PIEC šūnas

800,00 €*

Cenas bez nodokļiem un piegādes izmaksām

Produkta numurs: 305213

Drošības datu lapa

Produkta lapa

Analīzes sertifikāts (CoA)

Materiālu nodošanas līgums

Apraksts	PIEC (cūku iegurņa endotēlija šūnas) ir spontāni imortalizēta endotēlija šūnu līnija, kas iegūta no jaunas cūkas iegurņa artērijas endotēlija. Šūnu līnija, augot līdz konfluencei, uzrāda tipisku bruģakmens morfoloģiju un standarta kultivēšanas apstākļos veido adhezīvas monoslāņus. PIEC saglabā galvenās endotēlija īpašības, tostarp kontakta inhibīciju, endotēlija marķieru, piemēram, von Willebrand faktora (vWF), ekspresiju un spēju veidot kapilāru līdzīgas struktūras atbilstošos in vitro testos. Savas asinsvadu izcelsmes dēļ PIEC plaši izmanto kā modeli cūku endotēlija bioloģijas un saimnieka-patogēna mijiedarbības pētījumiem. Funkcionāli PIEC uzrāda pazīmes, kas atbilst makrovaskulārajām endotēlija šūnām, tostarp reaģētspēju uz iekaisuma stimuliem un spēju ekspresēt adhezijas molekulas, kas iesaistītas leikocītu rekrutēšanā. Tās ir plaši izmantotas viroloģijas pētījumos, jo īpaši cūku vīrusu, piemēram, klasiskā cūku mēra vīrusa (CSFV), Āfrikas cūku mēra vīrusa (ASFV) un cūku reproduktīvā un respiratorā sindroma vīrusa (PRRSV), pavairošanai un pētīšanai. To augstā uzņēmība pret noteiktām vīrusu infekcijām un stabilās augšanas īpašības padara tās par vērtīgu in vitro sistēmu vīrusu replikācijas pētījumiem, pretvīrusu skrīningam un vakcīnu pētījumiem. Papildus infekcijas slimību pētījumiem PIEC kalpo kā atbilstošs lielu dzīvnieku endotēlija modelis asinsvadu barjeras funkcijas, endotēlija aktivācijas, angiogēnēzes un iekaisuma signālu ceļu pētījumiem. Kā cūku izcelsmes endotēlija līnija PIEC nodrošina translatīvo nozīmi salīdzinošajos kardiovaskulārajos pētījumos un pirmsklīniskajos pētījumos, kuros parasti izmanto cūku modeļus.
Organisms	Cūka
Audu	Asinsvadu endotēlijs

Morfoloģija	Epitēlija
Augšanas īpašības	Adherent

Citāts	PIEC (Cytion kataloga numurs 305213)
Bioloģiskās drošības līmenis	1
NCBI_TaxID	9823
CellosaurusAccession	CVCL_C0W5

Kultūras barotne	RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Papildinājumi	Papildiniet barotni ar termiski inaktivētu 10% FBS
Disociācijas reaģents	Accutase
Subkultivēšana	Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība	no 1:2 līdz 1:4
Šķidruma atjaunošana	2 līdz 3 reizes nedēļā
Vidēja sasaldēšanas pakāpe	Kā kriokonservēšanas barotni izmantojiet pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu reģenerāciju un samazinātu krioinducēto stresu.
Šūnu atkausēšana un kultivēšana	Pārliecinieties, ka pēc piegādes flakons paliek dziļi sasaldēts, jo šūnas tiek sūtītas uz sausā ledus, lai pārvadāšanas laikā saglabātu optimālu temperatūru. Pēc saņemšanas vai nu nekavējoties uzglabāt kriovialu temperatūrā, kas zemāka par -150 °C, lai nodrošinātu šūnu integritātes saglabāšanu, vai arī turpināt 3. posmu, ja nepieciešama tūlītēja kultivēšana. Tūlītējas kultivēšanas gadījumā ātri atkausējiet flakonu, iegremdējot to 37°C ūdens vannā ar tīru ūdeni un antibakteriālu līdzekli, viegli maisot 40-60 sekundes, līdz paliek neliels ledus gabaliņš. Visas turpmākās darbības veiciet sterilos apstākļos plūsmas nosūcējā, pirms atvēršanas dezinficējot kriovialu ar 70% etanolu. Uzmanīgi atveriet dezinficēto flakonu un pārnesiet šūnu suspensiju 15 ml centrifūgas mēģenē, kurā ir 8 ml istabas temperatūras barotnes, uzmanīgi samaisot. Centrifugējiet maisījumu ar 300 x g 3 minūtes, lai atdalītu šūnas, un uzmanīgi izmetiet virskārtu, kas satur saldēšanas barotnes atlikumus. Viegli resuspendēt šūnu granulas 10 ml svaigas barotnes. Adhēzijas šūnu gadījumā suspensiju sadalīt divās T25 kolbās; suspensijas kultūrām visu barotni pārnest vienā T25 kolbā, lai veicinātu efektīvu šūnu mijiedarbību un augšanu. Ievērojiet noteiktos subkultūru protokolus, lai nodrošinātu nepārtrauktu šūnu līnijas augšanu un uzturēšanu, tādējādi nodrošinot uzticamus eksperimentu rezultātus.
Inkubācijas atmosfēra	37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.
Flakona pārklājums	Optimālai piestiprināšanai un dzīvotspējai pēc atkausēšanas ieteicams izmantot ar kolagēnu pārklātas kolbas vai plates.
Sasaldēšanas procedūra	Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
Nosūtīšanas nosacījumi	Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
Uzglabāšanas apstākļi	Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Sterilitāte	Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes. Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Partijas numurs	Sertifikāta veids	Datums	Kataloga numurs
305213-070524	Analīzes sertifikāts	23. May. 2025	305213

Ja plānojat izmantot Cytion šūnu līnijas tikai iekšējiem pētījumiem vienā pētniecības vietā, lūdzu, aizpildiet un parakstiet mūsu Materiālu nodošanas līgumu (MTA) un iesniedziet to kopā ar savu pasūtījumu.

Jebkādiem komerciāliem mērķiem, tostarp, bet ne tikai, maksas pakalpojumiem, kvalitātes kontroles testēšanai, produktu laišanai tirgū, diagnostikai vai regulatīviem pētījumiem, lūdzu, aizpildiet paredzētās izmantošanas veidlapu, lai mēs varētu sagatavot jūsu projektam piemērotu līgumu.

Lūdzu, ņemiet vērā: MTA attiecas tikai uz noteiktām šūnu līnijām. Ja šis paziņojums un MTA dokuments ir redzams produkta lapā, līgums ir piemērojams. Šūnu līnijām, uz kurām neattiecas MTA, atsauce uz līgumu netiks parādīta. MTA nav spēkā klientiem Amerikas kontinentā, Ķīnā vai Taivānā. Lūdzu, sazinieties ar mūsu ASV pārstāvniecību, lai saņemtu atbilstošo līgumu.

PIEC šūnas

Vispārīga informācija

Raksturojums

Normatīvie dati

Biomolekulārie dati

Darbs ar

Kvalitātes kontrole / Ģenētiskais profils / HLA

Analīzes sertifikāts (CoA)

Materiālu nodošanas līgums