Cilvēka mezenhimālās cilmes šūnas - kaulu smadzenes (HMSC-BM)
Vispārīga informācija
| Apraksts | No kaulu smadzenēm iegūtas cilvēka mesenchimālās cilmes šūnas (HMSC-BM) ir spēcīgs un daudzpusīgs instruments in vitro pētījumiem. Šīs multipotentās mesenchimālās stromas šūnas (MSC) piemīt unikāla spēja pašatjaunoties un diferenciēties plašā šūnu tipu spektrā, tostarp adipocītos, osteoblastos un hondrocītos. HMSC-BM potenciāls diferenciēties šajos trīs galvenajos virzienos ir labi dokumentēts, padarot tās nenovērtējamas pētījumos, kas vērsti uz reģeneratīvo medicīnu, audu inženieriju un šūnu diferenciācijas ceļiem. Šīs MSC tiek kultivētas stingros apstākļos, nodrošinot to multipotentitāti un augstu dzīvotspēju pēc atkausēšanas. Viena no HMSC-BM atšķirīgajām īpašībām salīdzinājumā ar MSC, kas iegūtas no citiem avotiem, piemēram, taukaudos vai nabassaites, ir to izcilā osteogēnās diferenciācijas spēja. Tas padara tās īpaši noderīgas kaulu bioloģijas un ortopēdijas pētījumos, kur izpratne par molekulārajiem mehānismiem, kas regulē kaulu veidošanos un atjaunošanos, ir ļoti svarīga. Turklāt HMSC-BM izrāda spēcīgu imūnmodulējošu profilu, kas padara tās par izcilu modeli imūnās mijiedarbības un iekaisuma reakciju pētīšanai. Šīs unikālās īpašības arī padara HMSC-BM par vēlamo izvēli pirmsklīniskajos pētījumos, kuros tiek pētīta kaulu smadzeņu mikrovide, hematopoēze un kaulu smadzeņu saistītu slimību patofizioloģija. Katra HMSC-BM krioviala satur vismaz 1 x 106 šūnas, kuru dzīvotspēja ir no 92% līdz 95%, kā noteikts ar Trypan Blue krāsvielas izslēgšanas testu. Šīs šūnas ir iegūtas no kaulu smadzenēm, kas savāktas no veseliem pieaugušajiem donoriem, kuri visi ir devuši informētu piekrišanu. Lai nodrošinātu augstākos standartus, katra partija tiek pakļauta stingrai kvalitātes kontrolei, lai novērtētu šūnu identifikāciju, tīrību, iedarbīgumu un dzīvotspēju. Šī rūpīgā pārbaude garantē, ka MSC atbilst stingriem kritērijiem, padarot tās piemērotas plašam pētījumu klāstam, tostarp šūnu bioloģijas pētījumiem, zāļu atklāšanai un šūnu reakciju uz dažādiem stimuliem izpētei. Šīs šūnas nav paredzētas terapeitiskai vai in vivo lietošanai, un to izmantošana ir ierobežota pētniecības nolūkos kontrolētā laboratorijas vidē. |
|---|---|
| Organisms | Cilvēks |
| Audu | Kaulu smadzenes |
| Pieteikumi | Zāļu testēšana, reģeneratīvā medicīna, slimību izpēte |
Raksturojums
| Vecums | Lūdzu, jautājiet |
|---|---|
| Dzimums | Lūdzu, jautājiet |
| Etniskā piederība | Kaukāzietis |
| Morfoloģija | Labi izkliedēta vārpstas formas, fibroblastiem līdzīga morfoloģija vismaz 5 pasāžu laikā. Mazāk nekā 2 % šūnu katrā pasāžā uzrāda spontānu miofibroblastiem līdzīgu morfoloģiju. |
| Šūnas tips | Cilmes šūnas |
| Augšanas īpašības | Adherent |
Normatīvie dati
| Citāts | Cilvēka mezenhimālās cilmes šūnas, kaulu smadzenes (HMSC-BM) (Cytion kataloga numurs 300665) |
|---|---|
| Bioloģiskās drošības līmenis | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
Biomolekulārie dati
| Antigēna ekspresija | Lai identificētu kultivētās MSC (P2-P3) pirms kriokonservēšanas, plūsmas citometrijas analīzē izmanto plašu marķieru paneli, tostarp CD73/CD90/CD105 (pozitīvi) un CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatīvi). Šos marķierus iesaka ISCT MSC komiteja. |
|---|---|
| Vīrusi | Donors ir negatīvs uz HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) un HIV-1/2 (IFA). Šūnas ir negatīvas uz HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum un Ureaplasma parvum. |
Darbs ar
| Kultūras barotne | Alpha MEM, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w/o: Ribonukleozīdi, w/o: Deoksiribonukleozīdi, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3 |
|---|---|
| Papildinājumi | Papildināt barotni ar 10% FBS, 2 ng/ml bFGF |
| Disociācijas reaģents | Tripsīns-EDTA |
| Subkultivēšana | Parastai adherentu šūnu kultūrai: Lai noņemtu atlikušo barotni, aspirējiet veco barotni no pielipušajām šūnām un izskalojiet tās ar PBS, lai noņemtu atlikušo barotni. Pēc PBS atsūknēšanas pievienojiet atbilstošu tripsīna/EDTA šķīduma tilpumu atkarībā no kultūras trauka lieluma (piemēram, 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai) un inkubējiet istabas temperatūrā vai 37 °C, līdz šūnas atdalās (5-10 minūtes). Novērot atdalīšanos ar mikroskopu un, ja nepieciešams, viegli piesitiet trauku, lai atbrīvotu šūnas. Pēc atdalīšanās pievienot pilnu barotni, lai inaktivētu tripsīnu/EDTA, uzmanīgi resuspendēt šūnas un šūnu suspensijas alikvotu pārvietot jaunā barotnē ar svaigu barotni. Ievietot trauku inkubatorā, kas iestatīts 37 °C temperatūrā ar 5 %CO2, un ik pēc 2-3 dienām mainīt barotni. |
| Sēšanas blīvums | 1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2 |
| Šķidruma atjaunošana | Pirmā šķidruma atjaunošana pēc 24 stundām, pēc tam ik pēc 2 līdz 3 dienām. |
| Vidēja sasaldēšanas pakāpe | Kā krioprezervēšanas barotni mēs izmantojam 80 % FBS + 10 % bāzes barotni + 10 % DMSO, lai saglabātu dzīvotspēju, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas nodrošina labāku krioprotekciju, novēršot nevēlamu diferenciāciju un vienlaikus saglabājot pluripotenci. |
| Šūnu atkausēšana un kultivēšana |
|
| Inkubācijas atmosfēra | 37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra. |
| Flakona pārklājums | Optimālai piestiprināšanai un dzīvotspējai pēc atkausēšanas ieteicams izmantot ar kolagēnu pārklātas kolbas vai plates. |
| Sasaldēšanas procedūra | Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu. |
| Nosūtīšanas nosacījumi | Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu. |
| Uzglabāšanas apstākļi | Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli. |
Kvalitātes kontrole / Ģenētiskais profils / HLA
| Sterilitāte | Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes. Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda. |
|---|
Analīzes sertifikāts (CoA)
| Partijas numurs | Sertifikāta veids | Datums | Kataloga numurs |
|---|---|---|---|
| 300665-240423P1 | Analīzes sertifikāts | 26. Mar. 2026 | 300665 |
Materiālu nodošanas līgums
Ja plānojat izmantot Cytion šūnu līnijas tikai iekšējiem pētījumiem vienā pētniecības vietā, lūdzu, aizpildiet un parakstiet mūsu Materiālu nodošanas līgumu (MTA) un iesniedziet to kopā ar savu pasūtījumu.
Jebkādiem komerciāliem mērķiem, tostarp, bet ne tikai, maksas pakalpojumiem, kvalitātes kontroles testēšanai, produktu laišanai tirgū, diagnostikai vai regulatīviem pētījumiem, lūdzu, aizpildiet paredzētās izmantošanas veidlapu, lai mēs varētu sagatavot jūsu projektam piemērotu līgumu.
Lūdzu, ņemiet vērā: MTA attiecas tikai uz noteiktām šūnu līnijām. Ja šis paziņojums un MTA dokuments ir redzams produkta lapā, līgums ir piemērojams. Šūnu līnijām, uz kurām neattiecas MTA, atsauce uz līgumu netiks parādīta. MTA nav spēkā klientiem Amerikas kontinentā, Ķīnā vai Taivānā. Lūdzu, sazinieties ar mūsu ASV pārstāvniecību, lai saņemtu atbilstošo līgumu.