Sel U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP

€800,00*

Produk dikirim dalam keadaan beku menggunakan es kering dalam tabung kriogenik. Setiap tabung kriogenik biasanya mengandung 3 × 10^⁶ sel untuk garis sel yang melekat atau 5 × 10^⁶ sel untuk garis sel suspensi (lihat sertifikat analisis batch untuk detailnya).

Harga belum termasuk pajak ditambah biaya pengiriman

cryovial

Nomor produk: 300174

Lembar data keselamatan

Lembar produk

Sertifikat Analisis (CoA)

Perjanjian Pihak Ketiga

Deskripsi	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP adalah garis sel yang dimodifikasi secara genetik yang berasal dari garis induk osteosarkoma U-2 OS manusia. Garis sel ini menggabungkan penyisipan yang ditargetkan dari tag monomer Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP) pada lokus gen NUP96, yang dicapai melalui teknologi penyuntingan gen CRISPR-Cas9. NUP96, bagian dari kompleks pori nuklir, sangat penting untuk transportasi nuklir, dan penggabungannya dengan mEGFP memungkinkan visualisasi waktu nyata dinamika pori nuklir di bawah mikroskop fluoresen, memberikan wawasan yang berharga ke dalam mekanisme transportasi nuklir dan perdagangan nukleositoplasma. Klon spesifik ini, bernomor 195, telah dipilih karena ekspresi protein fusi NUP96-mEGFP yang stabil dan mempertahankan karakteristik khas garis keturunan U-2 OS, termasuk struktur sitoskeletal yang kuat yang sangat penting dalam penelitian yang berkaitan dengan migrasi dan metastasis sel kanker. Penerapan teknologi CRISPR memastikan pengeditan gen yang tepat, meminimalkan efek tidak tepat sasaran yang dapat membahayakan integritas hasil eksperimen. Hal ini membuat klon U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP no.195 sangat berguna untuk teknik pencitraan resolusi tinggi dan studi arsitektur seluler yang terperinci, membantu penelitian lanjutan dalam biologi seluler, penelitian kanker, dan fenomena transportasi nuklir.
Organisme	Manusia
Jaringan	Tulang
Penyakit	Osteosarkoma

Usia	15 tahun
Jenis Kelamin	Perempuan
Etnis	Kaukasia
Morfologi	Seperti epitel
Sifat pertumbuhan	Patuh

Kutipan	Klone U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP nomor 195 (Nomor katalog Cytion 300174)
Tingkat keamanan hayati	1
NCBI_TaxID	9606
Aksesi Cellosaurus	CVCL_B7FJ
Deposan	Laboratorium Ellenberg (Ellenberg Lab) (EMBL)
Status transgenik	GMO-S1: Garis sel osteosarkoma manusia ini (U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP, klon 195) mengandung fusi NUP96-mEGFP hasil rekayasa CRISPR yang diperkenalkan melalui pengiriman lentiviral, yang memungkinkan pelacakan neon kompleks pori nuklir. Modifikasi ini terintegrasi secara stabil. Klasifikasi ini hanya berlaku di Jerman dan mungkin berbeda di tempat lain.

Ekspresi protein	MEGFP (protein kompleks pori nuklir 96, bertanda mEGFP)

Media Kultur	McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukosa, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natrium piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820200a)
Suplemen	Lengkapi media dengan 10% FBS, 1% NEAA
Reagen Disosiasi	Accutase
Subkultur	Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penyemaian	2 hingga 3 x 10^⁴ sel/cm^²
Pembaruan cairan	2 hingga 3 kali per minggu
Media pembekuan	Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Pencairan dan Kultur Sel	Pastikan botol tetap dalam keadaan beku pada saat pengiriman, karena sel dikirim dengan es kering untuk mempertahankan suhu optimal selama perjalanan. Setelah diterima, segera simpan cryovial pada suhu di bawah -150°C untuk memastikan pelestarian integritas sel, atau lanjutkan ke langkah 3 jika kultur segera diperlukan. Untuk kultur segera, segera cairkan botol dengan merendamnya dalam penangas air bersuhu 37°C dengan air bersih dan agen antimikroba, aduk perlahan selama 40-60 detik hingga gumpalan es kecil tetap ada. Lakukan semua langkah selanjutnya dalam kondisi steril di dalam tudung alir, desinfektan kriovial dengan etanol 70% sebelum dibuka. Buka botol yang telah didesinfeksi dengan hati-hati dan pindahkan suspensi sel ke dalam tabung sentrifugasi 15 ml yang berisi 8 ml media kultur suhu kamar, aduk perlahan. Sentrifus campuran pada 300 x g selama 3 menit untuk memisahkan sel dan dengan hati-hati membuang supernatan yang mengandung sisa media pembekuan. Resuspensi pelet sel dengan hati-hati dalam 10 ml medium kultur segar. Untuk sel yang melekat, bagi suspensi di antara dua labu kultur T25; untuk kultur suspensi, pindahkan semua media ke dalam satu labu T25 untuk mendorong interaksi dan pertumbuhan sel yang efektif. Patuhi protokol subkultur yang telah ditetapkan untuk pertumbuhan dan pemeliharaan garis sel yang berkelanjutan, memastikan hasil eksperimental yang andal.
Suasana Inkubasi	37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.
Pelapisan Labu	Untuk perlekatan dan kelangsungan hidup yang optimal setelah pencairan, kami sarankan untuk menggunakan labu atau pelat berlapis kolagen.
Prosedur Pembekuan	Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
Ketentuan Pengiriman	Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
Kondisi Penyimpanan	Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Kemandulan	Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran. Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Nomor Lot	Jenis Sertifikat	Tanggal	Nomor Katalog
300174-151124	Sertifikat Analisis	23. May. 2025	300174
300174-130226	Sertifikat Analisis	13. Mar. 2026	300174
300174-322	Sertifikat Analisis	23. May. 2025	300174

Harap diperhatikan bahwa jalur sel ini tidak tersedia di bawah Cytion MTA standar, karena memerlukan perjanjian pihak ketiga dan/atau tunduk pada negosiasi dengan pemberi lisensi asli.

Didukung oleh Bioz Lihat detail lebih lanjut tentang Bioz

Sel U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP

Informasi umum

Karakteristik

Data Peraturan

Data Biomolekuler

Penanganan

Kontrol kualitas / Profil genetik / HLA

Sertifikat Analisis (CoA)

Perjanjian Pihak Ketiga