HT-29細胞株

HT-29はヒト大腸癌細胞株であり、癌および毒物学研究に幅広く応用されている。例えば、これらの細胞は大腸癌に対する標準的な化学療法に感受性がある。さらに、HT-29細胞株は、細菌感染に対する腸上皮の反応を調べるためのin vitroモデルとしてよく特徴付けられている。HT-29細胞は成熟した腸管細胞、すなわち腸細胞の特徴を模倣しているため、付着およびメカニズム研究に適している。

この記事では、HT-29細胞株を使用する前に知っておくべき、HT-29細胞株のあらゆる側面をカバーする。主な内容は以下の通りである：

HT-29細胞：起源と一般情報
HT-29細胞株の細胞培養情報
HT-29細胞：利点と限界
HT-29細胞応用例
HT-29細胞に関する研究発表
HT-29細胞のリソース：プロトコール、ビデオ、その他

1.HT-29細胞由来と一般情報

細胞株を使用する前に、その細胞株の一般的な特徴と由来について知っておく必要があります。このセクションは、あなたの学習に役立ちます：HT-29細胞とは何ですか？HT-29は大腸癌細胞株ですか？HT-29細胞の形態は？

HT-29細胞株とは何ですか？ HT-29は1964年にTrempeとFoghによって樹立された大腸腺癌細胞株である。この細胞は元々、大腸腺癌の白人女性（44歳）の原発腫瘍に由来するものであった [1] 。樹立以来、この細胞株は癌の生物学的研究に用いられてきた。

HT-29細胞の形態： HT-29細胞株は一般に上皮様形態を有する。分化した細胞は単層で増殖し、タイトな細胞間結合を形成し、アピカルブラシボーダーを持つ。これらの細胞をグルコース欠乏培地で培養したり、酪酸や酸のような誘導因子を与えると、腸細胞様の特徴を示す。

細胞の大きさ： HT-29大腸癌細胞株の直径は11μmである。

ゲノムと倍数性： HT-29細胞株の染色体数は71本である。68-72の範囲もある。さらに、HT-29細胞の染色体数は超3倍体であり、2S成分が2.4％の割合で存在する。

HT29 MTXとは何ですか？ HT29 MTXは、オリジナルのHT-29ヒト結腸癌細胞株から、10μMのメトトレキセートに適応させることにより単離されたメトトレキセート耐性細胞株である。これらの細胞は粘液を分泌する成熟杯細胞の特徴を示す。

顕微鏡下の大腸癌細胞の分裂と動き。

2.HT-29細胞株の細胞培養情報

細胞株の基本的な培養条件について知っておくと、その細胞株を用いた作業が容易になります。HT-29 細胞株の倍加時間は？HT-29細胞の播種密度は？HT-29細胞用の培地は？

倍加時間	HT-29細胞株の平均倍加時間は24時間です。
接着/懸濁	HT-29は接着性細胞株です。
播種密度	HT-29細胞に推奨される播種密度は3 x¹⁰⁴cells^/cm2である。増殖した細胞は1×PBSで洗浄し、Accutaseで8～10分間インキュベートした後、剥離する。新鮮培地を加え、細胞を遠心する。細胞ペレットを再懸濁し、推奨細胞密度で新しいフラスコに分注する。
増殖培地	2.5mMのL-グルタミンと10%のFBSを添加したEagle's Minimum Essential Medium (EMEM)がHT-29細胞の最適培養に使用される。培地は週に2～3回交換する。
増殖条件	HT-29細胞の増殖には、37℃、5 %_CO2供給の加湿インキュベーターが必要である。
保存	これらの細胞は液体窒素の気相中で-195℃以下で保存される。
凍結培地とプロセス	HT-29細胞株に使用する凍結培地はCM-1またはCM-ACFである。細胞は、1℃の温度低下を引き起こす緩慢凍結プロセスによって凍結され、細胞の生存性を効率的に保護する。
融解プロセス	凍結したHT-29細胞は、37℃に設定したウォーターバスで解凍する。これらの細胞は再懸濁し、新鮮な増殖培地フラスコに直接分注することができる。これとは逆に、融解した細胞を遠心して凍結培地成分を除去し、新鮮培地に再懸濁し、フラスコで培養することもできる。
バイオセーフティーレベル	HT-29細胞株の取り扱いおよび維持には、バイオセーフティレベル1が使用される。

HT-29細胞を10倍および20倍に拡大した。

3.HT-29細胞：利点と限界

どの細胞株にも、他の細胞株とは異なる独自の長所と短所がある。このセクションでは、HT-29細胞に関連する主な利点と限界について説明します。

長所

HT-29細胞の主な利点は以下の通りである：

培養が容易
HT-29細胞株は、培養に複雑な条件を必要とせず、取り扱いや維持が容易である。研究室で広く培養されている。
腸管細胞のin vitroモデル
HT-29細胞は、特定の培養条件下で成熟した腸細胞（腸細胞および粘液産生細胞）に分化することができる。食物の消化と生物学的利用能を研究するための細胞モデルとして使用される。
高いトランスフェクション効率
HT-29結腸癌細胞はトランスフェクション効率が高く、遺伝子発現と制御の研究に適している。一過性のトランスフェクション実験と安定したトランスフェクション実験の両方を、様々な方法を用いて行うことができる。
薬剤感受性
HT-29細胞は、フルオロウラシルやオキサリプラチンのような、大腸癌治療で一般的に使用される化学療法薬に感受性がある。HT-29細胞は薬剤耐性を研究し、大腸癌の潜在的治療薬をスクリーニングするために使用される。

限界

不均一性
HT-29細胞は他の癌細胞株と同様に不均一性を示し、均一な細胞集団を形成しないことがある。このことは、特定のアッセイにおける結果の再現性に影響を与え、実験結果にわずかな差異をもたらす可能性がある。
限られた分化能
HT-29細胞の分化能には限界がある。HT-29細胞は、腸細胞や結腸細胞に完全には分化せず、いくつかの特徴的な特徴を示すのみである。この制限により、より複雑な生物学的プロセスの研究への使用が制限される可能性がある。

4.HT-29細胞応用

HT-29細胞株は、その応用範囲の広さから研究室で広く培養されている。このセクションでは、HT-29細胞の重要な応用例をいくつか取り上げる。

癌研究： HT-29は大腸腺がん細胞株であるため、がんの進行、発生、およびその根底にある分子メカニズムの研究に使用される。2018年に行われた研究では、HT-29細胞株を用いて転移の原因となる細胞分子を調査した。この研究では、ビメンチンとCXCR4遺伝子が細胞転移を制御することが観察された。一方、マイクロRNA-193a-5pミミックをトランスフェクトすると、これらの遺伝子のmRNAレベルを低下させることができ、がん細胞の転移を減少させることに成功した[2]。

毒性研究： HT-29細胞株は毒物学研究に広く用いられている。これらの大腸癌細胞は、様々なアッセイを用いて様々な薬剤候補の毒性を評価するために用いられる。例えば、HT-29細胞株に対する植物Syzygium cuminiエタノール抽出物の毒性ポテンシャルを調べた研究がある。その結果、HT-29細胞の増殖が有意に抑制され、この抽出物の抗がん作用が有望であることが示された [3]。

微生物学： HT-29は、潜在的な微生物、すなわち細菌やウイルスの病原性を調べるための宿主細胞系として使用することができる。研究者は、微生物をHT-29細胞に感染させ、その病原性と宿主応答を調べることができる。このような研究では、乳酸菌のプロバイオティック特性を調べるためにHT-29細胞を用いた [4]。また、バクテリオファージ治療の有効性と安全性を評価するためにHT-29細胞を用いた研究もある [5]。

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5.HT-29細胞に関する研究発表

このセクションでは、HT-29細胞に関する注目すべき論文をいくつかご紹介します。

HT-29大腸細胞株に対するSyzygium cuminiエタノール抽出物の抗がん効果の評価

この研究では、Syzygium cuminiエタノール抽出物が、大腸がん細胞株HT-29に対する潜在的な抗がん剤として提案された。この抽出物は、がん細胞の増殖を有意に抑制した。

テトランドリンはBcl-2/カスパーゼ3/PARP経路およびG1/S期を介して大腸がんHT-29細胞の増殖を阻害する

Bioscience Reports誌に掲載されたこの論文は、HT-29細胞に対するテトラドリンという化合物の抗がん活性を試験したものである。その結果、テトラドリンは細胞のシグナル伝達経路を制御することにより、がん細胞の増殖と成長を阻害することが明らかになった。

miRNA-193a-5pは転移経路の抑制を介してヒトHT-29結腸がん細胞の移動を阻害する

この研究は、miRNA-193a-5pが転移関連遺伝子を制御することにより、HT-29細胞の転移を制御する可能性があることを提唱した。

バクテリオファージは細菌培養よりもヒト細胞を用いた細菌の方が病原性が強い；HT-29細胞からの知見

この論文は2018年にNature Scientific Reportsに掲載された。本研究では、HT-29腫瘍細胞株を腸管細胞モデルとして利用し、提案されたバクテリオファージ治療の有効性を評価した。

乳酸菌のプロバイオティクス特性とCaco-2細胞およびHT-29細胞への腸内病原細菌の接着を阻害する能力

この研究では、研究者らはHT-29細胞を用いて乳酸菌のプロバイオティクス活性を調べた。興味深いことに、乳酸菌は病原性細菌の結腸細胞への接着を阻止することが示された。

6.HT-29細胞リソースプロトコール、ビデオ、その他

このセクションでは、HT-29細胞の維持、培養、トランスフェクションのプロトコルを学ぶのに役立つ、HT-29細胞に関する利用可能なオンラインリソースをいくつか取り上げます。

細胞培養プロトコル

以下のリソースは、HT-29細胞のサブカルチャーについてご案内します。

HT-29細胞の培養 このリンクは、増殖培地、解凍、HT-29細胞のサブカルチャーに関する基本的な知識を提供します。
HT-29培養の維持 この記事には、HT-29細胞の培養と維持に関する全ての有用な情報が含まれています。

トランスフェクション・プロトコール

HT-29細胞株はトランスフェクション効率が高く、遺伝子発現研究において頻繁に使用される。以下のリソースは、これらの細胞に対する可能なトランスフェクションプロトコールについて記述しています。

HT-29のトランスフェクションこのウェブサイトのリンクには、HT-29細胞のトランスフェクションのための詳細なプロトコールが含まれています。
HT-29 細胞株のトランスフェクション：この文書では、プラスミドDNAを用いたHT-29細胞株のトランスフェクションプロトコールについて記述しています。

HT-29細胞株関連ビデオ

この腫瘍性細胞株の培養と維持に関するビデオです。

細胞の継代 このビデオでは、接着性細胞株の細胞継代プロトコールをご紹介します。
HT-29細胞のトランスフェクション このビデオでは、HT-29細胞に使用されるトランスフェクション法についてご案内します。

HT-29細胞株の取り扱いおよび維持管理について、本記事の情報が貴重で十分なものであることを期待しています。HT-29細胞を使用される場合は、弊社までご注文ください。

参考文献

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio,HT29細胞株。The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: p. 113-124.
Shirafkan、N.、他、マイクロRNA-193a-5pは、転移経路の抑制を介してヒトHT-29結腸がん細胞の移動を阻害する。Journal of cellular biochemistry, 2019.120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean, and R. Safaralizadeh,Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line.Journal of gastrointestinal cancer, 2021.52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al.,乳酸菌のプロバイオティクス特性とCaco-2およびHT-29細胞への腸内病原細菌の接着を阻害する能力。プロバイオティクスと抗菌タンパク質、2021年。13: p. 102-112.
Shan, J., et al.,Bacteriophage are more virulent to bacteria with human cells than they are in bacterial culture; insights from HT-29 cells.Scientific reports, 2018.8(1): p. 5091.