RBL-2H3細胞 ― アレルギー反応および免疫学研究におけるRBL-2H3の重要性
RBL-2H3細胞株は、免疫学研究に使用されるラット由来の好塩基性白血病細胞株です。これは、マスト細胞の生理学、挙動、および機能を研究するためのモデルシステムとして機能します。また、これらの細胞は、アレルギー反応や免疫学的プロセスの研究、ならびに薬剤の試験および開発にも用いられています。
- 培養培地
- RBL-2H3細胞の培養には、10% FBS、2 mM L-グルタミン、2.2 g/L NaHCO3、およびEBSS塩を含むEMEM培地を使用します。培地は週に2～3回交換する必要があります。
- 倍加時間
- RBL-2H3 マスト細胞の倍加時間は、約 50～60 時間です。
- 増殖様式
- RBL-2H3は付着性細胞株である。
- バイオセーフティレベル
- BSL-2
RBL-2H3細胞：由来と一般的な特性
研究で好塩基球細胞株を使用する前に、その由来と一般的な特性について理解しておく必要があります。本記事のこのセクションでは、RBL-2H3細胞の基本情報について解説します。例えば、「RBL-2H3マスト細胞とは何か？」「なぜRBL-2H3細胞を使用するのか？」といった点について説明します。 ラット好塩基性白血病におけるRBL-2H3細胞とは何か？ RBL-2H3の形態はどのようなものか？ RBL-2H3細胞は不死化されているのか？
- RBL-2H3は、1978年に国立歯科研究所免疫学研究室において、ウィスターラットの好塩基球から樹立された好塩基性白血病細胞です。
- RBL-2H3細胞は、c-kit受容体チロシンキナーゼおよびマスト細胞プロテアーゼII（RMCP-II）受容体を有しており、マスト細胞のモデルとして有望視されています。そのため、ラットの好塩基球に由来するにもかかわらず、一般にマスト細胞と呼ばれています[1]。
- これらの細胞は、活性化するとヒスタミンやその他のメディエーターを放出し、高親和性のIgE受容体を発現する。
- RBL-2H3細胞は、線維芽細胞様形態を示す。
RBL-2H3細胞：培養に関する情報
このセクションでは、RBL-2H3細胞株の培養に関する重要なポイントについて解説します。以下の内容について理解できます：RBL-2H3細胞の倍加時間はどれくらいか？RBL-2H3細胞の播種密度はどれくらいか？RBL-2H3細胞の培養プロトコルとは？ RBL-2H3細胞株の凍結用培地とは？
RBL-2H3細胞の培養における重要なポイント
細胞倍加時間：
RBL-2H3マスト細胞の倍加時間は、およそ50～60時間です。
付着培養か浮遊培養か：
RBL-2H3は付着性細胞株です。
継代倍率：
RBL-2H3細胞の場合、継代比は1:2～1:4の範囲に保たれます。付着細胞は、マグネシウムおよびカルシウムを含まない1×PBS溶液で洗浄します。 継代溶液：Accutaseを添加し、培養容器の底から細胞が剥離するまで室温で10分間放置します。新しい培地を加え、細胞を遠心分離します。回収した細胞を新しい培地に慎重に再懸濁し、増殖培地を入れた新しいフラスコに移します。
増殖培地：
RBL-2H3細胞の培養には、10% FBS、2 mM L-グルタミン、2.2 g/L NaHCO3、およびEBSS塩を含むEMEM培地を使用する。培地は週に2～3回交換する。
培養条件：
RBL-2H3細胞は、37 °Cに設定され、5% CO₂供給源が接続された加湿インキュベーター内で培養する。
保存：
細胞の長期的な生存率を維持するため、液体窒素の気相中、または電気冷凍庫内で-150 °C以下の温度で保存する。
凍結手順および培地：
RBL-2H3細胞の凍結には、CM-1またはCM-ACF凍結培地を用い、徐凍法を採用する。簡潔に言えば、この方法では1分あたり1°Cの速度で温度を下げることができ、細胞を凍結ショックから保護する。
解凍プロセス：
RBL-2H3細胞は、あらかじめ設定された水浴（37 °C）で約60秒間解凍されます。その後、細胞を新しい培養液に加え、遠心分離を行います。この工程は、凍結培地の成分を除去するために不可欠です。 次に、細胞ペレットを増殖培地に再懸濁し、培養用のフラスコに分注します。
バイオセーフティレベル：
RBL-2H3細胞は、バイオセーフティレベル1の実験室で維持する必要があります。
公開日：2023年 | 最終更新日：2026年5月
RBL-2H3好塩基球細胞株の長所と限界
RBL-2H3細胞は、免疫学研究において広く利用されています。本節では、その主な利点と限界について概説します。
利点
- 培養が容易：RBL-2H3細胞は、実験室環境下で容易に培養・維持することができます。これにより、費用対効果が高く再現性の高い実験が可能となり、免疫学における初期研究において広く利用されています。
制限事項
- 非ヒト由来：ラットの好塩基球に由来するRBL-2H3細胞は、ヒトの生物学的プロセスを正確に再現できない可能性があり、ヒトに特化した研究への適用が制限される場合があります。そのため、結果をヒトのシステムに外挿する際には、データの解釈に慎重を期す必要があります。
- 簡略化されたマスト細胞モデル：これらの細胞はマスト細胞の機能を研究するための基本的なモデルを提供しますが、ヒトの免疫系におけるマスト細胞の相互作用の複雑な性質を完全に再現しているわけではありません。その結果、生体内における免疫応答や疾患状態におけるマスト細胞の多面的な役割を適切にモデル化できない可能性があります。
RBL-2H3細胞株：免疫学研究の礎
RBL-2H3細胞株を活用した好塩基球およびマスト細胞の研究
Rattus norvegicus（ノルウェーラット）由来のRBL-2H3細胞株は、好塩基球およびマスト細胞の生物学を研究するための重要なモデルとして機能している。これらのラットマスト細胞は、アレルギー性鼻炎などのアレルギー性疾患を理解する上で極めて重要な、マスト細胞によるメディエーター放出に関する不可欠な知見を提供する。 研究者たちはこれらの細胞を用いて、アレルゲンに対する免疫系の反応において中心的な役割を果たす細胞受容体の動態や免疫シナプスの形成を解明している。2019年に発表された興味深い研究では、RBL-2H3細胞株を用いて、青開霊（Qingkailing）の注射によって引き起こされる偽アレルギー反応の背後にあるメカニズムが調査された。 この研究により、PI3K-RAC1シグナル伝達カスケードが、細胞におけるこのアレルギー反応を部分的に誘発していることが明らかになった[2]。
アレルギー研究における免疫シナプスの動態
免疫学研究で広く用いられているRBL-2H3細胞は、免疫シナプスの動態を調査するのに特に有効である。これは免疫系のコミュニケーションプロセスを解明するのに役立ち、末梢血および腹腔内マスト細胞の研究の両方に応用されている。このような研究は、全身的および局所的な文脈における免疫応答を包括的に理解するために不可欠である。
薬剤スクリーニングおよび毒性試験
薬剤スクリーニングや試験においては、H₂O₂がIgE介在性反応をどのように抑制するかといった研究を含め、RBL細胞が様々な刺激に反応する特性が活用されている。 これらの細胞は、ミティス群連鎖球菌がマスト細胞の活性化を阻害する連鎖球菌感染症などの疾患に対する治療法の開発において、不可欠な役割を果たしている。 これに加え、研究者らはこのRBL 2H3マスト細胞モデルを用いて、化学物質、医薬品、ナノ粒子など、様々な物質の毒性効果を評価している。 例えば、最近の研究（2022年）では、ポリスチレン製マイクロプラスチックがRBL-2H3細胞に及ぼす細胞毒性が評価された。その結果、マイクロプラスチックがRBL-2H3細胞の細胞小器官に損傷を与え、細胞死を促進することが明らかになった[3]。 また、2021年の別の研究では、RBL-2H3マスト細胞モデルを用いて、天然物であるネフェリンの抗アレルギー作用および抗炎症作用の可能性が評価された。この研究により、同化合物が優れた抗アレルギー作用および抗炎症作用を持つことが明らかになった[4]。
免疫学的測定における先進的な手法
RBL-2H3細胞からは一貫して測定可能なメディエーターが放出されるため、簡便な蛍光測定に最適であり、疾患研究や治療薬の評価に不可欠な精密かつ正確な測定を可能にする。
Rattus norvegicusを起源とするRBL-2H3細胞株は、免疫学分野における基礎研究および応用研究の両方において、極めて貴重な資産である。この細胞株は、免疫疾患に関する知識の深化と治療法の進歩に向けた大きな可能性を秘めている。
先端免疫学研究用RBL-2H3細胞株
RBL-2H3細胞：研究論文
以下は、RBL-2H3肥満細胞を題材とした注目すべき研究論文の一部です：
この研究論文は、『Immunopharmacology and Immunotoxicology』（2021年）に掲載されました。本研究では、天然化合物であるナリルチンが、NF-κB、MAPK、およびチロシンキナーゼシグナル伝達経路を調節することにより、RBL-2H3細胞の脱顆粒に対して抑制効果を発揮することが示唆されました。
アピゲニンがRBL-2H3、RAW264.7、およびHaCaT細胞に及ぼす影響：抗アレルギー作用、抗炎症作用、および皮膚保護作用
『International Journal of Molecular Sciences』（2020年）に掲載された本研究では、アピゲニンという化合物が、RBL-2H3およびRAW264.7細胞のアレルギー反応および炎症反応を著しく抑制することが示唆された。したがって、これは免疫関連疾患と闘うための有望な薬剤となり得る。
サポナリンの抗炎症・抗アレルギー効果およびRAW 264.7、RBL-2H3、HaCaT細胞のシグナル伝達経路への影響
『International Journal of Molecular Sciences』（2021年）に掲載された本研究論文では、天然物であるサポナリンの抗アレルギー・抗炎症効果を、RBL-2H3を含む様々な細胞株を用いて評価した。
アレルギー性疾患の治療に用いられるタイのハーブ療法「ベンチャロカウィチアン」の抽出物および一部の純化成分が、RBL-2H3細胞からのβ-ヘキソサミニダーゼ放出に及ぼす抑制効果
『Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine』（2014年）に掲載された本研究では、ベンチャロカウィチアンの抽出物および一部の有効成分が、RBL-2H3細胞からのβ-ヘキソサミニダーゼ放出に対して潜在的な抑制効果を発揮することが明らかになった。
スピルリナ・マキシマ由来のペプチドは、RBL-2H3細胞においてAktおよびMAPKのリン酸化を不活性化することにより、マスト細胞の脱顆粒を抑制する
本論文は2018年に『International Journal of Biological Macromolecules』誌に掲載された。この研究では、天然物であるスピルリナ・マキシマが、MAPKおよびAKTのリン酸化を阻害することで、RBL-2H3細胞の脱顆粒を抑制することが示された。
RBL-2H3細胞株に関するリソース：プロトコル、動画など
RBL-2H3は、広く利用されているマスト細胞株です。RBL-2H3の培養およびトランスフェクションプロトコルに関する利用可能なリソースを以下に示します：
- RBL-2H3 マスト細胞モデル：この研究論文には、RBL-2H3の培養維持およびトランスフェクションに関するプロトコルが掲載されています。
RBL-2H3細胞の培養プロトコルを解説するリソースを以下に示します：
- RBL-2H3細胞：このウェブサイトは、RBL-2H3細胞株の細胞培養プロトコルを学ぶ上で役立ちます。また、RBL-2H3細胞の培地や培養条件に関する情報も掲載されています。
RBL-2H3 細胞株：研究者必見のよくある質問
参考文献
- Passante, E. および N. Frankish, 「RBL-2H3細胞株：その由来および肥満細胞モデルとしての適性」。Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q. 他, 「RBL-2H3細胞において、PI3K-Rac1シグナル伝達経路を部分的に介して引き起こされる清凱霊注射による偽アレルギー反応」。Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L. 他, ポリスチレン微小（ナノ）プラスチックはRBL-2H3細胞の細胞小器官に損傷を与え、MOAP-1を活性化してアポトーシスを誘導する。Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M. 他、RBL-2H3細胞に対するネフェリンの抗アレルギーおよび抗炎症効果。『International Journal of Molecular Sciences』、2021年。22(20): p. 10994.