MC3T3-E1 šūnas — zelta standarts osteoblastu priekšteču modelis kaulu bioloģijas pētījumiem

Ievads

MC3T3-E1 šūnas, kas pazīstamas arī ar sinonīmiem Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1 un MC 3T3-E1 (Cellosaurus reģistrācijas numurs CVCL_0409), ir viena no visplašāk izmantotajām preosteoblastu šūnu līnijām mūsdienu kaulu bioloģijā. Šīs spontāni imortalizētās šūnas, kuras 1981. gadā no jaundzimušu pelēku galvaskausa izveidoja Kodama un kolēģi un kuras 1983. gadā sīkāk raksturoja Sudo un kolēģi, tika atlasītas to augstās sārmainās fosfatāzes (ALP) aktivitātes dēļ konfluentā stāvoklī. [1] To spēja attīstīties, izietot skaidri definētus proliferācijas un diferenciācijas posmus — galu galā in vitro veidojot mineralizētu kaulu matricu — ir padarījusi šīs šūnas par neaizstājamu līdzekli osteogēnēzes, kaulu pārveidošanās, kā arī farmakoloģisko vielu, biomateriālu un ģenētisko traucējumu ietekmes uz osteoblastu funkciju izpētē. Mūsdienās MC3T3-E1 šūnas ieņem nozīmīgu vietu pētījumos, kas aptver osteoporozi, implantu zinātni, audu inženieriju un kosmosa bioloģiju.

Galvenie secinājumi

• MC3T3-E1 ir spontāni imortalizēta peles preosteoblastu šūnu līnija, kas iegūta no jaundzimušas peles galvaskausa.
• Šūnas attīstās, izietot atšķirīgus proliferācijas un diferenciācijas posmus, kuru kulminācijā in vitro veidojas mineralizēta matrice.
• Augsta ALP aktivitāte un osteoblastu marķieru (RUNX2, OCN, OPN, Col1A1) ekspresija padara tos par uzticamu osteogēnēzes modeli.
• No vecāku līnijas ir izveidoti vairāki atvasinātie subkloni ar atšķirīgu diferenciācijas un mineralizācijas potenciālu.
• MC3T3-E1 šūnas plaši izmanto biomateriālu testēšanā, zāļu izstrādē, osteoporozes pētījumos un kaulu audu inženierijā.
• Šūnu līnijas identitāte ir regulāri jāpārbauda, izmantojot STR vai SNP profilēšanu, lai novērstu nepareizu identifikāciju un savstarpēju piesārņojumu. [2]

Kas ir MC3T3-E1?

MC3T3-E1 ir klonāla, spontāni imortalizēta preosteoblastu šūnu līnija, kas iegūta no pelēm un kurai piešķirts Cellosaurus reģistrācijas numurs CVCL_0409. Tā tika iegūta no jaundzimušas peles (vecāka par vienu dienu) galvaskausa kaula audiem, kuras dzimums nav norādīts. Donora dzīvniekam netika konstatētas nekādas slimības. Šūnu līnija tika atlasīta, pamatojoties uz augsto ALP aktivitāti konfluentā stāvoklī — īpašību, kas liecināja par tās spēcīgo in vitro osteogēnēzes spēju. Augšanas fāzē MC3T3-E1 šūnas izrāda fibroblastisku morfoloģiju un veido daudzslāņu kultūras. Pēc indukcijas tās diferenciējas par osteoblastiem, ražo kolagēna ekstracelulāro matricu un galu galā veido mineralizētus mezglus, kuros ir osteocītu līdzīgas šūnas, iegultas kaulu matricā. [1] Standarta kultivēšanas apstākļos dubultošanās laiks ir no 24 līdz 48 stundām.

SNP mikromatricas analīze apstiprināja MC3T3-E1 šūnu izcelsmi no C57BL/6 celma un tika izmantota, lai identificētu kariotipiskās izmaiņas, kas saistītas ar ilgstošu pasāžēšanu. [3] Šī šūnu līnija ekspresē galvenos osteoblastu marķierus, tostarp RUNX2, kaulu sialoproteīnu, osteokalcīnu un osteopontīnu, jo īpaši mineralizējošajos subklonos. [4] Vairāki atvasināti subkloni — tostarp MC3T3-E1 apakšklons 14 šūnas un subklons Nr. 4 — tika izdalītas no vecāku līnijas un in vitro un in vivo parāda dažādas diferenciācijas un mineralizācijas potenciāla pakāpes.

Informācija par šūnu kultūrām

MC3T3-E1 – augsta konfluence

MC3T3-E1 šūnu priekšrocības

MC3T3-E1 šūnas piedāvā skaidri definētu, reproducējamu modeli, kas atspoguļo visu osteoblastu attīstības gaitu. Atšķirībā no primārajiem galvaskausa osteoblastiem, kuri ir heterogēni un kurus ir grūti uzturēt, MC3T3-E1 šūnas ir iegūtas klonāli un tās var konsekventi pavairot dažādās laboratorijās. To spēja attīstīties no proliferējošiem preosteoblastiem līdz matriksu noguldošiem osteoblastiem un beidzot līdz osteocītiem iegultiem mineralizētiem mezgliem padara tās īpaši piemērotas osteogēnēzes laika gaitas pētījumiem. Yohay un kolēģu nozīmīgajā darbā tika definēti atšķirīgie MC3T3-E1 šūnu proliferācijas un diferenciācijas posmi kultūrā, tādējādi nosakot tās kā kvantitatīvu osteoblastu attīstības in vitro modeli. [5] Šis pētījums parādīja, ka MC3T3-E1 šūnas iziet paredzamu secību, kas sastāv no augšanas apturēšanas, matricas nobriešanas un mineralizācijas — posmiem, kas cieši atspoguļo osteoblastu ontogēnēzi in vivo.

Vēl viena priekšrocība ir labi raksturotu subklonu pieejamība, kas nodrošina eksperimentālo elastīgumu. Wang un kolēģi izdalīja virkni subklonu no vecāku MC3T3-E1 līnijas, pierādot, ka mineralizējošie subkloni selektīvi ekspresē kaulu sialoproteīnu, osteokalcīnu, un PTH/PTHrP receptora mRNS, savukārt sārmainās fosfatāzes ekspresija tika novērota gan mineralizējošajos, gan nemineralizējošajos subklonos. [4] Šis resurss ļauj pētniekiem izvēlēties subklonus ar noteiktiem fenotipiem, kas atbilst viņu eksperimentālajām vajadzībām. Turklāt šīs šūnas spēcīgi reaģē uz plašu osteogēno stimulu klāstu — tostarp askorbīnskābi, beta-glicerofosfātu, BMP-2, deksametazonu un daudzas mazmolekulāras vielas —, tādējādi padarot tās ideāli piemērotas farmakoloģiskajiem un mehānistiskajiem pētījumiem.

MC3T3-E1 šūnas ir arī ļoti piemērotas molekulārajai manipulācijai. Tās labi panes transfekciju, vīrusu transdukciju un CRISPR balstītu gēnu rediģēšanu, kā arī ekspresē endogēnus signālceļus (Wnt/β-katenīns, BMP/SMAD, PI3K/AKT), kas ir tieši saistīti ar kaulu patofizioloģiju. To peles izcelsme atvieglo integrāciju ar in vivo peles osteoporozes un lūzumu sadzīšanas modeļiem, tādējādi stiprinot in vitro iegūto atklājumu translacionālo vērtību.

MC3T3-E1 šūnu ierobežojumi

Neskatoties uz to plašo izmantošanu, MC3T3-E1 šūnām piemīt būtiski ierobežojumi. Tā kā šī ir spontāni imortalizēta šūnu līnija, ilgstošas pasāžēšanas laikā tajās var uzkrāties kariotipiskas anomālijas. SNP masīva profilēšana atklāja plaši izplatītu aneuploidiju MC3T3-E1 kultūrās, un izmaiņas visā genomā var ietekmēt diferenciācijas testu reproducējamību pie liela pasāžu skaita. [3] Arī sākotnējai vecāku līnijai var notikt spontāna mineralizācijas spējas zudums, kā to pierādīja Baba, kurš no vecāku MC3T3-E1 populācijas izdalīja nemineralizējošu subklonu (MC3T3-NM4) — šis atklājums uzsver nepieciešamību rūpīgi uzraudzīt diferenciācijas spēju visos pasāžos. [6]

Tirdzniecībā pieejamo MC3T3-E1 subklonu mainīgā osteogēnā aktivitāte ir papildu eksperimentālās variabilitātes avots. Pētījumi liecina, ka dažādiem subkloniem (piemēram, subklons 4 salīdzinājumā ar subklonu 14) ir ievērojami atšķirīga mineralizācijas kinētika un marķiergēnu ekspresijas profili, tāpēc, veicot tiešu rezultātu salīdzinājumu starp laboratorijām, kas izmanto dažādus subklonus, jāievēro piesardzība. Kultūras barotnes sastāvs arī ievērojami ietekmē osteogēnos rezultātus: pētījumos, kuros tika novērtētas MC3T3-E1 šūnas dažādās kultūras barotnēs, tika ziņots par būtiskām atšķirībām ALP aktivitātē, kolagēna nogulsnēšanā un kalcifikācijā — tas uzsver barotnes standartizācijas nozīmi eksperimenta plānošanā.

Visbeidzot, MC3T3-E1 šūnas ir peles izcelsmes, kas ierobežo to tiešo translacionālo nozīmi cilvēka osteoblastu reakciju prognozēšanā. Sugu specifiskās atšķirības receptoru farmakoloģijā, citokīnu signālizācijā un gēnu regulācijā nozīmē, ka pirms klīniskās ekstrapolācijas iegūtie rezultāti ir jāvalidē cilvēka osteoblastu sistēmās. Lai izslēgtu savstarpēju kontamināciju pirms eksperimentu uzsākšanas, tiek stingri ieteikta regulāra šūnu līniju autentifikācija, izmantojot STR profilēšanu vai uz nākamās paaudzes sekvencēšanu balstītas metodes. [2]

Pielietojumi

Osteoblastu diferenciācija un osteogēnēzes modelēšana

MC3T3-E1 šūnu visbūtiskākā pielietojuma joma ir kā osteoblastu diferenciācijas kvantitatīvais modelis. Yohay un kolēģu nozīmīgajā pētījumā tika raksturoti atšķirīgie peles MC3T3-E1 šūnu proliferācijas un diferenciācijas posmi kultūrā, nodrošinot laika rāmi, lai izprastu, kā šie preosteoblasti pāriet cauri augšanas, matricas nobriešanas un mineralizācijas fāzēm. [5] Šis darbs definēja šo šūnu līniju kā piemērotu osteogēnēzes in vitro modeli un noteica eksperimentālos rādītājus — piemēram, ALP aktivitāti, kolagēna matricas nogulsnēšanos un mezglu mineralizāciju —, kas joprojām tiek plaši izmantoti. Šo attīstības posmu skaidrība ir padarījusi MC3T3-E1 par atsauces standartu, ar kuru tiek salīdzināti jauni osteogēnās attīstības protokoli un diferenciācijas barotnes.

Signālceļu pētījumos ir izmantotas MC3T3-E1 šūnas, lai izpētītu osteogēnēzes molekulāro mehānismu. Wang un kolēģi pierādīja, ka apelin-13 caur savu receptoru APJ aktivizē BMP4/SMAD1/5/8 ceļu, paaugstinot osteogēno marķieru ALP, osteokalcīna, osteopontīna un Col1A1 ekspresiju, kā arī palielinot RUNX2 ekspresiju gan mRNA, gan proteīna līmenī MC3T3-E1 šūnās. [7] Ir pētīta arī diferenciācijas regulācija ar mikroRNA: Zhai un kolēģi parādīja, ka miR-211-5p/FOXO3 ass veicina MC3T3-E1 šūnu un BMSC osteogēno diferenciāciju, aktivizējot Wnt/β-katenīna signālceļu, kas ietekmē osteoporotisko lūzumu sadzīšanu. [8] Pētījumi par šķidruma šķērsspiedienu, izmantojot MC3T3-E1 šūnas, turklāt atklāja, ka AnnexinA6-mediētā autofāgija regulē mehāniski inducētu osteogēno diferenciāciju — šis atklājums ir nozīmīgs, lai izprastu slodzi nesošo kaulu fizioloģiju. [9]

MC3T3-E1 šūnas ir izmantotas, lai veidotu trīsdimensiju sfēroidus, kas labāk atspoguļo osteoblastu mikroapstākļus in vivo. Wen un kolēģi izveidoja spontānus MC3T3-E1 sfēroidus, izmantojot kultivēšanas sistēmu ar zemu adheziju, un pierādīja ievērojami paaugstinātu ALP aktivitāti un osteogēno gēnu ekspresiju salīdzinājumā ar monoslāņa kultūrām. [10] Šie sfēroīdi veicināja alveolārā kaula reģenerāciju un nomāca iekaisumu peles zobu autotransplantācijas modelī, uzsverot trīsdimensiju MC3T3-E1 kultivēšanas sistēmu nozīmi audu inženierijas pielietojumos.

Osteoporozes pētījumi un zāļu izstrāde

MC3T3-E1 šūnas kalpo kā primārā in vitro platforma, lai novērtētu potenciālos osteoporozes ārstēšanas līdzekļus. Tika pierādīts, ka kvercetīns, dabīgi sastopams flavonoīds, mīkstina osteoblastu disfunkciju osteoporozes skartiem žurkām, regulējot ferroptozi caur Nrf2/SLC7A11/GPX4 signālceļu; in vitro validācija, izmantojot MC3T3-E1 šūnas, apstiprināja šī signālceļa lomu osteoblastu izdzīvošanā un funkcijā. [11] Līdzīgi arī pilose antler proteīna ekstrakts (PAE) veicināja MC3T3-E1 šūnu dzīvotspēju, proliferāciju un osteogēno diferenciāciju, vienlaikus aktivizējot Wnt/β-katenīna signālceļu, atspoguļojot tā labvēlīgo ietekmi uz trabekulāro mikroarhitektūru olnīcu izgrieztām žurkām. [12]

Tradicionālo ārstniecības augu polisaharīdus ir novērtējuši arī, izmantojot MC3T3-E1 šūnas kā in vitro komponenti plašākā pētījumā par osteoporozes ārstēšanu. Yang un kolēģi raksturoja divus Psoralea corylifolia polisaharīdus un pierādīja to spēju stimulēt osteogēno aktivitāti MC3T3-E1 šūnās, papildinot in vivo iegūtos rezultātus par uzlabotu kaulu minerālo blīvumu glikokortikoīdu izraisītas osteoporozes skartajām pelēm. [13] Tika pierādīts, ka kurkumīna nanodaļiņas kombinācijā ar narlumosbartu sinerģiski veicina osteoblastu diferenciāciju MC3T3-E1 šūnās, izmantojot Wnt/β-katenīna signālceļu, piedāvājot kombinētu nanodaļiņu stratēģiju kaulu traumu atjaunošanai. [14]

Osteomielīts, smaga kaulu infekcija, ir pētīts, izmantojot MC3T3-E1 šūnas, kas apstrādātas ar stafilokoku proteīnu A (SPA), kā in vitro infekcijas modeli. Chen un kolēģi izmantoja Mendelisko randomizāciju kopā ar šiem in vitro eksperimentiem, lai pierādītu, ka cirkulējošais metabolīts p-krezola sulfāts traucē MC3T3-E1 šūnu proliferāciju un osteogēno diferenciāciju, sniedzot jaunas mehānistiskas atziņas par osteomielīta patogēnēzes metaboliskajiem faktoriem. [15] MC3T3-E1 šūnās tika pētīta arī ferroptozes inhibīcija, izmantojot ferrostatīnu-1, un rezultāti liecina, ka ferroptotiskās šūnu nāves nomākšana uzlabo osteoblastu dzīvotspēju un kaulu veidojošo aktivitāti.

Biomateriāli, implantu zinātne un kaulu audu inženierija

MC3T3-E1 šūnas ir etalons jaunu biomateriālu bioloģiskās saderības un osteoinduktīvā potenciāla novērtēšanai. Liu un kolēģi izstrādāja ar terbiju leģētu 3D drukātu karbonāta hidroksiapatīta (Tb-CHA) skeleta un, izmantojot MC3T3-E1 šūnas, pierādīja, ka šis materiāls in vitro ievērojami uzlaboja šūnu proliferāciju un diferenciāciju, turklāt turpmāka in vivo validācija žurku galvaskausa defekta modelī apstiprināja tā osteogēnās un angiogēnās spējas. [16] Spēja korelēt MC3T3-E1 šūnu in vitro reakcijas ar in vivo kaulu reģenerācijas rezultātiem padara šo šūnu līniju īpaši vērtīgu kaulu aizstājējmateriālu iteratīvā projektēšanā.

Titāna implantu virsmas inženierija ir lielā mērā balstījusies uz MC3T3-E1 šūnām, lai kvantitatīvi novērtētu osseointegrācijas potenciālu. Liao un Li izgatavoja kompozītmateriāla pārklājumu no epigallokatehīna-3-galāta (EGCG), hidroksiapatīta (HAP) un sudraba nanodaļiņu (AgNPs) uz titāna virsmām un parādīja, ka šis EGCG/HAP/AgNPs pārklājums vienlaikus uzlaboja antibakteriālo aktivitāti un veicināja MC3T3-E1 šūnu adheziju, proliferāciju un osteogēno diferenciāciju. [17] Šie rezultāti ilustrē, kā MC3T3-E1 šūnas palīdz optimizēt implantu pārklājumus, kuriem jānodrošina līdzsvars starp antimikrobiālo iedarbību un saderību ar saimniekšūnām.

Cinka oksīda nanodaļiņas (ZnO-NPs) ir vēl viena biomedicīnisko materiālu klase, kas novērtēta MC3T3-E1 šūnās. Ryu un kolēģi sistemātiski novērtēja ZnO-NP ekstraktu koncentrācijai atkarīgo ietekmi uz citokompatibilitāti un osteogēno aktivitāti, konstatējot, ka zemās koncentrācijas veicināja osteoblastu reakcijas, savukārt augstākās koncentrācijas bija citotoksiskas. [18] Šī devas atkarīgā raksturojuma rezultāti uzsver, cik svarīgi ir izmantot standartizētus MC3T3-E1 testus, nosakot nanomateriālu balstītu kaulu reģenerācijas stratēģiju drošības un efektivitātes diapazonus. Līdzīgi ir novērtēta aukstās atmosfēras plazmas (CAP) tehnoloģija attiecībā uz tās spēju stimulēt MC3T3-E1 osteogēno diferenciāciju atkarībā no laika, atverot potenciālus pielietojumus alveolārā kaula reģenerācijā. [19]

Mikrogravitācija un mehānobioloģija

MC3T3-E1 šūnas ir sniegušas fundamentālas atziņas par to, kā mehāniskā un gravitācijas atslodze ietekmē osteoblastu bioloģiju. Hughes-Fulford un Lewis nogādāja MC3T3-E1 osteoblastus kosmosā ar kosmoplānu misiju STS-56 un pierādīja, ka mikrogravitācijā aktivizētās šūnas, neraugoties uz normālu seruma stimulāciju, uzrādīja traucētu augšanu, kā arī izmainītu citoskeleta organizāciju un samazinātu prostaglandīnu sintēzi salīdzinājumā ar kontroles grupu uz Zemes. [20] Šie atklājumi sniedza šūnu mehānisko pamatojumu labi dokumentētajai kaulu minerālās blīvuma zudumam, ko astronauti piedzīvo ilgstošu kosmosa lidojumu laikā.

Hughes-Fulford turpmākie pētījumi paplašināja šos novērojumus, iekļaujot gēnu ekspresiju un signālu pārraidi, pierādot, ka mikrogravitācija maina MC3T3-E1 osteoblastu transkripcijas programmu tādā veidā, kas palīdz izskaidrot samazinātu kaulu veidošanos gravitācijas slodzes trūkuma apstākļos. [21] Kopumā šie kosmosa bioloģijas pētījumi noteica MC3T3-E1 šūnas kā galveno in vitro modeli, lai izpētītu mikrogravitācijas ietekmi uz skeletu šūnu līmenī, kas ir tieši saistīts ar pretpasākumu izstrādi kaulu zuduma novēršanai kosmosa medicīnā.

Uz Zemes mehānobioloģijas pētījumos ir izmantota MC3T3-E1 sistēma, lai izprastu, kā šķidruma šķērsspiediens — starpšūnu plūsmas rādītājs kaulu lakunokanalikulārajos tīklos — regulē osteoblastu diferenciāciju. Pētījumi parādīja, ka AnnexinA6 mediētā autofāgija saista mehānisko stimulāciju ar osteogēno gēnu ekspresiju MC3T3-E1 šūnās, sniedzot molekulāru informāciju par to, kā kaulu šūnas uztver fizisko slodzi un reaģē uz to. [9] Šie mehānobioloģijas pielietojumi nostāda MC3T3-E1 šūnas biofizikas un reģeneratīvās medicīnas saskares punktā.

Periodontālā un alveolārā kaula reģenerācija

Ar periodontītu saistītais kaulu zudums ir nozīmīgs klīnisks izaicinājums, un MC3T3-E1 šūnas ir kļuvušas par galveno in vitro rīku periodontālās reģenerācijas stratēģiju pārbaudīšanai. Kong un kolēģi izstrādāja daudzfunkcionālu oglekļa punktu nanomateriālu (ASA-ALN-CDs), kas iegūts no aspirīna un alendronāta nātrija, kurš parādīja spēcīgu antibiofilmas aktivitāti pret periodontālajiem patogēniem un veicināja MC3T3-E1 osteogēno diferenciāciju iekaisuma apstākļos. [22] Žurku periodontīta modelī šis materiāls samazināja alveolārā kaula zudumu un iekaisumu, inhibējot HIF-1α signālceļu, turklāt MC3T3-E1 in vitro dati sniedza tiešu mehānisko pamatojumu novērotajiem in vivo efektiem.

Aukstās atmosfēras plazmas pētījumos īpaša uzmanība tika pievērsta alveolārā kaula reģenerācijai, pakļaujot MC3T3-E1 šūnas īpaši izstrādātam hēlija CAP avotam. Negrescu et al. parādīja, ka CAP apstrāde modulēja šūnu izdzīvošanu un osteogēno diferenciāciju atkarībā no laika, ko novērtēja, izmantojot dzīvo/mirušo šūnu testus, CCK-8 dzīvotspējas testus, ALP aktivitātes mērījumus un morfoloģisko raksturojumu. [19] Šie rezultāti pozicionēja CAP kā potenciālu fizikālo papildterapiju alveolārā kaula defektu ārstēšanai, kur MC3T3-E1 šūnas nodrošina kvantitatīvos diferenciācijas rādītājus, kas nepieciešami ārstēšanas parametru optimizēšanai.

Ar MC3T3-E1 šūnām izstrādātā trīsdimensiju sfēroīdu kultivēšanas metode ir tieši saistīta ar zobu reģeneratīvo medicīnu. Sfēroīdu-kolagēna skeleta sistēma, ko Wen et al. novērtēja zobu autotransplantācijas modelī, nodrošināja labāku alveolārā kaula reģenerāciju un pretiekaisuma gēnu ekspresiju salīdzinājumā ar vienkārša slāņa šūnu kontroles grupām, liecinot, ka MC3T3-E1 sfēroīdu pastiprinātā parakrīnā aktivitāte var izpausties kā klīniski nozīmīgi ieguvumi zobu alveolas sadzīšanā. [10]

Secinājums

MC3T3-E1 šūnas joprojām ir neaizstājams un plaši validēts modelis kaulu bioloģijas pētījumiem. Sākot no to sākotnējās raksturošanas kā klonālas preosteoblastu līnijas, kas spēj veikt in vitro mineralizāciju, līdz to pašreizējai izmantošanai vadošajās jomās, tostarp 3D bioprintēšanā, uz nanodaļiņām balstītā zāļu piegādē, periodontālajā reģenerācijā un kosmosa medicīnā, šīs šūnas ir parādījušas ārkārtēju zinātnisko daudzpusību. To skaidri definētie diferenciācijas posmi, izteikta marķieru ekspresija un reaģētspēja uz plašu osteogēno stimulu spektru padara tās par etalona šūnu līniju jaunu biomateriālu novērtēšanai, terapeitisko mērķu identificēšanai osteoporozes un osteomielīta gadījumos, kā arī signālceļu izpētei, kas regulē kaulu veidošanos. Neatkarīgi no tā, vai pētāt ferroptozi, mehānobioloģiju vai nākamās paaudzes implantu pārklājumus, MC3T3-E1 šūnas nodrošina reproducējamu, bioloģiski atbilstošu platformu, kas nepieciešama jūsu pētījumiem. Iepazīstieties ar pilnīgajām specifikācijām vai pasūtiet MC3T3-E1 šūnas tieši vietnē cytion.com.

Galvenās publikācijas

1. Sudo H, Kodama HA, Amagai Y (1983) In vitro diferenciācija un kalcifikācija jaunā klonālajā osteogēnajā šūnu līnijā, kas iegūta no jaundzimušas peles galvaskausa. The Journal of Cell Biology. PMID: 6826647
2. Chen YH, Connelly JP, Florian C (2023) Šortu tandēma atkārtojumu profilēšana, izmantojot nākamās paaudzes sekvencēšanu, šūnu līniju autentifikācijai. Disease Models & Mechanisms. PMID: 37712227
3. Didion JP, Buus RJ, Naghashfar Z (2014) Peļu šūnu līniju SNP masīva profilēšana identificē to izcelsmes celmus un atklāj krustenisko kontamināciju un plaši izplatītu aneuploidiju. BMC Genomics. PMID: 25277546
4. Wang D, Christensen K, Chawla K (1999) MC3T3-E1 preosteoblastu subklonu izdalīšana un raksturošana ar atšķirīgu diferenciācijas/mineralizācijas potenciālu in vitro un in vivo. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 10352097
5. Quarles LD, Yohay DA, Lever LW (1992) Peļu MC3T3-E1 šūnu atšķirīgie proliferatīvie un diferenciācijas posmi kultūrā: osteoblastu attīstības in vitro modelis. Journal of Bone and Mineral Research. PMID: 1414487
6. Baba TT (2000) Minerālu nogulšņu atjaunošana ar deksametazona palīdzību no MC3T3-E1 šūnām subklonētu nemineralizējošo osteoblastisko šūnu matricā. Calcified Tissue International. PMID: 11136541
7. Wang C, Li Z, Yang H (2026) Apelīns-13 aktivizē BMP4/SMAD signālceļu ar APJ starpniecību, lai veicinātu osteoblastu diferenciāciju un mineralizāciju. Tissue & Cell. PMID: 42269418
8. Zhai H, Lin M, Lu C (2026) miR-211-5p/FOXO3 ass paātrina osteogēno diferenciāciju un lūzumu sadzīšanu, ietekmējot Wnt/β-katenīna signālceļu. Journal of Orthopaedic Surgery and Research. PMID: 42219493
9. Pei T, Su G, Yang J (2026) Labojums: Šķidruma šķērsspiediens regulē osteogēno diferenciāciju, izmantojot AnnexinA6 mediētu autofāgiju MC3T3-E1 šūnās. International Journal of Molecular Sciences. PMID: 42196630
10. Wen Z, Li X, Yue L (2026) Spontāni veidojušies mezenhīmālo cilmes šūnu sfēroīdi veicina alveolārā kaula reģenerāciju un nomāc iekaisumu pēc zoba autotransplantācijas. „Regenerative Therapy”. PMID: 42199333
11. Gong J, Ma Y, Huang J (2026) Pilose Antler proteīna ekstrakts mīkstina osteoporozi un ir saistīts ar Wnt/β-katenīna signālceļa aktivāciju. Pharmaceuticals (Bāzele, Šveice). PMID: 42198339
12. He L, Zheng Y, Zeng Z (2026) Kvercetīna ietekme uz osteoblastu disfunkciju osteoporozes skartiem žurkām, regulējot Nrf2/SLC7A11/GPX4 ceļa mediētu ferroptozi. Cytotechnology. PMID: 42238059
13. Yang J, Tang Z, Chen C (2026) Divu Psoralea corylifolia L. polisaharīdu strukturālā raksturošana un pretosteoporozes potenciāls in vivo un in vitro. Carbohydrate Polymers. PMID: 42173575
14. Zhang H, Zhao Y (2026) Kurkumīna nanodaļiņas kombinācijā ar narlumosbartu regulē wingless tipa MMTV integrācijas vietas (wnt)/β-katenīna signālceļu osteoblastveidīgās šūnās. Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences. PMID: 42170973
15. Chen X, Mo R, Yang S (2026) Iekaisuma citokīni un metabolisma ceļi osteomielītā: Mendeliskās randomizācijas secinājumi un eksperimentālā validācija. „Advances in Clinical and Experimental Medicine”. PMID: 42200571
16. Liu P, Shen J, Bian Y (2026) Ar terbiju leģēts, 3D drukāts karbonāta hidroksiapatīta skelets uzlabo kaulu reģenerāciju. Journal of Translational Medicine. PMID: 42260646
17. Liao J, Li Z (2026) EGCG/HAP/AgNPs kompozītpārklājuma antibakteriālā un osteogēnā iedarbība uz titāna virsmu. „Journal of Materials Science: Materials in Medicine”. PMID: 42216990
18. Ryu JH, Mangal U, Kim JH (2026) Cinka oksīda nanodaļiņu devas atkarīgā ietekme uz preosteoblastu šūnu reakciju. Scientific Reports. PMID: 42303653
19. Negrescu AM, Zampieri L, Martines E (2026) MC3T3-E1 preosteoblastu laika atkarīga modulācija ar hēlija aukstās plazmas palīdzību: iepriekšējs pētījums par tās potenciālo nozīmi alveolārā kaula reģenerācijā. „Biomedical Physics & Engineering Express”. PMID: 42208566
20. Kong J, Li H, Guo X (2026) ASA-ALN-CD terapētiskā efektivitāte periodontīta ārstēšanā: no antibiofilmas/pretiekaisuma iedarbības līdz alveolārā kaula reģenerācijai. ACS Biomaterials Science & Engineering. PMID: 42213513
21. Hughes-Fulford M, Lewis ML (1996) Mikrogravitācijas ietekme uz osteoblastu augšanas aktivizēšanu. Experimental Cell Research. PMID: 8612673
22. Hughes-Fulford M (2001) Izmaiņas gēnu ekspresijā un signālu pārvadē mikrogravitācijā. Journal of Gravitational Physiology. PMID: 12638602