RBL-2H3細胞 - アレルギー応答および免疫学的研究におけるRBL-2H3の意義

RBL-2H3細胞株は免疫学研究に用いられるラット由来の好塩基性白血病細胞株である。肥満細胞の生理、行動、機能を研究するためのモデル系として役立っている。これらの細胞はまた、アレルギー反応、免疫学的プロセス、薬剤の試験や開発の研究にも用いられている。

この論文では、RBL-2H3の起源、一般的な特性、培養の必要性、研究への応用についての洞察を提供する。

RBL-2H3細胞起源と一般的特徴

研究で好塩基球細胞株を使用する前に、その由来と一般的な特性を知っておく必要があります。このセクションでは、RBL-2H3細胞の基本についてお知らせします。例えば、RBL-2H3肥満細胞とは何か？なぜRBL-2H3細胞を使うのか？ラット好塩基球性白血病におけるRBL-2H3細胞とは？RBL-2H3の形態とは？RBL-2H3細胞は不死ですか？

RBL-2H3は、1978年に国立歯科医学研究所免疫学研究室において、ウィスターラット好塩基球細胞から誘導された好塩基性白血病細胞である。
RBL-2H3細胞はc-kit受容体チロシンキナーゼと肥満細胞プロテアーゼII（RMCP-II）受容体を持っており、肥満細胞のモデルとなりうる。そのため、ラットの好塩基球に由来するにもかかわらず、一般にマスト細胞と呼ばれている[1]。
RBL-2H3細胞は活性化するとヒスタミンや他のメディエーターを放出し、高親和性IgEレセプターを発現する。
RBL-2H3細胞は線維芽細胞様の形態を示す。

肥満細胞の顕微鏡的可視化。

RBL-2H3細胞培養情報

このセクションでは、RBL-2H3 細胞株を培養するためのいくつかの重要な点について学びます。以下のことを知ることができます：RBL-2H3細胞の倍加時間とは？RBL-2H3細胞の播種密度とは？RBL-2H3細胞培養プロトコールとは？RBL-2H3細胞株凍結培地とは何ですか？

RBL-2H3細胞培養のポイント

個体数の倍加時間：	RBL-2H3肥満細胞の倍加時間は約50～60時間です。
接着または懸濁状態：	RBL-2H3は接着細胞株です。
サブカルチャー比率	RBL-2H3は1:2～1:4の間で分割する。接着細胞は、マグネシウムおよびカルシウムを含まない1 x PBS溶液で洗浄する。継代液Accutaseを添加し、細胞を培養容器の底から剥離させるため、周囲温度で10分間静置する。新鮮培地を加え、細胞を遠心分離する。回収した細胞を新しい培地に注意深く再懸濁し、増殖培地の入った新しいフラスコに流し込む。
増殖培地：	10%FBS、2mM L-グルタミン、2.2g/L NaHCO3、EBSS塩を含むEMEM培地をRBL-2H3細胞の培養に使用する。培地は週に2～3回交換する。
増殖条件：	RBL-2H3細胞は、37℃に設定され、5％_CO2源に接続された加湿インキュベーター内で培養される。
保存：	細胞は液体窒素の気相中で保存するか、電気冷凍庫で-150℃以下で保存し、細胞の生存能力を長期間保護する。
凍結プロセスと培地	CM-1またはCM-ACF凍結培地を用いて、緩慢凍結法によりRBL-2H3細胞を凍結する。簡単に言えば、この方法は1分間に1℃の温度低下を許容し、細胞をショックから保護する。
解凍プロセス：	RBL-2H3細胞は、あらかじめ設定されたウォーターバス（37℃）で約60秒間解凍される。その後、細胞を新鮮な培地に加え、遠心分離する。このステップは、凍結培地成分を除去するために不可欠である。次に、細胞ペレットを増殖培地に再懸濁し、培養用フラスコに分注する。
バイオセーフティーレベル	RBL-2H3細胞はバイオセーフティー1の実験室で維持されるべきである。

RBL-2H3細胞の接着単層、コンフルエント20倍および10倍拡大。

RBL-2H3好塩基球細胞株の利点と限界

RBL-2H3細胞は免疫学研究において一般的に利用されている。このセクションでは、その主な利点と限界について概説する。

利点

培養が容易：RBL-2H3細胞は実験室環境で容易に培養、維持できる。このため、費用効率が高く、再現性のある実験が可能であり、免疫学の初期研究によく用いられる。

制限事項

非ヒト由来：ラット好塩基球に由来するRBL-2H3細胞は、ヒトの生物学的プロセスを正確に模倣していない可能性があり、ヒトに特異的な研究への応用が制限される可能性がある。このため、結果をヒト系に外挿する際には、データの解釈に慎重を期す必要がある。
簡略化されたマスト細胞モデル：これらの細胞は肥満細胞の機能を研究するための基本的なモデルを提供するが、ヒト免疫系における肥満細胞相互作用の複雑な性質を完全には表現していない。その結果、in vivoでの免疫応答や疾患状態における肥満細胞の多面的な役割を適切にモデル化できない可能性がある。

RBL-2H3細胞株：免疫学研究の礎石

RBL-2H3細胞株を用いた好塩基球と肥満細胞の研究

Rattus norvegicus由来のRBL-2H3細胞株は、好塩基球と肥満細胞の生物学を研究するための重要なモデルとして機能している。これらのラット肥満細胞は、アレルギー性鼻炎のようなアレルギー症状を理解する上で重要な、肥満細胞メディエーター放出に関する重要な洞察を与えてくれる。これらの細胞を通して、研究者たちは、アレルゲンに対する免疫系の反応の中心である細胞受容体動態と 免疫学的シナプスの確立を探求している。2019年に発表された興味深い研究では、RBL-2H3細胞株を用い、清海嶺注射によって生じる偽アレルギー反応の背後にあるメカニズムを研究している。この研究では、PI3K-RAC1シグナル伝達カスケードが、細胞においてこのアレルギー反応を部分的に惹起することが判明した[2]。

アレルギー研究における免疫シナプスの動態

免疫学研究に広く用いられているRBL-2H3細胞は、免疫学的シナプスの動態を調べるのに特に効果的である。これは、末梢血 マスト細胞と腹膜マスト細胞の両方の研究に応用され、免疫系のコミュニケーションプロセスの解明に役立つ。このような研究は、全身的および局所的な免疫反応の包括的理解に不可欠である。

薬物スクリーニングと毒性試験

薬剤のスクリーニングや試験では、H2O2がIgEを介した反応をどのように阻害するかの研究を含め、様々な刺激に対するRBL細胞の反応性が利用される。この細胞は、連鎖球菌感染症のような疾患の治療法の開発において重要な役割を果たしており、ミティス群連鎖球菌は肥満細胞の活性化を阻害する。この他にも、研究者はこのRBL 2H3 mcモデルを用いて、化学物質、薬剤、ナノ粒子など様々な物質の毒性効果を評価している。例えば、最近の研究（2022年）では、RBL-2H3細胞に対するポリスチレン・マイクロプラスチックの細胞毒性を評価した。彼らは、マイクロプラスチックがRBL-2H3細胞小器官を損傷し、細胞死を促進することを発見した[3]。別の2021年の研究では、RBL 2H3 mcモデルを用いて、天然物であるネフェリンの抗アレルギーおよび抗炎症の可能性が評価された。この研究では、この化合物の優れた抗アレルギーおよび抗炎症特性が明らかにされた[4]。

免疫学的測定における高度な方法論

RBL-2H3細胞からの一貫した測定可能なメディエーター放出は、簡便な蛍光測定に理想的であり、疾患研究や治療薬の評価に極めて重要な精密で正確な測定を容易にする。

ラット由来のRBL-2H3細胞株は、免疫学分野における基礎研究および応用研究の双方において貴重な資産である。RBL-2H3細胞株は、免疫学的疾患に関する我々の知識と治療の進歩に多大な機会を与えてくれる。

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RBL-2H3細胞研究発表

RBL-2H3マスト細胞に関する研究発表です：

RBL-2H3細胞の脱顆粒に対するナリルチンの抑制活性

この研究論文はImmunopharmacology and Immunotoxicology誌（2021年）に掲載された。本研究では、天然化合物であるナリルチンが、NF-κB、MAPK、チロシンキナーゼシグナル伝達経路を制御することにより、RBL 2H3の脱顆粒抑制作用を発揮することを提唱した。

RBL-2H3、RAW264.7、HaCaT細胞に対するアピゲニンの効果：抗アレルギー、抗炎症、皮膚保護活性

International Journal of Molecular Sciences誌（2020年）に掲載されたこの研究では、アピゲニン化合物がRBL-2H3細胞とRAW264.7細胞のアレルギー反応と炎症反応を有意に抑制することが提唱された。従って、アピゲニンは免疫関連疾患と闘うための潜在的な薬剤として機能する可能性がある。

サポナリンの抗炎症・抗アレルギー作用とRAW264.7、RBL-2H3、HaCaT細胞のシグナル伝達経路への影響

International Journal of Molecular Sciences誌（2021年）に掲載されたこの研究論文は、RBL-2H3を含む様々な細胞株を用いて、天然物であるサポナリンの抗アレルギー作用と抗炎症作用を評価した。

アレルギー性疾患に使用されるタイハーブ、ベンチャロカウィチアンの抽出物およびいくつかの純粋成分のRBL-2H3細胞からのβ-ヘキソサミニダーゼ放出に対する抑制効果

このEvidence-Based Complementary and Alternative Medicine（2014年）の研究では、Benchalokawichianの抽出物といくつかの活性成分が、RBL 2H3 ß-ヘキソサミニダーゼ放出に対して潜在的な阻害効果を発揮することが明らかになった。

スピルリナマキシマペプチドは、RBL-2H3細胞におけるAktおよびMAPKsリン酸化の不活性化を介して肥満細胞の脱顆粒を抑制する

この論文は2018年にInternational Journal of Biological Macromoleculesに掲載された。この研究では、天然産物であるスピルリナマキシマが、MAPKsおよびAKTのリン酸化を阻止することにより、RBL 2H3の脱顆粒を阻害することが述べられている。

RBL-2H3細胞株のリソース：プロトコル、ビデオ、その他

RBL-2H3は広く使用されている肥満細胞株です。RBL-2H3の培養とトランスフェクションのプロトコルを網羅した利用可能なリソースをここに挙げる：

RBL 2H3 MCモデル この研究論文は、RBL-2H3培養の維持とRBL-2H3トランスフェクションのプロトコルで構成されています。

RBL-2H3細胞培養プロトコールについて説明した資料があります：

RBL-2H3細胞： このウェブサイトは、RBL-2H3細胞株の細胞培養プロトコルを学ぶのに有益である。また、RBL 2H3細胞の培地や培養条件についての情報も掲載されている。

RBL-2H3細胞株研究者のための必須FAQ

参考文献

Passante, E. and N. Frankish,RBL-2H3細胞株：その出自と肥満細胞モデルとしての適性。Inflamm Res, 2009.58(11): p. 737-45.
Li, Q., et al.,Qingkailing注射によりRBL-2H3細胞のPI3K-Rac1シグナル伝達経路を部分的に介して引き起こされる偽アレルギー反応。Toxicology Research, 2019.8(3): p. 353-360.
Liu, L., et al.,ポリスチレンマイクロ（ナノ）プラスチックは、RBL-2H3細胞のオルガネラを損傷し、MOAP-1を促進してアポトーシスを誘導する。Journal of Hazardous Materials, 2022.438: p. 129550.
RBL-2H3細胞に対するネフェリンの抗アレルギーおよび抗炎症作用。International Journal of Molecular Sciences, 2021.22(20): p. 10994.