Cellules HEK293A
Informations générales
Description | La lignée cellulaire HEK293A, dérivée des cellules de rein embryonnaire humain 293 (HEK293), représente un outil spécialisé dans la recherche virologique et la thérapie génique, en particulier dans la production, l'amplification et le titrage d'adénovirus incompétents pour la réplication. Ces cellules présentent une morphologie plate qui facilite considérablement l'examen microscopique et les processus de titrage, ce qui simplifie le comptage et l'évaluation des particules virales. Une caractéristique essentielle de la lignée cellulaire HEK293A est l'intégration stable du gène E1 de l'adénovirus dans son génome. Cette intégration est cruciale car elle fournit la machinerie transcriptionnelle nécessaire à l'expression des protéines E1, en particulier E1a et E1b. La présence de ces protéines est essentielle pour la réplication des vecteurs adénoviraux dans la cellule. La protéine E1a a pour fonction principale d'activer la transcription du génome de l'adénovirus, tandis que les protéines E1b sont impliquées dans la réplication virale et la perturbation du cycle cellulaire. L'utilité des cellules HEK293A va au-delà du simple soutien à la réplication virale. Ces cellules facilitent la production efficace de préparations virales à titre élevé et de haute qualité, essentielles à la fois pour la recherche fondamentale et les applications thérapeutiques. La capacité de réplication robuste de la lignée cellulaire et sa facilité de manipulation permettent aux chercheurs de cribler et de développer des constructions adénovirales avec une précision et une efficacité sans précédent. En résumé, la lignée cellulaire HEK293A est une ressource indispensable dans le domaine de la virologie et de la thérapie génique. Sa capacité à exprimer de manière stable les protéines E1 et à supporter la réplication adénovirale en fait un outil précieux pour les chercheurs qui souhaitent produire et manipuler des vecteurs adénoviraux. Les caractéristiques de la lignée cellulaire permettent de générer efficacement des vecteurs viraux, ce qui est essentiel pour faire avancer la recherche et les interventions thérapeutiques potentielles. |
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Organisme | Humain |
Tissus | Rein embryonnaire |
Synonymes | HEK-293A, HEK293A, HEK 293A, HEK293-A, QBI-HEK 293A, QBI-293A |
Caractéristiques
L'âge | Fœtus |
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Genre | Femme |
Morphologie | Épithéliale |
Propriétés de croissance | Adhérent |
Identifiants / Biosécurité / Citation
Citation | 293A (numéro de catalogue Cytion 305070) |
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Niveau de biosécurité | 1 |
Expression / Mutation
Manipulation
Milieu de culture | EMEM, w : 2 mM L-Glutamine, w : 1.5 g/L NaHCO3, w : EBSS, w : 1 mM Sodium pyruvate, w : NEAA (numéro d'article Cytion 820100c) |
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Suppléments moyens | Compléter le milieu avec 10% de FBS |
Solution de passage | Accutase |
Sous-culture | Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais. |
Taux de fractionnement | 1:3 à 1:5 |
Renouvellement des fluides | 2 à 3 fois par semaine |
Congélation du milieu | CM-1 (numéro de catalogue Cytion 800100) ou CM-ACF (numéro de catalogue Cytion 806100) |
Manipulation des cultures cryoconservées |
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Contrôle de qualité / Profil génétique / HLA
Stérilité | La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence. Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes. |
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Profil STR |
Amélogénine: x,x
CSF1PO: 12,12
D13S317: 12,14
D16S539: 9,13
D5S818: 8,8
D7S820: 11,12
TH01: 7,9.3
TPOX: 11,11
vWA: 16,19
D3S1358: 15,17
D21S11: 28,30.2
D18S51: 17,18
Penta E: 7,15
Penta D: 9,10
D8S1179: 12,12
FGA: 23,23
D6S1043: 11,11
D2S1338: 19,19
D12S391: 19,21
D19S433: 15,18
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