Jurkat šūnas — zelta standarts T-šūnu modelī imunoloģijas un leikēmijas pētījumos

Ievads

Jurkata šūnas, kas pazīstama arī ar sinonīmiem JM, JM-Jurkat, Jurkat-FHCRC, FHCRC-11 un FCCH1024, ir viena no visplašāk izmantotajām cilvēka T-šūnu līnijām biomedicīniskajos pētījumos. Šī līnija tika izveidota 20. gadsimta 70. gadu vidū no bērna ar akūtu T-limfoblastisko leikēmiju (kas tiek klasificēta arī kā prekursoru T-šūnu akūta limfoblastiskā leikēmija) perifērās asinis, un to pirmo reizi aprakstīja Šneiders (Schneider), Švenks (Schwenk) un kolēģi nozīmīgās publikācijās 1975. un 1977. gadā. [1][2] Pēdējo piecu desmitgažu laikā Jurkat šūnas ir kļuvušas par neaizstājamu līdzekli T-šūnu receptoru (TCR) signālpārraides, apoptozes, citokīnu sintēzes un T-šūnu ļaundabīgo audzēju molekulārās bioloģijas pētīšanai. To spēcīgā augšana suspensijas kultūrā, labi raksturotais imūnfenotips un plašā omikas anotācija padara tās par pamata atsauces modeli imunoloģijā, onkoloģijā un zāļu izstrādē.

Galvenie secinājumi

• Jurkat šūnas (Cellosaurus paraugs CVCL_0065) ir no perifērās asins iegūta nemirstīga cilvēka T-šūnu leikēmijas šūnu līnija.
• Tās izpauž virsmas marķierus CD3, CD4 un CD45 un tās ir aprīkotas ar funkcionālu T-šūnu receptoru kompleksu.
• Šajā līnijā ir labi raksturotas mutācijas BAX, TP53, NOTCH1, PTEN/INPP5D, MSH2, un MSH6, tādējādi tam piemīt augsta mikrosatelītu nestabilitāte (MSI-high).
• Jurkat šūnas ieņem centrālo lomu TCR signālpārraides pētījumos un ir devušas pamatu lielai daļai pašreizējās izpratnes par T šūnu aktivācijas ceļiem.
• Tās kalpo par vēlamo modeli apoptozes pētījumiem, leikēmijas zāļu testēšanai un jaunās CAR-T šūnu tehnoloģijas attīstībai.
• Par šo līniju ir publiski pieejami plaši daudzomikas dati — tostarp proteomikas, fosfoproteomikas, DNS metilācijas un zāļu jutības profili.

Kas ir Jurkat šūnu līnija?

Jurkat tika iegūts no 14 gadus veca zēna perifērās asinis, kuram bija bērnu T-šūnu akūta limfoblastiska leikēmija (prekursoru T-šūnu akūta limfoblastiska leikēmija). Šo šūnu līniju izveidoja Schneider un Schwenk, kuri 1975. gadā to pirmo reizi aprakstīja kā „JM” šūnu līniju, pierādot, ka T-šūnu marķieri tiek ekspresēti visā šūnu cikla laikā. [1] Turpmākie raksturojumi apstiprināja tā EBV genoma negatīvo statusu un piederību T šūnu līnijai. [2][3] Kaplana un Petersona agrīnie pētījumi par antigēniem parādīja, ka šajā šūnu līnijā konstatētie ar T-šūnu limfomu saistītie antigēni bija sastopami arī nabassaites asins limfocītos, tādējādi saistot šo modeli ar fizioloģisko T-šūnu bioloģiju. [4]

Imunofenotipiski Jurkat šūnas ekspresē CD3, CD4 un CD45, tām ir pārkārtots T šūnu receptors, un tām nav c-kit ekspresijas, kas atbilst limfoīdajai ciltskoksnei. [5][6] TCR gēna pārkārtojumu profils ir skaidri definēts un tiek izmantots kā etalons klonalitātes diagnostikā. [7] Citogenētiski šī līnija ir hipotetraploīda ar raksturīgu deleciju 2. hromosomas īsajā plecā un tai piemīt augsts MSI statuss. [8] Galvenās somatiskās mutācijas ietver funkcijas zuduma mutācijas MSH2 (muļķības) un MSH6 (rāmja nobīde) un BAX, heterozigots NOTCH1 mutācija, heterozigota TP53 bezjēdzīga mutācija un biallēliska inaktivācija INPP5D (SHIP1), kas atspoguļo T šūnu ļaundabīgo audzēju sarežģīto genomisko ainavu.

Informācija par šūnu kultūrām

Jurkat šūnas – zema konfluence

Jurkat šūnas – augsta konfluence

Jurkat šūnu priekšrocības

Jurkat šūnas piedāvā unikāli stabilu platformu cilvēka T-šūnu bioloģijas pētīšanai. Tās strauji aug suspensijā, un to dubultošanās laiks ir 25–35 stundas, tādēļ tās ir īpaši piemērotas liela mēroga bioķīmiskajiem un funkcionālajiem pētījumiem. Šī līnija ekspresē pilnīgu, signālu pārraidošu TCR–CD3 kompleksu kopā ar CD4 korektoru, precīzi atspoguļojot palīg-T šūnu bioloģijas galvenos aspektus. To piemērotība ģenētiskai manipulācijai — ko apliecina milzīgais atvasināto knockout un reporteru līniju katalogs — ļauj pētniekiem precīzi analizēt atsevišķus signālu pārraides komponentus. Šī šūnu līnija ir pilnībā autentificēta, izmantojot STR profilēšanu, un tajā nav mikoplazmas un ārējas vīrusu piesārņojuma, kas nodrošina eksperimentu atkārtojamību. [9][10]

Jurkat šūnu publiski pieejamo daudzomikas datu apjoms ir nepārspējams starp T-šūnu līnijām. Šī līnija ir iekļauta Vēža šūnu līniju enciklopēdijā (CCLE), LL-100 asins vēža panelī, ENCODE projektā un Vēža atkarības kartē, nodrošinot pētniekiem ģenoma mēroga ģenētiskos, transkriptomiskos, proteomiskos un zāļu jutības anotācijas. [11][12][13] Šīs bagātīgās anotācijas ļauj veikt salīdzinošas un integrētas analīzes, kas ar primāriem T šūnu izolātiem nebūtu praktiski iespējamas. Turklāt labi raksturotais mutāciju fons — ieskaitot noteiktus PTEN/SHIP1 un DNS nesakritības reparācijas deficītus — padara Jurkat šūnas par piemērotu modeli, lai vienlaikus pētītu PI3K-Akt signālceļa regulācijas traucējumus un genomisko nestabilitāti. [14][15]

Zāļu atklāšanas pētījumos suspensijas audzēšanas metode vienkāršo savienojumu iedarbību un paraugu ņemšanu. Jurkat šūnas spēcīgi reaģē uz TCR stimulāciju, citokīnu iedarbību un proapoptotiskajiem stimuliem, nodrošinot reproducējamus un kvantificējamus rezultātus citokīnu analīzēs, plūsmas citometrijā un dzīvotspējas testos. To reaģētspēja gan uz klasiskajiem ķīmijterapijas līdzekļiem, gan jaunajiem mērķtiecīgajiem līdzekļiem ir padarījusi tās par pirmās līnijas skrīninga rīku leikēmijas zāļu izstrādē. To līdzdalība nozīmīgos farmakogenomikas pētījumos, piemēram, CCLE, ir vēl vairāk apstiprinājusi to prognostisko lietderību. [16][17]

Jurkat šūnu ierobežojumi

Neskatoties uz to plašo izmantošanu, Jurkat šūnās ir vairākas labi dokumentētas ģenētiskas novirzes, kas var apgrūtināt eksperimentālo rezultātu interpretāciju. Šai šūnu līnijai trūkst funkcionālas BAX proteīna ekspresijas biallelisko frameshift mutāciju dēļ, tādējādi padarot to būtiski rezistentu pret noteiktiem proapoptotiskajiem stimuliem, kas ir atkarīgi no šī efektora. [15] SHIP1 (INPP5D) biallēliskā inaktivācija un funkcionālā PTEN zudums izraisa PI3K-Akt signālceļa pastāvīgu aktivāciju, kas var izkropļot signālpārraides pētījumu rezultātus. [14][18] Tāpēc pētniekiem apoptozes un izdzīvošanas dati jāinterpretē, ņemot vērā šos konkrētos trūkumus, un galvenie rezultāti jāapstiprina primārajās T šūnās vai alternatīvos modeļos.

Šī līnija ir MSI-high tipa, ko izraisa homozigotiskas funkcijas zuduma mutācijas nesakritības reparācijas gēnos MSH2 un MSH6, kā rezultātā ilgstošas kultivēšanas laikā palielinās sekundāro mutāciju uzkrāšanās ātrums. [19][20] Šī genomiskā nestabilitāte nozīmē, ka dažādiem laboratorijas krājumiem var būt atšķirīgi mutāciju profili, kas uzsver regulāras šūnu līniju autentifikācijas nozīmi, izmantojot STR profilēšanu, kā arī nepieciešamību ievērot zemu pasāžu uzglabāšanas praksi. Hipotetraploīdais kariotips, ploīdijas heterogenitāte un raksturīgā 2p hromosomas delecija rada papildu sarežģījumus, interpretējot gēnu devas ietekmi. [8]

Kā transformēta vēža šūnu līnija Jurkat šūnas pilnībā neatspoguļo normālu primāro cilvēka T limfocītu bioloģiju. Jo īpaši šajā līnijā ir aktivējoši NOTCH1 mutācijas un heterozigotais TP53 bezjēdzīga mutācija, pazīmes, kas drīzāk saistītas ar ļaundabīgu transformāciju, nevis ar normālu T-šūnu fizioloģiju. [21][22] Tādēļ Jurkat šūnās iegūtie rezultāti — jo īpaši tie, kas saistīti ar citotoksisko efektoru funkciju, izsmelšanu vai diferenciāciju — ir jāapstiprina primārajās T šūnu sistēmās vai atbilstošos in vivo modeļos, pirms tiek izdarīti translacionāli secinājumi.

Jurkat šūnu pielietojums pētniecībā

T-šūnu receptoru signālu pārraide un imūnsistēmas aktivācija

Jurkat šūnas jau gandrīz piecus gadu desmitus ir kalpojušas par pamata modeli T šūnu receptoru signālu dekodēšanai. Abraham un Weiss (2004) nozīmīgajā pārskatā — visbiežāk citētajā rakstā, kas saistīts ar šo šūnu līniju — vispusīgi aprakstīts, kā pētījumi ar Jurkat šūnām izveidoja TCR signālu pārraides pamatprincipus. [23] Šis darbs parādīja, ka, izmantojot Jurkat šūnu līniju, eksperimentos tika atklāta Lck, ZAP-70 un LAT loma kā būtiskām proksimālajām kināzēm un adapteriem TCR saistīšanās lejpusējā posmā — šie atklājumi joprojām ir mūsdienu imunoloģijas pamats. Praktiski katrs nozīmīgākais posms TCR–NFAT/NF-κB/AP-1 signālu pārraides ceļā tika pirmo reizi raksturots vai apstiprināts šajā šūnu līnijā. [23]

Nesenajos pētījumos joprojām tiek izmantotas Jurkat šūnas, lai pētītu T šūnu aktivāciju. Pētījumos par sulforafāna imūnmodulējošajām īpašībām, izmantojot Jurkat šūnas, tika pierādīts, ka šis dabiskais izotiocianāts vājinā agrīnās T šūnu aktivācijas procesus, tostarp IL-2 ražošanu, CD25 indukciju un citokīnu sekrēciju pēc TCR stimulācijas. [24] Šie rezultāti nosaka mehānisko pamatu krustziežu dzimtas augu izcelsmes savienojumu pretiekaisuma iedarbībai. Līdzīgi, pētījumā par interleikīna-2 inducējamo T-šūnu kināzes (ITK) inhibitoriem, izmantojot Jurkat šūnas, tika apstiprināts, ka jaunie kovalentie pirazola atvasinājumi spēcīgi nomāc lejuplūkošo fosforilāciju un IL-2 sekrēciju pēc TCR stimulācijas, un tiem ir in vivo efektivitāte peles modelī. [25]

Jurkat šūnas ir izmantotas arī, lai pētītu, kā transkripcijas faktori modulē T šūnu identitāti patoloģiskos apstākļos. Pētījumā par TCF7 deficītu ar hronisku obstruktīvu plaušu slimību (HOPS) saistītā imūnsistēmas disregulācijā tika izmantotas TCF7 izslēgtas Jurkat šūnas kopā ar primārām pacienta T šūnām, lai apstiprinātu trīs gēnu slimības raksturīgo zīmējumu. TCF7 deficītu Jurkat šūnu ar ģenētisko glābšanu Western blotting analīze apstiprināja TCF7 lomu T šūnu limfoīdo gēnu programmu uzturēšanā. [26] Turklāt eksperimentos, kuros tika pētīta STUB1-mediētā Fli-1 transkripcijas faktora ubikvitinācija, kā in vitro platforma tika izmantotas Jurkat šūnas, lai raksturotu STUB1/Fli-1 signālu pārraides asi, kas ir saistīta ar CD4⁺ T šūnu aktivācija iekaisuma laikā. [27]

Apoptoze un šūnu nāves mehānismi

Jurkat šūnas jau ilgu laiku ir bijušas standarta modelis T šūnu apoptozes signālceļu izpētei, neraugoties uz to BAX deficītu. Pētījumos par mitohondriālās autofāgijas regulāciju, izmantojot CRISPR/Cas9 mediētu FADD izslēgšanu Jurkat šūnās, tika pierādīts, ka FADD regulē mitohondriju skaitu ar PGC1-α atkarīgu un ar autofāgiju saistītu mehānismu palīdzību. [28] Rapamicīna izraisītās autofāgijas un hloroquīna mediētās inhibīcijas eksperimenti, kurus novēroja, izmantojot LC3B Western blot un mtCO1/β-globīna qPCR, apstiprināja, ka FADD pilda regulējošu lomu mitofāgijā neatkarīgi no tā kanoniskās nāves receptora funkcijas.

Mehānistiski nozīmīgā pētījumā par ciklīnu atkarīgo kināžu (CDK) inhibitoriem, kurā līdzās citiem leikēmijas modeļiem tika izmantotas Jurkat šūnas, tika noskaidrots, ka CDK9 un CDK12/13 — bet ne šūnu ciklam nozīmīgās CDK — izraisa apoptozi, transkripcijas līmenī nomācot īslaicīgo anti-apoptozo proteīnu Mcl-1 un Bfl-1/A1 darbību. [29] Specifiskie inhibitori AZD4573, atuveciclib, SR4835 un THZ531 izraisīja spēcīgu apoptozes reakciju Jurkat šūnās, tādējādi nosakot to klīniskā potenciāla mehānisko pamatu. Šie rezultāti skaidro, kāpēc CDK inhibitori, kas vērsti pret RNS polimerāzes II elongāciju, ir citotoksiskāki nekā tie, kas vērsti pret šūnu cikla CDK.

MikroRNA regulācijas pētījumos, izmantojot Jurkat šūnas, tika izpētīts, kā LNA-anti-miR-92b un LNA-anti-miR-181b ietekmē BAX, BCL-2 un MCL-1 gēnu ekspresiju akūtas limfoblastiskas leikēmijas gadījumā. [30] Tika pierādīts, ka piperīns, kas ir dabīgs alkaloīds, paaugstina Jurkat šūnu jutību, mainot mikroRNS profilus un novirzot līdzsvaru par labu proapoptotiskajiem BCL-2 ģimenes locekļiem. Atsevišķi veiktajā pārskatā tika izcelti in vitro pierādījumi, ka dokozaheksaenoīnskābe (DHA) Jurkat šūnās izraisa devas un laika atkarīgu citotoksisku iedarbību, darbojoties caur proapoptotiskajiem signālceļiem, un ka, to kombinējot ar standarta ķīmijterapijas līdzekļiem, ko izmanto bērnu akūtajā limfoblastu leikēmijā (ALL), rodas sinerģiska iedarbība. [31] Vēsturiskā raksturojuma rezultāti apstiprināja, ka BAX proteīna trūkums Jurkat šūnās ir saistīts ar atsevišķu bāzu delēcijām kodējošajā mikrosatelītā, kam ir funkcionālas sekas attiecībā uz rezistenci pret apoptozi. [15]

Leikēmijas bioloģija un zāļu izstrāde

Kā bērnu T-akūtas limfoblastiskās leikēmijas (prekursoru T-šūnu ALL) modelis Jurkat šūnas ir bijušas neatņemama sastāvdaļa T-šūnu ļaundabīgo audzēju molekulārās ģenētikas raksturošanā. Pionieriskos pētījumos tika noskaidrots, ka vairāk nekā 50 % cilvēku T-ALL gadījumu ir saistīti ar NOTCH1 aktivējošām mutācijām — šis atklājums tika apstiprināts un paplašināts, izmantojot Jurkat šūnu līniju un citus T-ALL modeļus. [21] Veicot visaptverošas mutāciju analīzes, ir konstatētas bieži sastopamas izmaiņas p53, 16. lpp./15. lpp., PTEN, kā arī DNS nesakritību reparācijas gēnus dažādās T-ALL šūnu līnijās, tostarp Jurkat, tādējādi izveidojot detalizētu šīs slimības genomisko raksturojumu. [32][33][34][18]

Zāļu pārprofilēšanas stratēģijās Jurkat šūnas ir izmantotas kopā ar citiem leikēmijas modeļiem, lai novērtētu jaunus pretvēža līdzekļus. Nesenā pētījumā tika izvērtēts ķīmiski modificētu tetraciklīna analogu — tostarp COL-3, doksiciklīna un minociklīna — citotoksiskais potenciāls Jurkat, K562 un KG-1a šūnās. [35] COL-3 parādīja vislielāko iedarbīgumu un modulēja JAK2/STAT3 signālceļu un BCL-2 ģimenes proteīnus, apliecinot Jurkat šūnu lietderību zāļu darbības mehānisma profilēšanā. Jurkat šūnas tika izmantotas arī, lai novērtētu mērķtiecīgas zāļu piegādes sistēmas: ar anti-CD22-ScFv apklāta β-ciklodekstrīna metālu-organiskā karkasa nanoplatforma, kas piepildīta ar daunorubicīnu, tika novērtēta attiecībā uz selektivitāti CD22-pozitīvās un CD22-negatīvās (Jurkat) šūnās, apstiprinot mērķtiecīgās piegādes sistēmas specifiskumu. [36]

Liela mēroga farmakogenomikas iniciatīvās Jurkat šūnas ir iekļautas kā daļa no to references paneļiem. Vēža šūnu līniju enciklopēdija (CCLE) un ar to saistītie farmakogenomikas pārskata pētījumi ir izveidojuši Jurkat šūnu profilus attiecībā uz jutību pret zālēm, izvērtējot simtiem savienojumu, tādējādi saistot genomu īpatnības ar terapeitisko neaizsargātību. [11][16] Veicot bērnu akūtas limfoblastu leikēmijas (ALL) šūnu līniju, tostarp Jurkat, integrētas daudzomikas analīzes, tika identificētas no šūnu cilts atkarīgas korelācijas starp zāļu iedarbību un jauni potenciālie terapeitiskie līdzekļi, tādējādi radot pamatu precīzās medicīnas attīstībai bērnu leikēmijas ārstēšanā. [17] Autentiskuma pētījumi apstiprināja, ka šī līnija ilgtermiņa kultivēšanas laikā saglabā stabilas augšanas īpašības un ģenētiskos raksturlielumus. [37]

Proteomika, glikomika un daudzomiku pētījumi

Jurkat šūnas ir kļuvušas par etalonu liela mēroga proteomikas un pēctranslācijas modifikāciju (PTM) profilēšanai. Ievērojamā kvantitatīvā acetiloma pētījumā, kurā tika izmantota augstas izšķirtspējas masu spektrometrija — tostarp pētot Jurkat šūnas —, tika identificētas 3 600 lizīna acetilācijas vietas 1 750 proteīnos, atklājot, ka acetilācija galvenokārt skar lielus makromolekulārus kompleksus un kopīgi regulē galvenās šūnu funkcijas, tostarp hromatīna pārveidošanos un šūnu cikla norisi. [38] Tāpat arī, izmantojot UbiSite metodiku un Jurkat šūnas, tika identificētas vairāk nekā 63 000 unikālas ubikvitinācijas vietas 9 200 proteīnos, tostarp plaši izplatīta N-terminālā ubikvitinācija, tādējādi veicinot ubikvitīna bioloģijas nozares attīstību. [39]

Arī fosfoproteomikas pētījumos ir plaši izmantotas Jurkat šūnas. Paplašinātajā, uz vairāku proteāžu darbību balstītajā cilvēka fosfopeptīdu atlasā tika iekļauti Jurkat šūnu dati, lai izveidotu mazāk neobjektīvu atlantu, kurā iekļauti 37 771 unikāli fosfopeptīdi un 18 430 unikālas fosforilācijas vietas, tādējādi parādot triptīna ietekmi publiskajos repozitorijos un daudzenzīmu pieeju vērtību. [40] Salīdzinošās proteomikas analīzes, kas veiktas vienpadsmit izplatītām šūnu līnijām, tostarp Jurkat, atklāja, ka, neraugoties uz atšķirīgo šūnu izcelsmi, proteoma pārklājums joprojām ir pārsteidzoši vienots, turklāt galvenajām signālproteīnām raksturīgi šūnu tipam specifiski ekspresijas modeļi. [41] 949 vēža šūnu līniju vispārējā vēža proteomikas kartēšana vēl vairāk nostiprināja Jurkat līnijas pozīciju plašajā ar zāļu jutību un vēža uzņēmību saistīto proteīnu biomarķieru spektrā. [42]

Glikomikas pētījumos ir raksturoti Jurkat šūnu membrānu proteīnu N-glikānu profili, atklājot šūnu tipam raksturīgus modeļus sialskābes saistīšanā un glikoziltransferāzes ekspresijā, kas atšķir Jurkat šūnas no B-šūnu un mieloīdo šūnu līnijām. [43] Visaptverošā kvantitatīvā proteomikas pētījumā par proteīnu O-GlcNAcilēšanu Jurkat šūnas tika izmantotas kā viens no trim cilvēka šūnu modeļiem, lai parādītu O-GlcNAc modifikācijas šūnu tipam raksturīgās un kopīgās reakcijas N-glikozilācijas inhibīcijas apstākļos, identificējot vairāk nekā 1 000 O-GlcNAcilētu proteīnu. [44] Dinamiskā DNS metilācijas profilēšana 82 cilvēka šūnu līnijās, tostarp Jurkat, atklāja saikni starp metilācijas modeļiem, gēnu ekspresiju un vēzim raksturīgajām epigenētiskajām pazīmēm. [45]

CAR-T šūnu tehnoloģija un imūnterapija

Jurkat šūnas ieņem nozīmīgu lomu strauji attīstošajā CAR-T šūnu tehnoloģiju un sintētisko receptoru izstrādes jomā. Koncepcijas pierādījuma pētījumā tika izstrādāts marķējuma neprasošs ātrās optiskās attēlveidošanas (ROI) biosensors ar mašīnmācīšanās analīzi, kas ļauj tieši kvantificēt CAR-T šūnas no pilnas asins, izmantojot Jurkat šūnas, kas pievienotas asins paraugiem, lai pārbaudītu noteikšanas veiktspēju. [46] Šī pieeja ļāva apmierināt kritisko klīnisko vajadzību pēc CAR-T šūnu vairošanās uzraudzības reālajā laikā, izvairoties no tradicionālo laboratorijas metožu izmaksām un kavēšanās.

Saistībā ar nākamās paaudzes terapeitisko receptoru platformām Jurkat šūnas kalpoja kā galvenā in vitro validācijas sistēma, lai salīdzinātu Alcheimera slimībai pielāgotās sintētisko receptoru arhitektūras SNIPR, synNotch un TRUCK. [47] Visas trīs platformas tika ekspresētas Jurkat šūnās, izmantojot uz amiloīda-beta vērstu saistīšanās domēnu, un tika kvantificēta receptoru vadītā transgēna ekspresija, lai novērtētu to relatīvo efektivitāti. Jurkat šūnas tika izmantotas arī, lai novērtētu jaunu hipotermiskās konservācijas preparātu (SUL-138) klīniskās kvalitātes CAR-T šūnu produktiem, kur Jurkat šūnas kalpoja kā modelis T šūnu substrātam, lai novērtētu mitohondriju stabilitāti un šūnu dzīvotspēju aukstās uzglabāšanas un atkausēšanas laikā. [48]

Jurkat šūnas ir izmantotas arī kā mazu ekstracelulāro vezikulu (sEV) avots nanomedicīnas vajadzībām. No Jurkat šūnām ar izmēra izslēgšanas hromatogrāfiju izdalītās sEV tika piepildītas ar kurkumīnu, izmantojot ultraskaņas apstrādi, lai izveidotu mērķtiecīgu terapeitisko preparātu mutvārdu plakanšūnu karcinomas ārstēšanai. [49] In vitro un in vivo pētījumi parādīja, ka no Jurkat šūnām iegūtās sEV pastiprināja kurkumīna audzēju nomācošo iedarbību, tādējādi ilustrējot šīs šūnu līnijas daudzpusību kā bioloģiskā materiāla avota, kas pārsniedz tās klasisko izmantošanu kā signālu pārraides modeli. Bezšūnu normotermiskā liesas perfūzijas platforma turklāt apstiprināja steroīdu imūnsupresijas mehānismus, izmantojot izplūstošās T šūnas un salīdzinot tās ar Jurkat šūnu transkripcijas etaloniem. [50]

Secinājums

Jurkat šūnas (CVCL_0065) ir ieguvušas „zelta standarta” cilvēka T-šūnu modeļa statusu, pateicoties piecdesmit gadu garumā sniegtajam revolucionārajam ieguldījumam imunoloģijā, onkoloģijā un molekulārajā bioloģijā. Sākot no TCR signālu pārraides pamatparadigmas izskaidrošanas līdz pat vismodernāko CAR-T šūnu pētījumu veikšanai, šī no akūtas limfoblastiskās leikēmijas prekursoru T šūnām atvasinātā līnija joprojām ir pamats atklājumiem, kam ir fundamentāla un translacionāla nozīme. Tās labi raksturotais mutāciju profils, plašā daudzomikas anotācija un piemērotība ģenētiskajai inženierijai padara to par neaizstājamu rīku — ar nosacījumu, ka pētnieki ņem vērā tās specifiskos ģenētiskos ierobežojumus. Neatkarīgi no tā, vai jūsu pētījumi ir vērsti uz T šūnu aktivāciju, apoptozi, jutību pret leikēmijas zālēm vai nākamās paaudzes imūnterapiju, Jurkata šūnas nodrošina pārbaudītu un labi apstiprinātu pamatu. Iepazīstieties ar pilnīgajām specifikācijām, tostarp Jurkat E6.1 šūnas izveidot apakšklonu vai veikt pasūtījumu vietnē cytion.com.

Galvenās publikācijas

1. Schwenk HU, Schneider U (1975) T-šūnu marķiera atkarība no šūnu cikla limfoblastos. Blut. PMID: 1103999
2. Schneider U, Schwenk HU, Bornkamm G (1977) EBV genoma negatīvo „null” un „T” šūnu līniju raksturojums, kas iegūtas no bērniem ar akūtu limfoblastisko leikēmiju un leikēmiski transformētu ne-Hodžkina limfomu. International Journal of Cancer. PMID: 68013
3. Schneider U, Schwenk HU (1977) No bērniem ar akūtu limfoblastisko leikēmiju un ne-Hodžkina limfomu pēc leikēmiskās transformācijas izveidoto „T” un „ne-T” šūnu līniju raksturojums. Hematoloģija un asins pārliešana. PMID: 204546
4. Kaplan J, Peterson WD Jr (1976) Ar T-šūnu limfomu saistītu antigēnu noteikšana nabassaites asins limfocītos un fitohemaglutinīna stimulētos blastos. Cancer research. PMID: 1086134
5. Morita S, Tsuchiya S, Fujie H (1996) c-kit receptori cilvēka leikēmijas šūnu līnijās un bērnu leikēmijā: c-kit ekspresijas selektīva saglabāšanās megakarioblastu šūnu līnijās adaptācijas laikā in vitro kultūrā. Leukemia. PMID: 8558913
6. Burger R, Hansen-Hagge TE, Drexler HG (1999) T-akūtas limfoblastiskās leikēmijas (T-ALL) šūnu līniju heterogenitāte: priekšlikums klasifikācijai, pamatojoties uz imūnfenotipu un T-šūnu receptoru pētījumiem. Leukemia research. PMID: 9933131
7. Sandberg Y, Verhaaf B, van Gastel-Mol EJ (2007) Cilvēka T-šūnu līnijas ar precīzi definētām T-šūnu receptoru gēnu pārkārtojumiem kā kontroles paraugi BIOMED-2 daudzkanālu polimerāzes ķēdes reakcijas mēģenēm. Leukemia. PMID: 17170727
8. LaGree KA, Lee AT, Stetten G (1988) Cilvēka Jurkat (FHCRC-11) šūnu līnija ir heterogēna ploidijas un šūnu izmēra ziņā un izdala detergentā šķīstošu DNS. Eksperimentālā hematoloģija. PMID: 3165345
9. Raimondi V, Minuzzo S, Ciminale V (2017) HTLV-1 inficētu šūnu līniju STR profilēšana. „Methods in molecular biology“ (Clifton, N.J.). PMID: 28357668
10. Uphoff CC, Pommerenke C, Denkmann SA (2019) Cilvēka šūnu līniju skrīninga veikšana vīrusu infekciju noteikšanai, izmantojot RNS-Seq datu analīzi. PloS One. PMID: 30629668
11. Barretina J, Caponigro G, Stransky N (2012) Vēža šūnu līniju enciklopēdija ļauj veikt pretvēža zāļu jutības prognozējošu modelēšanu. Nature. PMID: 22460905
12. Quentmeier H, Pommerenke C, Dirks WG (2019) LL-100 panelis: 100 šūnu līnijas asins vēža pētījumiem. „Scientific Reports“. PMID: 31160637
13. Ghandi M, Huang FW, Jané-Valbuena J (2019) Vēža šūnu līniju enciklopēdijas raksturošana, izmantojot jaunākās paaudzes metodes. Nature. PMID: 31068700
14. Lo TC, Barnhill LM, Kim Y (2009) SHIP1 inaktivācija T-šūnu akūtajā limfoblastiskajā leikēmijā, ko izraisa mutācija un plaša alternatīvā splaisinga. Leukemia research. PMID: 19473701
15. Brimmell M, Mendiola R, Mangion J (1998) BAX gēna rāmja nobīdes mutācijas cilvēka hematopoētisko ļaundabīgo audzēju šūnu līnijās ir saistītas ar rezistenci pret apoptozi un mikrosatelītu nestabilitāti. Oncogene. PMID: 9583678
16. Iorio F, Knijnenburg TA, Vis DJ (2016) Vēža farmakogenomisko mijiedarbību kopaina. Cell. PMID: 27397505
17. Leo IR, Aswad L, Stahl M (2022) Bērnu akūtas limfoblastiskās leikēmijas šūnu līniju integrēta daudzomikas analīze un zāļu iedarbības profilēšana. Nature Communications. PMID: 35354797
18. Sakai A, Thieblemont C, Wellmann A (1998) PTEN gēna mutācijas limfoīdos audzējos. Blood. PMID: 9787181
19. Hosoya N., Hangaishi A., Ogawa S. (1998) hMSH6 gēna rāmja nobīdes mutācijas cilvēka leikēmijas šūnu līnijās. Japānas vēža pētījumu žurnāls: Gann. PMID: 9510473
20. Inoue K, Kohno T, Takakura S (2000) Bieži sastopama mikrosatelītu nestabilitāte un BAX mutācijas T šūnu akūtas limfoblastiskās leikēmijas šūnu līnijās. Leukemia research. PMID: 10739008
21. Weng AP, Ferrando AA, Lee W (2004) NOTCH1 aktivējošās mutācijas cilvēka T šūnu akūtajā limfoblastiskajā leikēmijā. Science (Ņujorka, Ņujorkas štats). PMID: 15472075
22. Cheng J, Haas M (1990) Bieži sastopamas mutācijas p53 audzēja supresora gēnā cilvēka leikēmijas T-šūnu līnijās. Molekulārā un šūnu bioloģija. PMID: 2144611
23. Abraham RT, Weiss A (2004) Jurkat T šūnas un T šūnu receptoru signālpārraides paradigmas attīstība. Nature Reviews: Immunology. PMID: 15057788
24. Fu Q, Gardner EM, Rockwell CE (2026) Augu izcelsmes savienojums sulforafāns vājinā citokīnu indukciju un citus agrīnos aktivācijas procesus Jurkat šūnās. Uztura bagātinātāju žurnāls. PMID: 42152521
25. Ruan Z, Pan Z (2026) Pirazola bāzes selektīvu kovalento ITK inhibitoru ar in vivo aktivitāti atklāšana. European Journal of Medicinal Chemistry. PMID: 42224937
26. Wang Z, Yang Y, Wang L (2026) Imūnsistēmas regulācijas traucējumu izpēte hroniskā obstruktīvā plaušu slimībā (HOPS): trīs gēnu marķiera identifikācija un TCF7 funkcionālā validācija cilvēka plaušu audos un T limfocītos. International journal of molecular sciences. PMID: 42196213
27. Li P, Liu L, Wu Y (2026) STUB1-mediētā ubikvitinācija regulē Fli-1 stabilitāti un CD4⁺ T šūnu aktivāciju iekaisuma laikā. Molecular Medicine (Kembridža, Masačūsetsa). PMID: 42192504
28. Lin CZ, Zhu ZX, Zhong Q (2026) [Mitohondriālās autofāgijas regulēšana ar FADD palīdzību Jurkat šūnās]. „Zhongguo shi yan xue ye xue za zhi“. PMID: 42227456
29. Krings KS, Hatzfeld J, Weller S (2026) RNS polimerāzes II aktivējošo CDK9 un CDK12/13 inhibīcija, bet ne šūnu ciklam nozīmīgo CDK inhibīcija, izraisa apoptozi, samazinot īslaicīgo Bcl-2 proteīnu Mcl1 un Bfl1/A1 ekspresiju. Cell death & disease. PMID: 42204137
30. Torkamani M, Forghanifard MM, Zarrinpour V (2025) LNA-anti-miR-92b, miR-181b, TNF-α un piperīna ietekmes izpēte uz gēnu ekspresiju un šūnu dzīvotspēju Jurkat šūnās: nozīme akūtas limfoblastiskas leikēmijas gadījumā. Medicīnas žurnāls „Galen“. PMID: 42038900
31. Bittencourt VB, Schveitzer MC, da Costa RF (2026) Omega-3 taukskābes bērnu akūtajā limfocītiskajā leikēmijā: pārskata pētījums. „Clinical Nutrition ESPEN“. PMID: 42107536
32. Kawamura M, Ohnishi H, Guo SX (1999) p53, p21, p16, p15 un RAS gēnu izmaiņas bērnu T-šūnu akūtajā limfoblastiskajā leikēmijā. Leikēmijas pētījumi. PMID: 10071127
33. Siebert R, Willers CP, Schramm A (1995) MTS1/p16 un MTS2/p15 gēnu homozigotā zudums limfomas un limfoblastiskās leikēmijas šūnu līnijās. British Journal of Haematology. PMID: 8547074
34. Borgonovo Brandter L., Heyman M., Rasool O. (1996) p16INK4/p15INK4B gēna inaktivācija ir bieži sastopams fenomens ļaundabīgās T-šūnu līnijās. European Journal of Haematology. PMID: 8641406
35. Hassan ZM, Mamand DR, El-Gawly HW (2026) JAK/STAT3 signālceļa un BCL-2 ģimenes proteīnu diferenciālā modulācija ar tetraciklīna analogiem leikēmijas modeļos. Pharmaceutics. PMID: 42076067
36. Khabiri A, Rastegari B, Rafiei Dehbidi G (2026) Mērķspecifiska daunorubicīna nanoplatforma, kas balstīta uz ar anti-CD22-ScFv dekorētiem β-ciklodekstrīna metālu-organiskajiem karkasiem. Terapeitiskā piegāde. PMID: 42183612
37. Beesley AH, Palmer ML, Ford J (2006) Autentiskums un zāļu rezistence akūtas limfoblastiskās leikēmijas šūnu līniju izlasē. British Journal of Cancer. PMID: 17117183
38. Choudhary C, Kumar C, Gnad F (2009) Lizīna acetilēšana iedarbojas uz proteīnu kompleksiem un kopīgi regulē galvenās šūnu funkcijas. Science (Ņujorka, Ņujorkas štats). PMID: 19608861
39. Akimov V, Barrio-Hernandez I, Hansen SVF (2018) „UbiSite“ metode lizīna un N-terminālo ubikvitinācijas vietu visaptverošai kartēšanai. „Nature Structural & Molecular Biology“. PMID: 29967540
40. Giansanti P, Aye TT, van den Toorn H (2015) Paplašināts cilvēka fosfopeptīdu atlants, kas balstīts uz vairāku proteāžu darbību. „Cell Reports“. PMID: 26074081
41. Geiger T, Wehner A, Schaab C (2012) Vienpadsmit izplatītu šūnu līniju salīdzinošā proteomikas analīze atklāj, ka lielākā daļa proteīnu tiek ekspresēti visur, taču to ekspresijas līmenis ir atšķirīgs. Molecular & cellular proteomics : MCP. PMID: 22278370
42. Gonçalves E, Poulos RC, Cai Z (2022) Vispārēja vēža proteomikas karte, kas aptver 949 cilvēka šūnu līnijas. Cancer Cell. PMID: 35839778
43. Reinke SO, Bayer M, Berger M (2012) Cilvēka hematopoētisko šūnu līniju šūnu membrānu proteīnu N-glikānu analīze atklāj atšķirības to struktūrā. Bioloģiskā ķīmija. PMID: 22944676
44. Fu L, Yin K, Xu X (2026) Proteīnu O-GlcNAcilācijas sistemātiska kvantificēšana atklāj kopīgas un šūnu tipam raksturīgas reakcijas uz N-glikozilācijas inhibīciju cilvēka šūnās. Analytical chemistry. PMID: 42153620
45. Varley KE, Gertz J, Bowling KM (2013) Dinamiskā DNS metilācija dažādās cilvēka šūnu līnijās un audos. „Genome Research“. PMID: 23325432
46. Yu N, Porter RM, Zhou X (2026) Mašīnmācīšanās atbalstīta ātra optiskā attēlveidošana CAR T-šūnu noteikšanai pilnās asinīs bez marķieru izmantošanas. Biosensors. PMID: 42187436
47. Siebrand CJ, Mayeri Z, Brown I (2026) Aβ mērķtiecīgo SNIPR, synNotch un TRUCK in vitro salīdzinājums šūnu balstītai zāļu piegādei Alcheimera slimības ārstēšanā. bioRxiv: bioloģijas priekšizdevumu serveris. PMID: 42146485
48. Öner A, Nooteboom N, Oosting L (2026) Jauns hipotermiskās konservācijas preparāts, kas satur SUL-138, ļauj ilgtermiņā hipotermiski uzglabāt klīniskās kvalitātes CAR-T šūnas. Pharmaceutics. PMID: 42076066
49. Ludwig N, Feldmann C, Spoerl S (2026) Kurkumīna piegāde ar ekstracelulāro vezikulu starpniecību kavē audzēja progresēšanu pelēm ar mutes dobuma plakanšūnu karcinomu. Cancers. PMID: 42192945
50. Callais NA, Welch S, Rainwater RR (2026) Bezšūnu normotermiskā liesas perfūzija noskaidro steroīdu imūnsupresijas transkripcijas un netranskripcijas mehānismus. bioRxiv: bioloģijas priekšizdevumu serveris. PMID: 42239436