in vivo. HaCaT-celler fungerer som en robust plattform for å undersøke den epidermale differensieringsprosessen og studere de epidermale differensieringsmarkørene som er avgjørende for å opprettholde hudens integritet. HaCaT-cellenes mottakelighet for apoptose og deres følsomhet for apoptoseinduserende midler er grundig studert, særlig i forbindelse med cytotoksiske midler som RIPL. Forskere vurderer disse midlenes cytotoksisitet og omfanget av cytotoksisiteten ved hjelp av HaCaT-celler, og benytter teknikker som fluorescensmikroskopi for å visualisere cellulære endringer. Forskere har brukt HaCaT-celler til å undersøke effekten av ulike stoffer, inkludert antimikrobielle substrater og deres påvirkning på cellenes levedyktighet. Disse cellene er et utmerket substrat for testing av antimikrobielle biomaterialer og antimikrobielle atelokollagensubstrater, som er avgjørende for hudreparasjon og medisinske anvendelser. HaCaT-epidermalinjen spiller også en viktig rolle i studier av cellulær senescens, cytokiner og genuttrykksprofiler knyttet til aldring og kroniske sykdommer. Transkripsjonsprofilene til HaCaT-celler, inkludert rollen til κB og mikroRNA, gir innsikt i reguleringsmekanismene på molekylært nivå. HaCaT-keratinocyttlinjen, med sine egenskaper som epidermale keratinocytter, er et godt egnet system for å dissekere det intrikate samspillet mellom epidermale celler og immunsystemet, og spesielt keratinocyttenes rolle i sykdomstilstander. De gjør det mulig å utforske epigenetiske modifikasjoner og deres innflytelse på differensieringen av keratinocytter, inkludert dannelsen av den kornede konvolutten, en nøkkelfunksjon i hudens barrierefunksjon. HaCaT-celler er en uunnværlig modell i dermatologisk forskning, og de bidrar til en dypere forståelse av hudens biologi og patologi gjennom sin likhet med basale keratinocytter og sin evne til å gjennomgå cellevekst og differensiering. De brukes til alt fra studier av epidermal differensiering og antimikrobielle effekter til utforskning av cellulære responser som apoptose, noe som gjør dem til en hjørnestein i cellebiologi og biomedisinsk forskning. |
|---|---|
| Organisme | Menneskelig |
| Vev | Hud |
Detaljer
| Alder | 62 år |
|---|---|
| Kjønn | Mann |
| Etnisitet | Kaukasisk |
| Celletype | Keratinocytter med en diameter på 20-25 mikrometer. |
| Vekstegenskaper | Vedhengende |
Dokumentasjon
| Sitat | HaCaT (Cytion katalognummer 300493) |
|---|---|
| Biosikkerhetsnivå | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0038 |
| Innskyter | DKFZ, Heidelberg |
Genetikken til HaCaT keratinocyttcellelinjen
| Tumorfremkallende | Nei |
|---|---|
| Karyotype | Aneuploid (hypotetraploid) |
Håndtering av Hacat-cellelinjen
| Kulturmedium | DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a) |
|---|---|
| Kosttilskudd | Suppler mediet med 10 % FBS |
| Dissosiasjonsreagens | Blandingen 1:1 av EDTA (lager: 0,05 %) og trypsin (lager: 0,1 %) må tilberedes hver gang før cellene løsnes ved hjelp av PBS uten Ca2+ og Mg2+ for å gi en fysiologisk osmolaritet. Bruksklare blandinger av trypsin/EDTA anbefales ikke, da dette kan føre til celleklumper. Som et alternativ kan TrypLE Express (Life Technologies) brukes i stedet for trypsin/EDTA. Produsentens protokoll skal følges. |
| Doblingstid | HaCaT-cellenes fordoblingstid er 28 timer. |
| Subkulturer |
|
| Delingsforhold | Et forhold på 1:5 til 1:10 anbefales |
| Såtetthet | 1 x 104 celler/cm2 |
| Fornyelse av væske | 2 ganger per uke |
| Frys medium | Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress. |
| Opptining og dyrking av celler |
|
| Inkubasjonsatmosfære | 37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære. |
| Flaskebelegg | For optimal feste og levedyktighet etter tining anbefaler vi å bruke kollagenbelagte kolber eller plater. |
| Fryseprosedyre | Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass. |
| Leveringsbetingelser | Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass. |
| Lagringsforhold | For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen. |
Kvalitetssikring
| Sterilitet | Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag. |
|---|---|
| STR-profil |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 9,11
D13S317: 10,12
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9,11
TH01: 9.3
TPOX: 11,12
vWA: 16,17
D3S1358: 16
D21S11: 28,30.2
D18S51: 12
Penta E: 7,12
Penta D: 11,13
D8S1179: 14
FGA: 24
D1S1656: 11,12
D2S1338: 17,25
D12S391: 18,23
D19S433: 13,14
|
| HLA-alleler |
A*: '31:01:02
B*: '40:01:02, '51:01:01
C*: '03:04:01, '15:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:01:01
E: '01:03:01, '01:03:02
|
Analysesertifikat (CoA)
| Partienummer | Sertifikattype | Dato | Katalognummer |
|---|---|---|---|
| 300493-250324 | Analysesertifikat | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190723 | Analysesertifikat | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190124 | Analysesertifikat | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225SF | Analysesertifikat | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225 | Analysesertifikat | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-040424 | Analysesertifikat | 23. May. 2025 | 300493 |