PIEC-solut
Yleisiä tietoja
| Kuvaus | PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) on spontaanisti ikuistettu endoteelisolulinja, joka on peräisin nuoren sian suoliluun valtimon endoteelista. Solulinja osoittaa tyypillistä mukulakivimorfologiaa kasvaessaan konfluenssiin ja muodostaa tarttuvia monokerroksia tavallisissa viljelyolosuhteissa. PIEC-solut säilyttävät keskeiset endoteelisolut ominaisuudet, kuten kontaktin eston, endoteelimarkkerien, kuten von Willebrandin tekijän (vWF), ilmentymisen ja kyvyn muodostaa kapillaarimaisia rakenteita sopivissa in vitro -määrityksissä. Verisuonten alkuperänsä vuoksi PIEC-soluja käytetään laajalti mallina sian endoteelisolujen biologian ja isäntä-patogeenin vuorovaikutusten tutkimuksessa. Toiminnallisesti PIEC-solut osoittavat makrovaskulaaristen endoteelisolujen ominaisuuksia, mukaan lukien reagointikyky tulehdusärsykkeisiin ja kyky ilmentää leukosyyttien rekrytointiin osallistuvia adheesiomolekyylejä. Niitä on käytetty laajasti virologisessa tutkimuksessa, erityisesti sianvirusten, kuten klassisen sikaruton viruksen (CSFV), afrikkalaisen sikaruton viruksen (ASFV) ja sian lisääntymis- ja hengitystiesyndrooman viruksen (PRRSV), lisääntymiseen ja tutkimiseen. Niiden suuri alttius tietyille virusinfektioille ja vakaat kasvuominaisuudet tekevät niistä arvokkaan in vitro -järjestelmän virusreplikaatiotutkimuksiin, antiviraaliseen seulontaan ja rokotetutkimukseen. Tartuntatautien sovellusten lisäksi PIEC-solut toimivat merkittävänä suurten eläinten endoteelimallina verisuonten estefunktion, endoteelin aktivaation, angiogeneesin ja tulehdussignaalireittien tutkimuksessa. Sioista peräisin olevana endoteelisolulinjana PIEC-solut tarjoavat translaationaalista merkitystä vertailukelpoisessa sydän- ja verisuonitutkimuksessa sekä prekliinisissä tutkimuksissa, joissa sian malleja käytetään yleisesti. |
|---|---|
| Organismi | Sika |
| Kudos | Verisuonten endoteeli |
Ominaisuudet
| Morfologia | Epiteeli |
|---|---|
| Kasvuominaisuudet | Tarttuva |
Sääntelytiedot
| Viittaus | PIEC (Cytionin luettelonumero 305213) |
|---|---|
| Bioturvallisuustaso | 1 |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| CellosaurusLiittyminen | CVCL_C0W5 |
Biomolekyylitiedot
Käsittely
| Viljelyalusta | RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a) |
|---|---|
| Lisäravinteet | Täydennetään elatusainetta lämpöinaktivoidulla 10 %:lla FBS:llä |
| Dissosiaatioreagenssi | Accutase |
| Alakulttuuri | Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreessa väliaineessa ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita. |
| Jakosuhde | 1:2 – 1:4 |
| Nesteen uusiminen | 2-3 kertaa viikossa |
| Jäädytä väliaine | Käytä kryosäilytysmediana täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden saavuttamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotektantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryon aiheuttamaa stressiä. |
| Solujen sulattaminen ja viljely |
|
| Inkubaatioilmapiiri | 37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä. |
| Pullon pinnoite | Optimaalisen kiinnittymisen ja elinkelpoisuuden saavuttamiseksi sulatuksen jälkeen suosittelemme kollageenipinnoitettujen pullojen tai levyjen käyttöä. |
| Jäädytysmenettely | Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon. |
| Toimitusehdot | Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon. |
| Varastointiolosuhteet | Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen. |
Laadunvalvonta / Geneettinen profiili / HLA
| Steriliteetti | Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä. Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti. |
|---|
Analyysitodistus (CoA)
| Erän numero | Todistuksen tyyppi | Päivämäärä | Luettelonumero |
|---|---|---|---|
| 305213-070524 | Analyysitodistus | 23. May. 2025 | 305213 |
Materiaalin siirtosopimus
Jos aiot käyttää Cytion-solulinjoja yksinomaan sisäiseen tutkimukseen yhdellä tutkimuspaikalla, täytä ja allekirjoita materiaalinsiirtosopimus (MTA) ja lähetä se tilauksesi mukana.
Kaikissa kaupallisissa sovelluksissa – mukaan lukien mutta ei rajoittuen maksullisiin palveluihin, laadunvalvontatestaukseen, tuotteiden julkaisemiseen, diagnostiseen käyttöön tai sääntelytutkimuksiin – täytä käyttötarkoituksen lomake, jotta voimme laatia projektiisi sopivan sopimuksen.
Huomaa: MTA koskee vain tiettyjä solulinjoja. Jos tämä ilmoitus ja MTA-asiakirja näkyvät tuotesivulla, sopimus on voimassa. Solulinjoille, joita MTA ei koske, sopimusta ei mainita. MTA ei ole voimassa asiakkaille Amerikassa, Kiinassa tai Taiwanissa. Ota yhteyttä Yhdysvaltain yksikköömme saadaksesi sopivan sopimuksen.