DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) is een zeer veelzijdig en veelgebruikt basismedium dat is ontworpen om de groei van een breed scala aan zoogdiercellen in biologisch onderzoek te ondersteunen. Het dient als een ideaal medium voor het kweken van primaire fibroblasten, neuronen, gliacellen, HUVECs, gladde spiercellen en populaire cellijnen zoals HeLa, 293, Cos-7 en PC-12.
Wat DMEM onderscheidt van andere media is de unieke samenstelling. Het bevat een indrukwekkende verviervoudiging van de aminozuur- en vitamineconcentratie in vergelijking met het originele Eagle's Minimal Essential Medium. DMEM werd oorspronkelijk ontwikkeld met lage glucose (1 g/L) en natriumpyruvaat, maar wordt vaak gebruikt met hogere glucosewaarden, al dan niet met natriumpyruvaat. DMEM bevat met name geen eiwitten, lipiden of groeifactoren, waardoor aanvulling noodzakelijk is. Voor optimale groei wordt DMEM vaak aangevuld met 10% foetaal runderserum (FBS). Daarnaast maakt DMEM gebruik van een natriumbicarbonaat buffersysteem (3,7 g/L), waarbij een omgeving van 5-10% CO2 nodig is om een fysiologische pH te handhaven.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) staat hoog aangeschreven onder de gedefinieerde media voor cel- en weefselkweek en voorziet in de groeibehoeften van verschillende aanhangende celfenotypen. Het overtreft het originele Eagle's Medium, ontwikkeld in de jaren 1950 voor het kweken van kippeneieren, door de verbeterde aanvullende formulering die bekend staat als Dulbecco's modificatie. Deze modificatie verhoogt het gehalte aan geselecteerde aminozuren en vitaminen aanzienlijk, tot wel vier keer in vergelijking met het oorspronkelijke medium.
Op het gebied van celkweek speelt DMEM een essentiële rol als groeimedium voor verschillende celtypen, waaronder primaire cellen, stamcellen en getransformeerde cellen. Onderzoekers gebruiken de aangepaste versie van DMEM ook voor een breed scala aan onderzoekstoepassingen, zoals het ontdekken van medicijnen, weefselmanipulatie en het bestuderen van celsignaalroutes.
Kwaliteitscontrole
- pH = 7,2 +/- 0,02 bij 20-25°C.
- Elk lot is getest op steriliteit en afwezigheid van mycoplasma en bacteriën.
Onderhoud
- Koel bewaren bij +2°C tot +8°C in het donker. Invriezen en opwarmen tot +37°C minimaliseren de kwaliteit van het product.
- Verwarm het medium niet tot meer dan 37° C en gebruik geen oncontroleerbare warmtebronnen (bijv. magnetronapparatuur).
- Als slechts een deel van het medium wordt gebruikt, haal dan deze hoeveelheid uit de fles en warm het op bij kamertemperatuur.
- Houdbaarheid voor elk medium behalve het basismedium is 8 weken vanaf de productiedatum.
Samenstelling
Bestanddelen | mg/L | |
Anorganische zouten | Watervrij calciumchloride | 200,00 |
IJzer(III)nitraat x 9H2O | 0,10 | |
Watervrij magnesiumsulfaat | 97,66 | |
Kaliumchloride | 400,00 | |
Natriumchloride | 6.400,00 | |
Natriumdiwaterstoffosfaat watervrij |
108,69 | |
Andere componenten | D(+)-Glucose watervrij | 4.500,00 |
Natriumpyruvaat | 110,00 | |
Fenol rood | 15,00 | |
NaHCO3 | 1.500,00 | |
Aminozuren | L-Arginine x HCl | 84,00 |
L-Cystine x 2HCl | 62,58 | |
L-Glutamine | 584,00 | |
Glycine | 30,00 | |
L-Histidine x HCl xH2O | 42,00 | |
L-Isoleucine | 104,80 | |
L-Leucine | 104,80 | |
L-Lysine x HCl | 146,20 | |
L-Methionine | 30,00 | |
L-Fenylalanine | 66,00 | |
L-Serine | 42,00 | |
L-Threonine | 95,20 | |
L-Tryptofaan | 16,00 | |
L-Tyrosine x Na | 103,79 | |
L-Valine | 93,60 | |
Vitaminen | D-Calcium pantothenaat | 4,00 |
Choline chloride | 4,00 | |
Foliumzuur | 4,00 | |
myo-Inositol | 7,00 | |
Nicotinamide | 4,00 | |
Pyridoxine x HCl | 4,00 | |
Riboflavine | 0,40 | |
Thiamine x HCl | 4,00 |