MM.1S-Luc šūnas

Iepazīstinām ar Ham's F-12K (Kaighn's) barotni
- specializētu Ham's F-12 barotnes modifikāciju, kas izstrādāta, lai atbilstu unikālām bioloģisko pētījumu prasībām. Šī uzlabotā barotne piedāvā īpašas priekšrocības, uzlabojot primāro cilvēka hepatocītu, kā arī žurku un vistu aknu šūnu kultivēšanu, jo īpaši pazemināta seruma apstākļos.

Ham's F-12K (Kaighn's) barotne ir rūpīgi izstrādāta, lai optimizētu šūnu kultūras apstākļus. Tai ir bagātināts sastāvs, kas nodrošina paaugstinātu tādu būtisku sastāvdaļu kā aminoskābju un nātrija piruvāta, kā arī papildu elementu, tostarp putrescīna, timidīna, hipoksantīna un cinka, līmeni. Šie papildinājumi ļauj pētniekiem papildināt barotni ar minimālu seruma daudzumu vai noteiktiem komponentiem konkrētiem šūnu tipiem, tādējādi atvieglojot precīzus eksperimentālos apstākļus.

Hama F-12K (Kaigna) barotne nesatur olbaltumvielas vai augšanas faktorus. Tāpēc bieži vien ir nepieciešama papildināšana ar augšanas faktoriem un Fetal Bovine Serum (FBS), kas ļauj pētniekiem pielāgot barotni savu konkrēto šūnu līniju prasībām. Lai nodrošinātu optimālu veiktspēju, FBS koncentrācija ir rūpīgi jāoptimizē katrai šūnu līnijai, nodrošinot optimālu augšanu un funkcionalitāti.

Lai uzturētu fizioloģisko pH, Hama F-12K (Kaighn's) barotnē izmanto nātrija bikarbonāta buferisko sistēmu (2,5 g/l), tāpēc kultivēšanas laikā ir nepieciešama kontrolēta 5-10 % CO2 vide. Tas nodrošina, ka barotnes pH saglabājas ideālā diapazonā šūnu augšanai un dzīvotspējai
Kvalitātes kontrole

pH = 7,2 +/
- 0,02 20-25 °C temperatūrā.
Katra partija ir pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti un mikoplazmas un baktēriju neesamību.

Uzturēšana

Glabāt ledusskapī +2°C līdz +8°C temperatūrā tumsā. Sasaldēšana, kā arī sasilšana līdz +37°C samazina produkta kvalitāti.
Nesildiet barotni līdz temperatūrai, kas pārsniedz 37°C, un neizmantojiet nekontrolējamus siltuma avotus (piemēram, mikroviļņu krāsnis).
Ja jāizmanto tikai daļa barotnes, izņemiet šo daudzumu no pudeles un uzsildiet to istabas temperatūrā.
Jebkuras barotnes, izņemot pamata barotni, derīguma termiņš ir 8 nedēļas no izgatavošanas datuma.

Sastāvs




Sastāvdaļas
mg/l


Neorganiskie sāļi
Kalcija hlorīds x 2H2O
135,24



Vara(II) sulfāts x 5H2O
0,00



Dzelzs (II) sulfāts x 7H2O
0,83



Magnija hlorīds x 6H2O
105,72



Magnija sulfāts x 7H2O
394,49



Kālija hlorīds
283,29



Kālija dihidrogēnfosfāts
58,52



Nātrija hlorīds
7597,20



nātrija hidrogēnfosfātsbezūdens
115,02



Cinka sulfāts x 7H2O
0,14


Citi komponenti
D(+)-glikoze, bezūdens viela
1260,00



Hipoksantīns
4,08



DL-α-liposkābe
0,21



Fenola sarkanais
3,00



Putrescīns x 2HCl
0,32



Nātrija piruvāts
220,00



NaHCO3
2500,00



Timidīns
0,73


Aminoskābes
L-alanīns
17,82



L-arginīns x HCl
421,40



L-asparagīns x H2O
30,02



L-asparagīnskābe
26,62



L-cisteīns x HCl x H2O
70,24



L-glutamīns
292,20



L-glutamīnskābe
29,42



Glicīns
15,01



L-histidīns x HCl x H2O
41,92



L-izoleicīns
7,87



L-leicīns
26,24



L-lizīns x HCl
73,04



L-metionīns
8,95



L-fenilalanīns
9,91



L-Prolīns
69,06



L-serīns
21,02



L-treonīns
23,82



L-triptofāns
4,08



L-tirozīns
10,87



L-valīns
23,42


Vitamīni
D(+)-biotīns
0,07



D-kalcija pantotenāts
0,48



Holīna hlorīds
13,96



Folijskābe
1,32



mio-inositols
18,02



Nikotīnamīds
0,04



Piridoksīns x HCl
0,06



Riboflavīns
0,04



Tiamīns x HCl
0,34



B12 vitamīns
1,36

Accutase šūnu atdalīšanas šķīdums ar EDTA un fenolsarkano – 100 ml

Accutase ir gatavs lietošanai, sterili filtrēts šūnu atdalīšanas šķīdums, kas izstrādāts kā maiga alternatīva tripsīnam/EDTA, lai atdalītu piekļāvušās zīdītāju šūnas no standarta audu kultūras plastmasas traukiem un ar adhezīvu pārklātām virsmām. Tas apvieno proteolītisko un kolagenolītisko enzīmu aktivitāti sabalansētā sāls šķīdumā, lai nodrošinātu efektīvu, bet kontrolētu atdalīšanu, saglabājot šūnu virsmas proteīnus un veicinot augstu dzīvotspēju pēc pārneses un ātru atkārtotu piekļāvēšanos.

Accutase sastāvs ir balstīts uz Dulbecco fosfāta buferšķīdumu (DPBS) ar EDTA un fenolsarkano kā vizuālu pH indikatoru. Fermenti ir ne-zīdītāju un ne-baktēriju izcelsmes, padarot Accutase īpaši piemērotu cilmes šūnu pētniecībai, vakcīnu ražošanas procesiem un jebkurai lietošanai, kurā ir jāminimizē dzīvnieku vai mikrobiālas izcelsmes piesārņotāji. Šķīdums automātiski inhibējas 37 °C temperatūrā, tādēļ pēc atdalīšanas nav nepieciešams neitralizējošs reaģents vai serumu saturošs barotne – šūnas var pārnest tieši svaigā barotnē.

Galvenās īpašības

Lietošanai gatavs 1x sterili filtrēts šķidrums – nav nepieciešama atšķaidīšana vai atjaunošana
Kombinēta proteolītiskā un kolagenolītiskā enzīmu aktivitāte maigai disociācijai
Katra partija standartizēta atbilstoši noteiktam disociācijas aktivitātes līmenim, lai nodrošinātu partiju savstarpēju atbilstību
Enzīmu izcelsme nav saistīta ar zīdītājiem vai baktērijām
Automātiska inhibīcija 37 °C temperatūrā – nav nepieciešams neitralizējošs šķīdums
Formulēts Dulbecco PBS ar EDTA
Fenolsarkans iekļauts kā vizuāls pH indikators
pH 6,8–7,8


Tipiski pielietojumi
Accutase maigi disociē plašu klāstu adhezīvu un jutīgu šūnu tipu, tostarp cilvēka embrionālās cilmes šūnas (hESCs), cilvēka indukcijas pluripotentās cilmes šūnas (iPSCs), neironu cilmes šūnas, primāros neironus un rutīniski kultivētas adhezīvās šūnu līnijas, piemēram, HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 un A549. Tipiski lietošanas gadījumi ietver:

Rutīniska adhezīvo zīdītāju šūnu subkultivēšana un pasāžēšana
Maiga hESCs, iPSCs un citu jutīgu līniju atsevišķu šūnu atdalīšana
Paraugu sagatavošana plūsmas citometrijai un FACS analīzei
Šūnu virsmas marķieru analīze, kur svarīga ir epitopa integritāte
Šūnu migrācijas, proliferācijas un apoptozes analīzes
Miera stāvokļa testi, izmantojot seruma izsīkšanu un onkogēnu transfekcijas pētījumus
Audzēja šūnu un neirālo krastu šūnu migrācijas testi
Ražošanas apjoma palielināšana bioreaktoru darba plūsmās

Ikdienas darbā uzklājiet aptuveni 10 ml Accutase uz 75 cm2 kultūras virsmas un inkubējiet 5–10 minūtes istabas temperatūrā. Optimālais inkubācijas laiks jānosaka katrai šūnu līnijai atsevišķi, un tas nedrīkst pārsniegt vienu stundu. Pirms pievienošanas noskalojiet šūnu slāni ar Ca2+/Mg2+-nesaturošu sāls šķīdumu, piemēram, DPBS bez kalcija un magnija, lai noņemtu seruma atliekas un divvērtīgos katjonus.

Rīkošanās un uzglabāšana
Neatvērtu pudeli uzglabājiet sasaldētu -15 °C vai zemākā temperatūrā. Atkausējiet istabas temperatūrā vai nakti +2 °C līdz +8 °C temperatūrā. Neatkausējiet Accutase 37 °C ūdens vannā, jo paaugstināta temperatūra samazina fermentu aktivitāti. Pēc atkausēšanas šķīdumu var uzglabāt līdz 2 mēnešiem +2 °C līdz +8 °C temperatūrā; neuzglabājiet istabas temperatūrā. Pirms lietošanas reaģentu neiesildiet līdz 37 °C – pievienojiet to tieši izskalotām šūnām istabas temperatūrā. Lai nodrošinātu ilgu glabāšanas laiku, ieteicams izmantot vienreizējās lietošanas alikvotas, lai izvairītos no atkārtotiem atkausēšanas cikliem. Vienmēr strādājiet aseptiskos apstākļos.

Kvalitāte
Ražots saskaņā ar stingriem kvalitātes standartiem. Katra Accutase partija tiek sterilizēta ar filtrēšanu un pārbaudīta attiecībā uz sterilitāti, pH, izskatu un disociācijas aktivitāti, lai nodrošinātu vienmērīgu, reproducējamu darbību no partijas uz partiju.

Produkta specifikācijas



Specifikācija
Sīkāka informācija



Produkta veidsŠūnu atdalīšanas / disociācijas reaģents
FormātsSterili filtrēts šķidrums, gatavs lietošanai
Tilpums100 ml
Darba koncentrācija1x (gatavs lietošanai)
Enzīmu aktivitāteKombinēta proteolītiska un kolagenolītiska
Fermentu izcelsmeNe no zīdītājiem un ne no baktērijām
Buferu sistēmaDulbecco PBS ar EDTA
pH indikatorsFenolsarkans
pH diapazons6,8 – 7,8
IzskatsDzidrs, gaiši sarkans līdz oranžs šķīdums
Uzglabāšanas temperatūra-15 °C vai zemāka
Stabilitāte pēc atkausēšanasLīdz 2 mēnešiem temperatūrā no +2 °C līdz +8 °C
Ieteicamais lietošanas daudzums~10 ml uz 75 cm2 kultūras virsmas
Tipisks inkubācijas laiks5–10 minūtes istabas temperatūrā
Piegādes nosacījumiSasaldēts uz sausā ledus
Paredzētais lietojumsTikai pētniecības vajadzībām un turpmākai ražošanai



Sastāvs (sastāvs uz litru)



Sastāvdaļa
Koncentrācija (mg/l)




Neorganiskie sāļi

Nātrija hlorīds (NaCl)8000,00
Dinātrija hidrogēnfosfāts (Na2HPO4)1150,00
Kālija hlorīds (KCl)200,00
Kālija dihidrogēnfosfāts (KH2PO4)200,00

Citas sastāvdaļas

EDTA · 4Na (tetranātrija EDTA)220,00
Fenolsarkans3,00
Patentēts fermentu maisījums (proteolītiska un kolagenolītiska aktivitāte)1x



Accutase ir Innovative Cell Technologies, Inc. reģistrēta preču zīme.

Cytion's Freeze Medium CM-1 ir mūsdienīga kriokonservēšanas barotne, kas izstrādāta, lai nodrošinātu visaugstākā līmeņa šūnu dzīvotspēju un funkcionalitāti pēc atkausēšanas. Šī daudzpusīgā barotne ir piemērota plašam šūnu tipu spektram, tostarp gan cilvēku, gan dzīvnieku šūnām, padarot to par būtisku līdzekli dažādiem pētniecības lietojumiem. Izstrādāta ar rūpīgi sabalansētu krioprotektoru un svarīgāko barības vielu kombināciju, sasaldēšanas barotne CM-1 samazina ledus kristālu veidošanos un šūnu stresu sasaldēšanas procesa laikā, tādējādi saglabājot šūnu integritāti.
Freeze Medium CM-1 galvenās īpašības:

Plaša saderība: Efektīva dažādiem šūnu tipiem, tostarp primārajām šūnām, cilmes šūnām un izveidotām šūnu līnijām.
Augsta dzīvotspēja: Optimizēta, lai pēc atkausēšanas maksimāli palielinātu šūnu reģenerāciju un dzīvotspēju, nodrošinot uzticamus eksperimentu rezultātus.
Gatavs lietošanai: Ērti sagatavotas un sterilizētas tūlītējai lietošanai, samazinot sagatavošanas laiku un piesārņojuma risku.
Uzlabota stabilitāte: Uztur nemainīgu veiktspēju standarta kriokonservēšanas apstākļos, nodrošinot reproducējamus rezultātus.
Ilgs glabāšanas laiks: CM-1 ir serumu saturoša, lietošanai gatava kriokonservēšanas barotne, ko var uzglabāt ledusskapī līdz pat vienam gadam.


CM-1 izmantošana šūnu sasaldēšanai

Lai izmantotu CM-1 gan adhēzijas, gan suspensijas šūnu sasaldēšanai, izpildiet šādas darbības

Attiecībā uz adhēzīvām šūnām tās nomazgā un atdala no kultūras substrāta. Suspensijas šūnām pārejiet uz nākamo soli.
Saskaitiet šūnas, lai pārliecinātos, ka to koncentrācija ir atbilstoša.
Centrifugējiet šūnas, lai tās granulētu, pēc tam atkārtoti suspendējiet CM-1 sasaldēšanas barotnē.
Resuspendētās šūnas pārvietot kriokivās.
Pirms šūnu pārvietošanas uz ilgtermiņa uzglabāšanu izmantojiet lēnas sasaldēšanas metodi





Metode
Apraksts
Soļi





❄️
Manuāla sasaldēšana

Pakāpeniska metode, kas ietver pakāpenisku temperatūras pazemināšanu, lai nodrošinātu šūnu dzīvotspēju

1️⃣ Ievietojiet šūnas sasaldēšanas barotnē 4 °C saldētavā uz 40 minūtēm.
2️⃣ Uz 24 stundām pārvietot uz -80°C saldētavu.
3️⃣ Ilgtermiņa uzglabāšanai šūnas uzglabāt šķidrā slāpeklī



❄️
Frosty kunga izmantošana

Ērta ierīce, kas ļauj kontrolēt sasaldēšanas ātrumu bez elektriskās strāvas

1️⃣ Sagatavojiet šūnas krioviālos ar sasaldēšanas barotni.
2️⃣ Ievietojiet krioviālus Mr. Frosty konteinerā.
3️⃣ Pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli 24 stundas uzglabāt -80 °C temperatūrā



❄️
Kontrolēta ātruma saldētava

Thermo Fisher vai citu ražotāju augstas precizitātes saldētava, kas paredzēta kontrolētai temperatūras pazemināšanai

1️⃣ Ierīci ieprogrammējiet tā, lai pakāpeniski pazeminātu temperatūru.
2️⃣ Ievietojiet sagatavotās šūnas saldētavā.
3️⃣ Pēc sasaldēšanas cikla šūnas pārceliet uz šķidro slāpekli









Glabājiet krioviālus temperatūrā, kas zemāka par -130 °C, vai šķidrā slāpeklī ilgstošai uzglabāšanai.


Sastāvdaļas

Satur FBS, DMSO, glikozi, glikozi, sāļus
Buferizācijas spēja: pH = 7,2 līdz 7,6


Cytion's Freeze Medium CM-1 piedāvā uzticamu risinājumu kriokonservēšanai, nodrošinot augstu šūnu dzīvotspēju un funkcionalitāti pēc atkausēšanas visdažādākajiem pētniecības lietojumiem.

Produkta pārskats
Tilpums: 100 ml Uzglabāšana: ≤-15°C Sterilitāte: Sterilitāte: Sterili jāfiltrē
Antibiotiku/antimikotisko līdzekļu šķīdums (100x ) ir sterils, lietošanai gatavs koncentrāts, kas paredzēts mikrobioloģiskā piesārņojuma risku samazināšanai šūnu kultūru un saistītās laboratorijās. Šis 100x šķīdums satur vispāratzītu penicilīna, streptomicīna un amfotericīna B kombināciju, kas nodrošina plaša spektra antimikrobiālu iedarbību pret grampozitīvām un gramnegatīvām baktērijām, raugiem un pavedienveida sēnītēm. Preparāts ir piemērots lietošanai eikariotisko šūnu kultūrās, bakteriālajās barotnēs un citās sistēmās, kas jutīgas pret piesārņojumu, veicinot tīras un konsekventas laboratorijas darbības.
Lietošana un priekšrocības Šis šķīdums, kas optimizēts ikdienas pētniecības protokoliem, tiek plaši izmantots, lai uzturētu aseptiskus apstākļus šūnu kultūru darba plūsmās. Tas nodrošina uzticamu veiktspēju vidē, kas jutīga pret piesārņojumu, palīdzot pētniekiem samazināt mikrobu pārmērīgas augšanas risku, neapdraudot šūnu veselību vai eksperimentālo reproducējamību. Sterilā, filtrētā formula novērš nepieciešamību pēc papildu šķīdināšanas posmiem, veicinot racionalizētu barotņu sagatavošanu un samazinot mainīgumu ikdienas laboratorijas procedūrās.
Lietošana un saderība Lai sasniegtu standarta darba koncentrācijas, atšķaidiet šķīdumu 1:100 pilnā barotnē. Produkts ir saderīgs ar plašu zīdītāju šūnu līniju un pamatnes barotņu klāstu. Pastāvīga krājumu pieejamība ļauj pētniekiem gūt labumu no uzticamas piegādes nepārtrauktības un vienkāršotas loģistikas plānošanas. Lai saglabātu šķīduma stabilitāti, tas jāuzglabā ≤ -15 °C temperatūrā un jāaizsargā no atkārtotiem sasalšanas un atkausēšanas cikliem. Tikai izmantošanai pētniecībā. Nav paredzēts lietošanai diagnostikas vai terapeitiskās procedūrās. Nav paredzēts lietošanai cilvēkiem vai dzīvniekiem.