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HT-29細胞株

HT-29は、がんおよび毒性学研究において幅広い用途を持つヒト結腸直腸がん細胞株です。例えば、これらの細胞は、結腸直腸がんに対する標準的な化学療法に感受性を示します。 さらに、HT-29細胞株は、細菌感染に対する腸上皮の反応を調査するための、十分に特徴が解明されたin vitroモデルです。HT-29細胞は成熟した腸細胞、すなわち腸上皮細胞の特性を模倣しているため、接着およびメカニズムの研究に適しています。

📋 HT-29細胞株 — 概要
培養培地
製品ページを参照
倍加時間
製品ページを参照
増殖様式
付着性
BSL-1
BSL-1

HT-29細胞：由来と基本情報

細胞株を使用する前に、その一般的な特性と由来について知っておく必要があります。このセクションでは、以下の点について解説します：HT-29細胞とは何か？HT-29は大腸がん細胞株か？HT-29細胞の形態はどのようなものか？

HT-29細胞株とは？HT-29は、1964年にTrempeとFoghによって樹立された大腸腺癌細胞株です。 この細胞は、当初、大腸腺癌を患う白人女性（44歳）の原発腫瘍から樹立されたものです[1]。樹立以来、この細胞株は癌の生物学的研究に用いられてきました。

HT-29細胞の形態：HT-29細胞株は、一般的に上皮様形態を示します。 分化した細胞は単層で増殖し、強固な細胞間結合を形成し、頂端にブラシ境界を形成します。これらの細胞をグルコース欠乏培地で培養したり、酪酸や酸などの誘導物質を与えたりすると、腸細胞様の特徴を示します。

細胞サイズ：HT-29大腸がん細胞株の直径は11 μmである。

ゲノムおよび倍数性：HT-29 細胞株の染色体数のモーダル数は 71 です。68～72 の範囲に及ぶ場合があります。さらに、HT-29 細胞の染色体数は超三倍体であり、2S 成分の発生率は 2.4 % です。

HT29 MTXとは？ HT29 MTXは、10 µMのメトトレキサートへの適応により、元のヒト結腸癌細胞株HT-29から単離されたメトトレキサート耐性細胞株である。これらの細胞は、粘液を分泌する成熟した杯細胞の特徴を示す。

顕微鏡下における大腸がん細胞の分裂と移動。

HT-29細胞株の細胞培養情報

細胞株の基本的な培養条件を把握しておくと、研究作業がスムーズに進みます。以下の点を確認しておきましょう：HT-29細胞株の倍加時間はどれくらいか？HT-29細胞の播種密度は？HT-29細胞にはどのような培地が必要か？

倍加時間

HT-29細胞株の平均倍加時間は24時間です。

付着性／浮遊性

HT-29は接着性細胞株です。 

播種密度

HT-29 細胞に推奨される播種密度は 3 x 104 細胞/cm2 です。増殖した細胞を 1X PBS で洗浄し、Accutase を添加して 8～10 分間インキュベートした後、剥離させます。 新しい培地を加え、細胞を遠心分離します。細胞ペレットを再懸濁し、推奨される細胞密度で新しいフラスコに分配します。

培養液

HT-29 細胞の最適な培養には、2.5 mM L-グルタミンおよび 10 % FBS を添加したイーグル最小必須培地 (EMEM) を使用します。培地は週に 2～3 回交換してください。

培養条件

HT-29 細胞の増殖には、37°C、5 % CO2 供給の加湿インキュベーターが必要です。

保存

これらの細胞は、-195°C以下の液体窒素の気相中で保存されます。  

 

凍結培地および凍結法

HT-29 細胞株に使用される凍結培地は、CM-1 または CM-ACF です。細胞は、温度を 1 °C ずつ下げる緩慢な凍結法によって凍結され、細胞の生存率が効率的に保護されます。

解凍プロセス

凍結した HT-29 細胞は、37°C に設定した水浴で解凍します。これらの細胞は再懸濁し、新しい増殖培地が入ったフラスコに直接分注することができます。 これとは対照的に、解凍した細胞を遠心分離して凍結培地の成分を除去し、新しい培地で再懸濁してフラスコ内で培養することも可能です。

バイオセーフティレベル

HT-29細胞株の取り扱いおよび維持には、バイオセーフティレベル1が適用されます。

Ht 29 cells

10倍および20倍の倍率で観察したHT-29細胞。

HT-29細胞：利点と限界

どの細胞株にも、他の細胞株とは異なる独自の利点と欠点があります。このセクションでは、HT-29細胞に関連する主な利点と限界について解説します。

利点

HT-29細胞の主な利点は以下の通りです：

  • 培養が容易

    HT-29細胞株は取り扱いや維持が容易で、培養に複雑な要件を必要としません。研究機関において広く培養されています。

  • 腸細胞のin vitroモデル

    HT-29細胞は、特定の培養条件下で成熟した腸細胞（腸上皮細胞および粘液産生細胞）へと分化することができます。これらは、食物の消化や生体利用率を研究するための細胞モデルとして利用されています。

  • 高いトランスフェクション効率

    HT-29大腸がん細胞は高いトランスフェクション効率を示し、遺伝子発現および調節の研究に適しています。様々な手法を用いて、一過性および恒常的なトランスフェクション実験を行うことができます。

  • 薬剤感受性

    HT-29細胞は、結腸癌治療で一般的に使用されるフルオロウラシルやオキサリプラチンなどの化学療法薬に対して感受性が高い。これらは、薬剤耐性の研究や、大腸癌に対する潜在的な治療薬のスクリーニングに利用される。

制限事項

  • 不均一性

    HT-29細胞は、他の癌細胞株と同様に不均一性を示し、均一な細胞集団を形成しない場合があります。これは、特定のアッセイにおける結果の再現性に影響を与え、実験結果にわずかなばらつきをもたらす可能性があります。

  • 分化能の制限

    HT-29細胞の分化能は限定的です。腸管細胞や結腸細胞へと完全には分化せず、その特徴をわずかに示すに留まります。この制限により、より複雑な生物学的プロセスの研究における利用が制約される可能性があります。

HT-29細胞：応用

HT-29細胞株は、その幅広い応用可能性から、研究施設で広く培養されている。本節では、HT-29細胞の主要な応用例をいくつか紹介する。

がん研究：HT-29は大腸腺がん細胞株であるため、がんの進行、発症、およびその根底にある分子メカニズムの研究に使用される。2018年に実施された研究では、HT-29細胞株を用いて転移に関与する細胞分子を調査した。 この研究では、ビメンチンおよびCXCR4遺伝子が細胞の転移を調節していることが観察されました。一方、microRNA-193a-5pミミックをトランスフェクトすることで、これらの遺伝子のmRNAレベルを低下させ、がん細胞の転移を効果的に減少させることができました[2]。

毒性学研究：HT-29細胞株は毒性学研究において広く使用されている。これらの結腸直腸癌細胞は、様々なアッセイを用いて異なる薬剤候補の毒性を評価するために用いられる。例えば、ある研究では、植物Syzygium cuminiのエタノール抽出物がHT-29細胞株に及ぼす潜在的な毒性を調査した。 その結果、HT-29細胞の増殖が有意に抑制され、この抽出物に有望な抗がん作用があることが示唆された[3]。

微生物学：HT-29は、潜在的な微生物（すなわち細菌やウイルス）の病原性を調査するための宿主細胞系として使用できる。 研究者は、HT-29細胞に微生物を感染させて、その病原性および宿主の反応を調査することができる。ある研究では、HT-29細胞を用いて乳酸菌のプロバイオティクス特性を調査した [4]。また、別の研究では、HT-29細胞を用いてバクテリオファージ治療の有効性と安全性を評価した [5]。

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内容 1.5 milliliter

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製品番号 300215

5. HT-29細胞に関する研究論文

本節では、研究計画の立案に役立つ、HT-29細胞に関する注目すべき論文をいくつか紹介します。

Syzygium cuminiのエタノール抽出物がHT-29大腸がん細胞株に及ぼす抗がん効果の評価

本研究では、Syzygium cuminiのエタノール抽出物が、大腸がん細胞株HT-29に対する潜在的な抗がん剤となり得ると提案した。この抽出物は、がん細胞の増殖を著しく抑制した。

テトランドリンは、Bcl-2/カスパーゼ3/PARP経路およびG1/S期を介して結腸癌HT-29細胞の増殖を抑制する

『Bioscience Reports』誌に掲載された本論文では、化合物テトランドリンのHT-29細胞に対する抗がん活性を検証した。その結果、テトランドリンが細胞シグナル伝達経路を調節することで、がん細胞の増殖と成長を抑制することが明らかになった。

microRNA-193a-5pは、転移経路の抑制を介してヒトHT-29結腸癌細胞の遊走を阻害する

本研究では、miRNA-193a-5pが転移関連遺伝子を調節することで、HT-29細胞の転移を制御する可能性が示唆された。

バクテリオファージは、細菌培養環境下よりもヒト細胞を有する細菌に対してより強い病原性を示す：HT-29細胞からの知見

本論文は2018年に『Nature Scientific Reports』に掲載された。本研究では、提案されたバクテリオファージ治療の有効性を評価するために、腸管細胞モデルとしてHT-29腫瘍形成細胞株を用いた。

乳酸菌のプロバイオティクス特性およびCaco-2細胞およびHT-29細胞への腸管病原性細菌の付着を抑制する能力

本研究では、研究者らはHT-29細胞を用いて乳酸菌のプロバイオティクス活性を調査した。興味深いことに、この研究は乳酸菌が病原性細菌の大腸細胞への付着を阻止することを示唆している。

HT-29細胞のリソース：プロトコル、動画など

本セクションでは、HT-29細胞の維持、培養、およびトランスフェクションプロトコルの学習に役立つ、オンラインで利用可能なリソースについて解説します。

細胞培養プロトコル

以下のリソースは、HT-29細胞の継代培養に関するガイドとなります。

  • HT-29細胞の培養：このリンクでは、HT-29細胞の培地、解凍、および継代に関する基礎知識を提供します。
  • HT-29 培養の維持：この記事には、HT-29 細胞の培養および維持に関する有用な情報がすべて含まれています。

トランスフェクションプロトコル

HT-29細胞株はトランスフェクション効率が高く、遺伝子発現研究で頻繁に使用されています。以下のリソースでは、これらの細胞に対するトランスフェクションプロトコルについて解説しています。

HT-29細胞株に関する動画

この腫瘍形成性細胞株の培養および維持管理に関する動画をいくつかご紹介します。

この記事の情報が、HT-29細胞株の取り扱いおよび維持管理を行う上で、有益かつ十分なものであることを期待しています。研究でHT-29細胞を使用する予定がある場合は、弊社よりご注文ください。

参考文献

  1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio, HT29 cell line. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: p. 113-124.
  2. Shirafkan, N., et al., microRNA‐193a‐5p inhibits migration of human HT‐29 colon cancer cells via suppression of metastasis pathway. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
  3. Khodavirdipour, A., R. Zarean、および R. Safaralizadeh、HT-29大腸がん細胞株に対するSyzygium cuminiエタノール抽出物の抗がん効果の評価。Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
  4. Fonseca, H.C. 他, 乳酸菌のプロバイオティクス特性およびCaco-2およびHT-29細胞への腸管病原性細菌の付着を阻害する能力. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: p. 102-112.
  5. Shan, J. 他, バクテリオファージは、細菌培養下よりもヒト細胞が存在する環境下で細菌に対してより強い病原性を示す；HT-29細胞からの知見. Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5091.

 

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