E11 Celler

800,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

Ikke lenger tilgjengelig

Produktnummer: 400494

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Analysesertifikat (CoA)

Tredjepartsavtale

Beskrivelse	E11-cellelinjen er en høyspesialisert murin cellelinje som er utviklet for avanserte studier av podocyttfunksjon og mekanismer ved nyresykdom. E11-cellene stammer fra glomeruli fra transgene mus som er konstruert for å uttrykke en temperatursensitiv variant av SV40 large T-antigenet, og de reguleres av den IFN-g-induserbare H-2kb-promotoren. Dette unike genetiske rammeverket legger til rette for betinget spredning av cellene, avhengig av omgivelsestemperaturen, noe som samsvarer med det kontrollerte uttrykket av T-antigenet. Et av de viktigste kjennetegnene ved E11-cellelinjen er dens fenotypiske stabilitet gjennom omfattende passering. E11-celler har opprettholdt et konsistent uttrykk og cellulære egenskaper gjennom mer enn 40 passeringer, noe som har vist seg å være uvurderlig for langtidsstudier uten det vanlige problemet med fenotypisk drift som man ser i mange dyrkede cellelinjer. Denne stabiliteten gjør at de kan brukes i gjentatte og langvarige biologiske eksperimenter som krever konsistent celleatferd. Når det gjelder proteinuttrykk, har E11-cellelinjen en robust profil som er helt avgjørende for podocyttspesifikke studier. Cellene uttrykker konsekvent nefrin, som er en viktig komponent i podocyttenes spaltestruktur, sammen med en rekke andre podocyttspesifikke proteiner som podocin, CD2AP og synaptopodin. Dette omfattende proteinuttrykket gjør det mulig å studere podocyttenes biologi i et kontrollert in vitro-miljø, som i stor grad etterligner in vivo-forhold. E11-cellenes evne til å danne omfattende celle-celle-kontakter understreker ytterligere deres egnethet for modellering av nyrenes filtreringsbarrierefunksjoner.
Organisme	Mus
Vev	Nyre

Rase/underart	(CBA/Ca x C57BL/10)Tg(H2KbtsA58)
Alder	Voksen
Kjønn	Uspesifisert
Celletype	Podocytt
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	E11 (Cytion-katalognummer 400494)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_5737
GMO-status	GMO-S1: Denne Immorto-podocyttlinjen fra mus inneholder en temperaturfølsom SV40 T-antigenkonstruksjon som muliggjør betinget udødeliggjøring. Denne klassifiseringen gjelder bare i Tyskland og kan variere andre steder.

Proteinuttrykk	WT1, Lmx1b, nefrin, NEPHI, FAT, P-cadherin, CD2AP, ZO-I, podocalyxin, podoplanin, synpo, podocin, TRPC6 og GAPDH.

Kulturmedium	RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Kosttilskudd	Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Delingsforhold	Et forhold på 1:3 eller 1:5 (ved 33 grader Celsius) anbefales Under differensieringsforhold, dvs. inkubering av ikke-konfluerende til konfluente kulturer ved 38 grader Celsius, opphører celleproliferasjonen i løpet av de første to ukene og stanser etter ca. fire uker
Såtetthet	Inokulere T75-cellekulturflasker med 1x 10⁴ celler/cm² for proliferasjonsprosessen. Hold cellene ved 33 grader Celsius / 5 % CO₂, til flasken er omtrent 75 % konfluent.
Fornyelse av væske	2 til 3 ganger per uke
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	33 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Flaskebelegg	Ingen
Fryseprosedyre	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Sterilitet	Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Partienummer	Sertifikattype	Dato	Katalognummer
400494-1014SF	Analysesertifikat	23. May. 2025	400494

Vær oppmerksom på at denne cellelinjen ikke er tilgjengelig under en standard Cytion MTA, da den krever en tredjepartsavtale og/eller er gjenstand for forhandlinger med den opprinnelige lisensgiveren.

Drevet av Bioz Se mer informasjon om Bioz

E11 Celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Analysesertifikat (CoA)

Tredjepartsavtale