RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3
RPMI 1640 Medium, ook bekend als RPMI medium, is een zeer veelzijdig celkweekmedium dat veel wordt gebruikt in biologisch onderzoek om verschillende zoogdiercellen te kweken. Dit medium werd in 1966 ontwikkeld door George E. Moore, Robert E. Gerner en H. Addison Franklin in het gerenommeerde Roswell Park Comprehensive Cancer Center en ontleent zijn naam aan zijn oorsprong in het Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
In eerste instantie ontworpen om de groei van menselijke leukemische cellen in zowel suspensie- als monolaagculturen te ondersteunen, is RPMI 1640 Medium door aanpassingen door onderzoekers en commerciële leveranciers geëvolueerd tot een medium dat geschikt is voor een breed scala aan zoogdiercellen. Het is uitzonderlijk compatibel met cellijnen zoals HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocyten en carcinomen.
RPMI 1640 Medium onderscheidt zich van andere celkweekmedia door zijn unieke samenstelling. Het bevat een aanzienlijke hoeveelheid fosfaat, aminozuren en vitaminen. Het bevat met name biotine, vitamine B12 en PABA, die afwezig zijn in Eagle's Minimal Essential Medium of Dulbecco's Modified Eagle Medium. Bovendien vertoont RPMI 1640 Medium significant verhoogde concentraties vitamine inositol en choline. Het bevat echter geen eiwitten, lipiden of groeifactoren. Daarom is aanvulling met 10% foetaal runderserum (FBS) vaak nodig om optimale omstandigheden voor celgroei te creëren.
Het buffersysteem van RPMI 1640 Medium is gebaseerd op natriumbicarbonaat (2,0 g/L) en vereist een omgeving met 5-10% CO2 om een fysiologisch geschikte pH te handhaven. De toevoeging van het reductiemiddel glutathion onderscheidt dit medium verder van andere.
De unieke samenstelling van deze RPMI formulering bevat 2,1 mM stabiele glutamine, 2,0 gram per liter NaHCO3 en fenolrood.
Kwaliteitscontrole
- pH = 7,2 +/- 0,02 bij 20-25°C.
- Elke partij is getest op steriliteit en afwezigheid van mycoplasma en bacteriën.
Onderhoud
- Gekoeld bewaren bij +2°C tot +8°C in het donker. Invriezen en opwarmen tot +37°C minimaliseren de kwaliteit van het product.
- Verwarm het medium niet tot meer dan 37° C en gebruik geen oncontroleerbare warmtebronnen (bijv. magnetronapparatuur).
- Als slechts een deel van het medium wordt gebruikt, haal dan deze hoeveelheid uit de fles en warm het op bij kamertemperatuur.
- Houdbaarheid voor elk medium, behalve het basismedium, is 8 weken vanaf de productiedatum.
Samenstelling
Bestanddelen | mg/L | |
Anorganische zouten | Calciumnitraat x 4H2O | 100,00 |
Watervrij magnesiumsulfaat | 48,83 | |
Kaliumchloride | 400,00 | |
Natriumchloride | 5,950.00 | |
dinatriumwaterstoffosfaat | 800,49 | |
Andere componenten | D(+)-Glucose watervrij | 2,000.00 |
Glutathion (rood.) | 1,00 | |
Fenol rood | 5,00 | |
NaHCO3 | 2,000.00 | |
Aminozuren | L-Arginine x HCl | 241,86 |
L-Asparagine x H2O | 56,82 | |
L-Asparaginezuur | 20,00 | |
L-Cystine x 2HCl | 65,19 | |
L-Alanyl-L-Glutamine | 447,00 | |
L-Glutaminezuur | 20,00 | |
Glycine | 10,00 | |
L-Histidine x HCl x H2O | 20,27 | |
L-Hydroxyproline | 20,00 | |
L-Isoleucine | 50,00 | |
L-Leucine | 50,00 | |
L-Lysine x HCl | 40,00 | |
L-Methionine | 15,00 | |
L-Fenylalanine | 15,00 | |
L-Proline | 20,00 | |
L-Serine | 30,00 | |
L-Threonine | 20,00 | |
L-Tryptofaan | 5,00 | |
L-Tyrosine x 2Na | 28,83 | |
L-Valine | 20,00 | |
Vitaminen | p-Aminobenzoëzuur | 1,00 |
D-(+)-Biotine | 0,20 | |
D-Calcium pantothenaat | 0,25 | |
Choline chloride | 3,00 | |
Foliumzuur | 1,00 | |
myo-Inositol | 35,00 | |
Nicotinamide | 1,00 | |
Pyridoxine x HCl | 1,00 | |
Riboflavine | 0,20 | |
Thiamine x HCl | 1,00 | |
Vitamine B12 | 0.005 |