SiHa細胞 - 子宮頸がん研究に光を当てる

SiHa細胞は、生物医学研究に広く用いられている子宮頸がん細胞である。この細胞は優れたトランスフェクション宿主であるため、遺伝子発現研究に適している。ヒト由来であることと子宮頸がんとの関連性から、この細胞は主にがん生物学、ウイルス学、薬剤開発研究に用いられている。

SiHa細胞の一般的特徴と起源

細胞株の起源と一般的な特性を理解することは、研究での使用に影響するため非常に重要です。このセクションでは、SiHa細胞株の起源、特徴的な特性などについてご紹介します：SiHa癌細胞株とは？SiHa細胞HPVとは何ですか？SiHa細胞株の起源は何ですか？SiHaの形態は？

SiHa、子宮頸癌細胞株は、扁平上皮癌を患ったアジア人女性（55歳）の原発性子宮生検の断片から得られた[1]。
SiHa細胞株は超3倍体の核型を示す。ほとんどの細胞の平均染色体数は69から72の間である。しかし、約24％の細胞は染色体数が71である。
SiHa細胞はヒト乳頭腫ウイルス16陽性である。SiHa細胞はヒト乳頭腫ウイルス16陽性であり、細胞当たりHPVゲノムの約1～2コピーの集積を示す[2]。
これらの子宮頸癌細胞は上皮形態を示す。

顕微鏡下のHeLa子宮頸がん細胞の分裂。

SiHa細胞株培養情報

細胞株の培養を維持するのは、培養の重要なポイントをすべて知ってからでないと容易ではありません。知っておくべきことSiHaの倍加時間は？SiHa細胞培地とは？SiHa細胞株の培養方法は？

SiHa細胞培養のポイント

倍加時間：	SiHa細胞の倍加時間は約17時間です。
接着か懸濁か：	SiHaは接着性の細胞株です。
サブカルチャー比率：	SiHa細胞のサブカルチャー比は1:2～1:4である。継代のために、接着細胞を1xPBSで洗浄する。アキュターゼ溶液を加え、細胞を周囲温度で8～10分間インキュベートする。次に培地を加え、細胞を遠心する。細胞ペレットを再懸濁し、培養用の新しいフラスコに流し込む。
増殖培地：	SiHa細胞の理想的な増殖には、10％FBS、2mM L-グルタミン、2.2g/L NaHCO3、Earle's Balanced Salt Solution (EBSS)を含むEagle's minimum essential medium (EMEM)が使用される。培地は週に2～3回交換する。
増殖条件：	SiHa細胞は、5％CO2供給下、37℃加湿インキュベーター内で維持される。
保存：	凍結したSiHa子宮頸癌細胞株バイアルは、-150℃以下で電気冷凍庫または液体窒素の気相中で長期保存される。
凍結プロセスと培地	SiHa細胞の凍結にはCM-1またはCM-ACF凍結培地を使用する。細胞の生存率を守るため、1分間に1℃しか下がらない緩慢凍結法で凍結する。
解凍プロセス：	凍結した細胞は、小さな氷の塊が残るまで37℃の水浴中で40～60秒間静置する。その後、新鮮な増殖培地を加え、細胞を遠心分離して凍結培地成分を除去する。細胞ペレットを再懸濁し、培養フラスコに分注して増殖させる。
バイオセーフティ・レベル	SiHa細胞培養の取り扱いおよび維持には、バイオセーフティーレベル1の実験室が必要である。

10倍と20倍の倍率で見たSiHa細胞の接着層。

SiHa細胞株の長所と短所

他のヒト癌細胞株と同様に、SiHaもまた、ある種の利点と欠点に関連するいくつかの際立った特徴を持っている。ここでは、いくつかの重要なものについて述べた。

SiHa子宮頸癌細胞株の利点

子宮頸癌モデル
- 子宮頸部扁平上皮がん由来。
- 子宮頸癌のメカニズム、増殖、発生を研究するために使用される。
- DNA修復、細胞周期制御、腫瘍抑制に関連する遺伝子p53+およびpRB+を発現する。
腫瘍形成能
- SiHa細胞は腫瘍形成能を有し、ヌードマウスにおいて低分化度のグレードIII表皮腫を誘発することができる。
- in vivoでのがん研究や抗がん剤治療の試験に使用される。

SiHa細胞の欠点

増殖速度
- SiHa細胞は急速に増殖するため、過剰増殖につながる。
- 頻繁な継代を必要とするため、遺伝的不安定性のリスクが高くなり、長期間の細胞挙動に影響を及ぼす可能性がある。

SiHa細胞の研究応用

SiHa細胞株は子宮頸癌研究に広く用いられている。ここでは、この細胞株のいくつかの特定された応用について述べる。

ヒトパピローマウイルス（HPV）関連研究： SiHa細胞はHPV16陽性であるため、ヒトパピローマウイルス感染、その分子機構、子宮頸癌の発生と進行におけるその役割を研究するための貴重な存在である。研究者たちはまた、ウイルスの複製、統合、宿主細胞のプロセスへの影響を調べるためにこの細胞を使用している。2020年に実施された研究では、SiHa細胞株を用いて、CRISPR技術を用いてHPV E6/E7オンコプロテインを標的とし、子宮頸がん発症におけるHPV E6/E7の役割を調べた。その結果、E6/E7遺伝子のノックダウンはSiHa細胞の増殖抑制とアポトーシスを引き起こすことが明らかになった。したがって、これらのウイルス遺伝子は、HPV関連子宮頸がんに対する治療法を開発するための重要な創薬標的として機能する可能性がある[3]。
癌生物学： SiHa細胞は、癌の発生、進行、転移、浸潤を含む子宮頸癌の生物学を研究するための貴重なモデルである。例えば、SiHa細胞を用いた研究では、アップレギュレートされたSEC61G（SEC61トランスロコン・サブユニット・ガンマ）がMAPKカスケードの活性化を通じて子宮頸がん細胞の増殖を促進することを発見した[4]。
薬剤のスクリーニングと試験 SiHaは、HPV関連子宮頸癌に特異的な潜在的抗癌剤の有効性を評価するために広く使用されている子宮頸癌株である。研究者たちは、これらの細胞を用いて薬剤の抗増殖、アポトーシス、抗転移の可能性を探っている。例えば、2019年に行われた研究では、SiHa子宮頸がん細胞株に対するVatica diospyroides SymingtonType SS果実抽出物の細胞毒性能を調査している[5]。

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SiHa細胞を取り上げた研究発表

SiHa子宮頸部扁平上皮癌細胞株を取り上げた、重要で頻繁に引用される研究発表がいくつかあります。

子宮頸がん細胞に対するアロエ・エモジンの抗腫瘍効果は、ヒトパピローマウイルスE6/E7およびグルコース代謝と関連していた

このOncoTargets and Therapy（2019年）に掲載された論文は、天然化合物のアロエエモジンがSiHa子宮頸がん細胞においてHPV E6/E7とグルコース代謝に関連したアポトーシス効果を発揮することを提唱した。

Excoecaria agallocha(L.)葉エキスのヒト子宮頸がん(SiHa)細胞株に対する抗がん作用の評価と作用機序の評価

この論文は、2022年にFuture Journal of Pharmaceutical Sciencesに掲載されました。本研究では、Excoecaria agallocha(L.) 植物葉エキスのSiHa子宮頸がん細胞株における抗腫瘍活性を調べた。

硫酸化ZnOナノ粒子と結合した1, 10-フェナントロリンのSiHa子宮頸がん細胞株に対する抗増殖効果

Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022)に掲載されたこの研究では、硫酸亜鉛ナノ粒子と結合した1, 10-フェナントロリン分子が、SiHa細胞において顕著な抗増殖効果を発揮することが提案された。

アストラガロシドIVは、TGF-β1を介したPI3KおよびMAPK経路を介してSiHa子宮頸がん細胞の浸潤および転移を阻害する

この研究は、2019年にOncology Reports誌に掲載された。天然物であるアストラガロシドIVが、TGF-β1を介するPI3KおよびMAPKシグナル伝達経路を調節することにより、SiHa細胞の遊走および浸潤を抑制することを明らかにした。

IFI16はSTING-TBK1-NF-kB経路を通じて免疫微小環境におけるPD-L1のアップレギュレーションにより子宮頸がんの進行を促進する

Biomedicine & Pharmacotherapy誌（2020年）に掲載されたこの研究により、IFI16（インターフェロン-γ誘導性タンパク質16）がSTING-TBK1-NF-kB経路の活性化を介してPD-L1遺伝子を制御し、SiHa子宮頸がん細胞の増殖を促すことが明らかになった。

SiHa細胞株のリソース：プロトコル、ビデオ、その他

SiHa細胞を特集したオンラインリソースをいくつかご紹介します。

SiHa細胞のトランスフェクション：この研究論文には、SiHa子宮頸癌細胞の維持とSiHa細胞トランスフェクションのプロトコールが含まれています。

以下のリンクはSiHa細胞の細胞培養情報を含んでいます。

SiHa細胞株： このウェブサイトには、SiHa細胞株に関する多くの貴重なデータが掲載されている。これには、増殖培地、培養条件、SiHa細胞を再培養するためのプロトコール、増殖培養と凍結保存培養の取り扱いに関する情報が含まれる。

SiHa子宮頸がん細胞に関するFAQ

参考文献

Melzer, C., J. von der Ohe, and R. Hass,Concise review: Crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential.Stem cells, 2018.36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al.,Investigation of the influence of high-risk human papillomavirus on the biochemical composition of cervical cancer cells using vibrational spectroscopy.Analyst, 2010.135(12): p. 3087-3093.
Chen,Y.、他、CRISPR/Cas13aシステムによるヒトパピローマウイルスE6/E7 mRNAの切断を介したヒト子宮頸がん細胞のin vitroおよびin vivo増殖抑制。Antiviral Research, 2020.178: p. 104794.
SEC61Gは、MAPKシグナル伝達経路の活性化により子宮頸がんの増殖を促進する。Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al.,Vatica diospyroides symington type SSの果実抽出物の抗がん作用と子宮頸がん細胞株のプログラム細胞死に対する効果。The Scientific World Journal, 2019. 2019.