MM.1S-Luc-solut

Esittelyssä on Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, joka on Ham's F-12 -mediumin erikoismodifikaatio, joka on suunniteltu vastaamaan biologisen tutkimuksen ainutlaatuisia vaatimuksia. Tämä kehittynyt väliaine tarjoaa selviä etuja, sillä se tehostaa ihmisen primaaristen hepatosyyttien sekä rotan ja kanan maksasolujen viljelyä erityisesti vähennetyssä seerumipitoisuudessa.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium on huolellisesti muotoiltu soluviljelyolosuhteiden optimoimiseksi. Sen koostumus on rikastettu, ja se sisältää runsaasti välttämättömiä komponentteja, kuten aminohappoja ja natriumpyruvaattia, sekä lisäaineita, kuten putressiiniä, tymidiiniä, hypoksantiiniä ja sinkkiä. Näiden lisäysten avulla tutkijat voivat täydentää väliaineen minimaalisella seerumilla tai tietyille solutyypeille määritellyillä komponenteilla, mikä helpottaa täsmällisten koeolosuhteiden luomista.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ei sisällä proteiineja eikä kasvutekijöitä. Näin ollen kasvutekijöillä ja naudan sikiöseerumilla (FBS) täydentäminen on usein tarpeen, jolloin tutkijat voivat räätälöidä väliaineen tiettyjen solulinjojensa vaatimusten mukaiseksi. Optimaalisen suorituskyvyn saavuttamiseksi FBS:n pitoisuus on optimoitava huolellisesti kullekin solulinjalle, jotta varmistetaan optimaalinen kasvu ja toimivuus.

Fysiologisen pH:n ylläpitämiseksi Ham's F-12K (Kaighn's) -mediumissa käytetään natriumbikarbonaattipuskurijärjestelmää (2,5 g/l), mikä edellyttää kontrolloitua 5-10 %:n hiilidioksidipitoisuutta viljelyn aikana. Näin varmistetaan, että väliaineen pH pysyy solujen kasvun ja elinkelpoisuuden kannalta ihanteellisella alueella
Laadunvalvonta

pH = 7,2 +/
- 0,02 20-25 °C:ssa.
Jokainen erä on testattu steriiliyden sekä mykoplasman ja bakteerien puuttumisen varalta.

Ylläpito

Säilytetään jääkaapissa +2°C
- +8°C:ssa pimeässä. Pakastaminen sekä lämmittäminen +37°C:seen asti vähentävät tuotteen laatua.
Älä lämmitä elatusainetta yli 37°C:een tai käytä hallitsemattomia lämmönlähteitä (esim. mikroaaltolaitteita).
Jos vain osa väliaineesta halutaan käyttää, poista tämä määrä pullosta ja lämmitä se huoneenlämmössä.
Kaikkien väliaineiden paitsi perusmediumin säilyvyysaika on 8 viikkoa valmistuspäivästä.

Koostumus




Ainesosat
mg/l


Epäorgaaniset suolat
Kalsiumkloridi x 2H2O
135,24



Kupari(II)sulfaatti x 5H2O
0,00



Rauta(II)sulfaatti x 7H2O
0,83



Magnesiumkloridi x 6H2O
105,72



Magnesiumsulfaatti x 7H2O
394,49



Kaliumkloridi
283,29



Kaliumdivetyfosfaatti
58,52



Natriumkloridi
7597,20



dinatriumvetyfosfaattivedetön
115,02



Sinkkisulfaatti x 7H2O
0,14


Muut aineosat
D(+)-glukoosi vedetön
1260,00



Hypoksantiini
4,08



DL-α-Lipoiinihappo
0,21



Fenolipunainen
3,00



Putressiini x 2HCl
0,32



Natriumpyruvaatti
220,00



NaHCO3
2500,00



Tymidiini
0,73


Aminohapot
L-alaniini
17,82



L-arginiini x HCl
421,40



L-asparagiini x H2O
30,02



L-asparagiinihappo
26,62



L-kysteiini x HCl x H2O
70,24



L-Glutamiini
292,20



L-glutamiinihappo
29,42



Glysiini
15,01



L-histidiini x HCl x H2O
41,92



L-isoleusiini
7,87



L-leusiini
26,24



L-lysiini x HCl
73,04



L-metioniini
8,95



L-Fenyylialaniini
9,91



L-proliini
69,06



L-Seriini
21,02



L-treoniini
23,82



L-tryptofaani
4,08



L-tyrosiini
10,87



L-valiini
23,42


Vitamiinit
D(+)-Biotiini
0,07



D-kalsiumpantotenaatti
0,48



Koliinikloridi
13,96



Foolihappo
1,32



myo-Inositoli
18,02



Nikotiiniamidi
0,04



Pyridoksiini x HCl
0,06



Riboflaviini
0,04



Tiamiini x HCl
0,34



B12-vitamiini
1,36

Accutase-solujen irrotusliuos, sisältää EDTA:ta ja fenolipunaväriainetta – 100 ml

Accutase on käyttövalmis, steriilisti suodatettu solujen irrotusliuos, joka on suunniteltu hellävaraiseksi vaihtoehdoksi trypsiinille/EDTA:lle kiinnittyneiden nisäkässolujen irrottamiseksi tavallisista kudosviljelymuovivälineistä ja tarttuviksi pinnoitetuista pinnoista. Se yhdistää proteolyyttisen ja kollageenolyyttisen entsyymiaktiivisuuden tasapainotetussa suolaliuoksessa tehokkaan mutta hallitun irrottamisen aikaansaamiseksi, säilyttäen solupinnan proteiinit ja tukien korkeaa elinkelpoisuutta siirron jälkeen sekä nopeaa uudelleenkiinnittymistä.

Accutase-valmiste perustuu Dulbeccon fosfaattipuskuroituun suolaliuokseen (DPBS), jossa on EDTA:ta ja fenolipunainen visuaalisena pH-indikaattorina. Entsyymit ovat peräisin muista kuin nisäkkäistä tai bakteereista, minkä vuoksi Accutase sopii erityisen hyvin kantasolututkimukseen, rokotetyönkulkuihin ja muihin sovelluksiin, joissa eläin
- tai mikrobiperäisten kontaminanttien määrä on minimoitava. Liuos estää itsensä 37 °C:ssa, joten irrottamisen jälkeen ei tarvita neutraloivia reagensseja tai seerumia sisältävää elatusainetta – solut voidaan siirtää suoraan tuoreeseen elatusaineeseen.

Tärkeimmät ominaisuudet

Käyttövalmis 1x steriilisuodatettu neste – laimentamista tai rekonstituointia ei tarvita
Yhdistetty proteolyyttinen ja kollageenolyyttinen entsyymiaktiivisuus hellävaraista irrottamista varten
Jokainen erä on standardoitu määriteltyyn irrottamisaktiivisuuteen eräkohtaisen yhdenmukaisuuden varmistamiseksi
Entsyymit eivät ole peräisin nisäkkäistä tai bakteereista
Inhiboi itsensä 37 °C:ssa – neutralointiliuosta ei tarvita
Valmistettu Dulbeccon PBS:ssä EDTA:n kanssa
Sisältää fenolipunaisen visuaalisena pH-indikaattorina
pH 6,8–7,8


Tyypillisiä käyttökohteita
Accutase irrottaa hellävaraisesti monenlaisia kiinnittyneitä ja herkkiä solutyyppejä, mukaan lukien ihmisen alkion kantasolut (hESCs), ihmisen indusoidut pluripotentit kantasolut (iPSCs), hermoston kantasolut, primaariset neuronit sekä rutiinikäytössä olevat kiinnittyneet solulinjat, kuten HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ja A549. Tyypillisiä käyttötapauksia ovat:

Adheesiivisten nisäkässolujen rutiininen aliviljely ja siirto
HES-solujen, iPS-solujen ja muiden herkkien solulinjojen hellävarainen yksittäisten solujen irrottaminen
Näytteiden valmistelu virtaussytometriaa ja FACS-analyysiä varten
Solupintamarkkerien analysointi, jossa epitopin eheys on tärkeää
Solujen migraatio-, proliferaatio
- ja apoptoosimääritykset
Lepotilan määritykset seerumin puutteella ja onkogeenien transfektiotutkimukset
Kasvainsolujen ja hermostopäällysteen solujen migraatiomääritykset
Tuotannon laajentaminen bioreaktoriprosesseissa

Rutiinityössä levitä noin 10 ml Accutasea 75 cm2:n viljelypinta-alaa kohti ja inkuboi 5–10 minuuttia huoneenlämmössä. Optimaalinen inkubointiaika on määritettävä kullekin solulinjalle erikseen, eikä se saa ylittää yhtä tuntia. Ennen lisäystä huuhtele solukerros Ca2+/Mg2+-vapaalla suolaliuoksella, kuten kalsiumia ja magnesiumia sisältämättömällä DPBS:llä, jotta poistat jäljellä olevan seerumin ja kaksiarvoiset kationit.

Käsittely ja säilytys
Säilytä avaamatonta pulloa pakastettuna -15 °C:ssa tai sitä alemmassa lämpötilassa. Sulata joko huoneenlämmössä tai yön yli +2 °C:ssa – +8 °C:ssa. Älä sulata Accutasea 37 °C:n vesihauteessa, sillä korkeat lämpötilat heikentävät entsyymiaktiivisuutta. Sulatuksen jälkeen liuosta voidaan säilyttää enintään 2 kuukautta +2 °C:ssa – +8 °C:ssa; älä säilytä huoneenlämmössä. Älä lämmitä reagenssia 37 °C:seen ennen käyttöä – lisää se suoraan pestyihin soluihin huoneenlämmössä. Pitkän säilyvyyden takaamiseksi suositellaan kertakäyttöisten alikvojen käyttöä, jotta vältytään toistuvilta sulatusjaksoilta. Työskentele aina aseptisissa olosuhteissa.

Laatu
Valmistettu tiukkojen laatustandardien mukaisesti. Jokainen Accutase-erä on steriilisuodatettu ja testattu steriilisyyden, pH:n, ulkonäön ja dissosiaatioaktiivisuuden osalta, jotta varmistetaan erästä toiseen yhdenmukainen ja toistettava suorituskyky.

Tuotetiedot



Tekniset tiedot
Yksityiskohdat



TuotetyyppiSolujen irrottamis-/dissosiaatioreagenssi
MuotoSteriilisuodatettu neste, käyttövalmis
Tilavuus100 ml
Käyttökonsentraatio1x (käyttövalmis)
EntsyymiaktiivisuusYhdistetty proteolyyttinen ja kollageenolyyttinen
Entsyymin alkuperäEi-nisäkäs
- ja ei-bakteeriperäinen
PuskurijärjestelmäDulbeccon PBS ja EDTA
pH-indikaattoriFenolipunainen
pH-alue6,8 – 7,8
UlkonäköKirkas, vaaleanpunainen tai oranssi liuos
Säilytyslämpötila-15 °C tai alle
Stabiilius sulatuksen jälkeenEnintään 2 kuukautta +2 °C – +8 °C:ssa
Suositeltu käyttömäärä~10 ml / 75 cm² viljelypintaa
Tyypillinen inkubointiaika5–10 minuuttia huoneenlämmössä
KuljetusolosuhteetPakastettu kuivajäällä
KäyttötarkoitusVain tutkimuskäyttöön ja jatkovalmistukseen



Koostumus (koostumus litraa kohti)



Komponentti
Pitoisuus (mg/l)




Epäorgaaniset suolat

Natriumkloridi (NaCl)8000,00
Dinatriumvetyfosfaatti (Na2HPO4)1150,00
Kaliumkloridi (KCl)200,00
Kaliumdihydrogeenifosfaatti (KH2PO4)200,00

Muut komponentit

EDTA · 4Na (tetranatrium-EDTA)220,00
Fenolipunainen3,00
Patentoitu entsyymiseos (proteolyyttinen ja kollageenolyyttinen aktiivisuus)1x



Accutase on Innovative Cell Technologies, Inc:n rekisteröity tavaramerkki.

Cytionin Freeze Medium CM-1 on huipputekninen kryosäilytysmedium, joka on suunniteltu varmistamaan solujen elinkelpoisuuden ja toimivuuden korkein mahdollinen taso sulatuksen jälkeen. Tämä monipuolinen väliaine soveltuu monille eri solutyypeille, mukaan lukien ihmis
- ja eläinsolut, mikä tekee siitä välttämättömän työkalun erilaisiin tutkimussovelluksiin. Freeze Medium CM-1 on koostettu huolellisesti tasapainotetusta yhdistelmästä kryosuojakemikaaleja ja välttämättömiä ravintoaineita, ja se minimoi jääkiteiden muodostumisen ja solustressin jäädytysprosessin aikana, jolloin solujen eheys säilyy.
Freeze Medium CM-1:n tärkeimpiä ominaisuuksia ovat mm:

Laaja yhteensopivuus: Tehokas monenlaisille solutyypeille, mukaan lukien primaarisolut, kantasolut ja vakiintuneet solulinjat.
Korkea elinkelpoisuus: Optimoitu maksimoimaan solujen palautuminen ja elinkelpoisuus sulatuksen jälkeen, mikä takaa luotettavat koetulokset.
Käyttövalmis: Kätevästi valmisteltu ja steriloitu välitöntä käyttöä varten, mikä vähentää valmisteluaikaa ja kontaminaatioriskiä.
Parannettu stabiilisuus: Säilyttää tasaisen suorituskyvyn tavanomaisissa kryosäilytysolosuhteissa, mikä takaa toistettavat tulokset.
Pitkä säilyvyysaika: CM-1 on seerumia sisältävä, käyttövalmis kryosäilytysmedia, jota voidaan säilyttää jääkaapissa jopa vuoden ajan.


CM-1:n käyttö solujen pakastamiseen

Jos haluat käyttää CM-1:tä sekä adheesiosolujen että suspensiosolujen jäädyttämiseen, toimi seuraavasti

Adheesiosolut pestään ja irrotetaan viljelyalustasta. Jos kyseessä ovat suspensiosolut, siirry suoraan seuraavaan vaiheeseen.
Laske solut varmistaaksesi, että niiden pitoisuus on oikea.
Sentrifugoi solut pelletiksi ja suspendoi ne uudelleen CM-1-pakastusmediumiin.
Siirretään resuspendoidut solut kryopulloihin.
Käytä hidasta pakastusmenetelmää ennen solujen siirtämistä pitkäaikaissäilytykseen





Menetelmä
Kuvaus
Vaiheet





❄️
Manuaalinen jäädytys

Vaiheittainen menetelmä, jossa lämpötilaa alennetaan asteittain solujen elinkelpoisuuden varmistamiseksi

1️⃣ Aseta solut pakastusmediumiin 4 °C:n pakastimeen 40 minuutiksi.
2️⃣ Siirretään -80 °C:n pakastimeen 24 tunniksi.
3️⃣ Säilytä solut nestemäisessä typessä pitkäaikaissäilytystä varten



❄️
Mr. Frostyn käyttäminen

Kätevä laite, joka mahdollistaa hallitun pakastusnopeuden ilman sähkövirtaa

1️⃣ Valmistele solut kryopulloihin pakastusmediumilla.
2️⃣ Aseta kryopullot Mr. Frosty -astiaan.
3️⃣ Säilytä -80 °C:ssa 24 tuntia ennen siirtämistä nestemäiseen typpeen



❄️
Pakastin, jonka nopeus on säädetty

Thermo Fisherin tai muiden valmistajien korkean tarkkuuden pakastin, joka on suunniteltu lämpötilan hallittuun alentamiseen

1️⃣ Ohjelmoi laite alentamaan lämpötilaa asteittain.
2️⃣ Aseta valmistetut solut pakastimeen.
3️⃣ Siirrä solut pakastussyklin jälkeen nestemäiseen typpeen









Säilytä kryopullot alle -130 °C:n lämpötilassa tai nestemäisessä typessä pitkäaikaissäilytystä varten.


Ainesosat

Sisältää FBS:ää, DMSO:ta, glukoosia, suoloja
Puskurikyky: pH = 7,2-7,6


Cytionin Freeze Medium CM-1 tarjoaa luotettavan ratkaisun kryosäilytykseen, joka takaa solujen korkean elinkelpoisuuden ja toimivuuden sulatuksen jälkeen monenlaisissa tutkimussovelluksissa.

Tuotteen yleiskatsaus
Tilavuus: 100 ml Säilytys: ≤-15°C Steriliteetti: Steriili suodatettu
Antibiootti-/antimykoottiliuos (100x) on steriili, käyttövalmis konsentraatti, joka on suunniteltu vähentämään mikrobikontaminaatioriskiä soluviljelyssä ja siihen liittyvissä laboratoriosovelluksissa. Tämä 100x-liuos sisältää vakiintuneen yhdistelmän penisilliiniä, streptomysiiniä ja amfoterisiini B:tä, joka tarjoaa laajakirjoisen antimikrobisen aktiivisuuden grampositiivisia ja gramnegatiivisia bakteereja, hiivoja ja säikeisiä sieniä vastaan. Valmiste soveltuu käytettäväksi eukaryoottisissa soluviljelmissä, bakteerialustoissa ja muissa kontaminaatioherkissä järjestelmissä, mikä tukee puhtaita ja johdonmukaisia laboratoriotoimintoja.
Käyttö ja hyödyt Rutiininomaisiin tutkimusprotokolliin optimoitua liuosta käytetään laajalti aseptisten olosuhteiden ylläpitämiseen soluviljelytyöprosesseissa. Se tarjoaa luotettavan suorituskyvyn kontaminaatioherkissä ympäristöissä ja auttaa tutkijoita vähentämään mikrobien liikakasvun riskiä vaarantamatta solujen terveyttä tai kokeiden toistettavuutta. Steriilisuodatettu koostumus poistaa tarpeen ylimääräisille liuotusvaiheille, mikä tukee virtaviivaista väliaineen valmistusta ja vähentää vaihtelua päivittäisissä laboratoriomenetelmissä.
Käyttö ja yhteensopivuus Saavuttaaksesi vakiotyöpitoisuudet laimenna liuos 1:100 täydelliseen kasvatusalustaan. Tuote on yhteensopiva monenlaisten nisäkässolulinjojen ja perusmedioiden kanssa. Jatkuvan varastosaatavuuden ansiosta tutkijat hyötyvät toimitusten luotettavasta jatkuvuudesta ja logistiikkasuunnittelun yksinkertaistamisesta. Liuos on säilytettävä ≤ -15 °C:ssa ja suojattava toistuvilta jäädytys-sulatussykleiltä stabiilisuuden säilyttämiseksi. Vain tutkimuskäyttöön. Ei käytettäväksi diagnostisissa tai terapeuttisissa toimenpiteissä. Ei käytettäväksi ihmisillä tai eläimillä.