THP-1-Zellen
















Wesentliche Fakten über THP-1-Zellen
Beschreibung | THP1-Zellen, eine spontan immortalisierte monozytenähnliche Zelllinie, die aus dem peripheren Blut eines einjährigen Patienten mit monozytärer Leukämie stammt, dienen als wichtiges Modell in der Immunologie und Krebsforschung. Die THP-1-Monozyten-Zelllinie, die für ihre Fähigkeit bekannt ist, sich in reife Makrophagen und dendritische Zellen zu differenzieren, ist von wesentlicher Bedeutung für die Untersuchung der Funktionen und Eigenschaften dieser Immunzellen in vitro, einschließlich der Makrophagen des Fettgewebes und der mononukleären Phagozyten M2. Differenzierte THP-1-Makrophagen sind für die Erforschung von Monozyten- und Makrophagenfunktionen, Mechanismen und Signalwegen, einschließlich Zytokinaktivierung und Immunmodulation, sowie für die Untersuchung des Nährstoff- und Medikamententransports von entscheidender Bedeutung. Darüber hinaus können THP-1-Makrophagen in M1- oder M2-Makrophagen polarisiert werden, was für Studien über Immunität und Entzündung, angeborene Immunität und Entzündungsreaktionen von entscheidender Bedeutung ist. Im Zusammenhang mit Stoffwechsel- und Entzündungskrankheiten helfen THP-1-Zellen bei der Erforschung von Zytokinprofilen, einschließlich entzündlicher Zytokine, und deren Auswirkungen auf Zustände wie die Apoptose menschlicher Adipozyten, was das Zusammenspiel von Entzündung und Stoffwechselgesundheit veranschaulicht. Insbesondere ermöglicht die THP-1-Zelllinie vergleichende Studien mit anderen monozytären Leukämiezellen und Zelllinien wie U937, was ein tieferes Verständnis der Biologie von Monozyten und Makrophagen in verschiedenen Modellen ermöglicht. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die menschliche monozytäre Leukämie-Zelllinie THP-1 ein wertvolles Instrument für eine Vielzahl von Forschungszwecken darstellt, von der Untersuchung der komplexen Mechanismen des Immunsystems und seiner Rolle bei Krebs bis hin zum Verständnis der zellulären und molekularen Grundlagen der Immunmodulation, Zytokinaktivierung und Zellproliferation. Ihre Fähigkeit, menschliche Makrophagen und dendritische Zellen zu imitieren, in Verbindung mit ihrer einfachen Manipulierbarkeit und schnellen Wachstumsrate, zementiert ihren Status als weit verbreitete Zelllinie in der biologischen und medizinischen Forschung, die Einblicke in die zellulären Grundlagen von Immunität und Entzündung, die Reaktion von Krebszellen und das Potenzial für therapeutische Interventionen bietet. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Das Ursprungsgewebe ist peripheres Blut |
Krankheit | Leukämie |
Anwendungen | THP1-Zellen sind ein multifaktorielles Modell mit Anwendungen in den Bereichen Modellierung von Immunreaktionen, Monozyten-/Makrophagen-Differenzierung, Phagozytose-Mechanismen, entzündliche Signalwege und Medikamententransportversuche |
Synonyme | THP1, THP 1, THPI, O-THP-1, Tohoku Krankenhaus Pädiatrie-1 |
Spezifikationen
Alter | 1 Jahr |
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Geschlecht | Männlich |
Morphologie | Runde Zellen |
Zelltyp | Monozyten |
Wachstumseigenschaften | Die Zelllinie der monozytären Leukämie THP1 wächst in Suspension und bildet Klumpen, da sich die Zellen teilen und an den Clustern anhaften, von denen sie sich abspalten. |
Dokumentation
Zitat | THP-1 (Cytion Katalognummer 300356) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Genetisches Profil der THP1-Zelllinie
Exprimierte Rezeptoren | HLA-Haplotypen: HLA-A2, -A9, -B5, -DRw1, -DRw2Fc, C3b |
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Isoenzyme | Die menschliche THP-1-Zelllinie exprimiert geringe Mengen von CD4, CCR5 und CxCR4, was sie für Studien zur HIV-Infektion relevant macht. Allerdings exprimieren sie nur geringe Mengen von CD14 und nicht CD80, CD86, CD11b, CD11c, Mertk oder CD1a, was sie zu einem schlechten Modell für primäre Monozyten in Bezug auf LPS-Reaktionen macht. |
Produkte | Lysozym |
Karyotyp | THP-1-Zellen sind nahezu diploid und enthalten zwei verwandte Subklone mit genetischen Aberrationen. |
Handhabung
Nährboden | RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Verdopplungszeit | Die Populationsverdopplungszeit von menschlichen THP-1-Zellen liegt zwischen 19 und 50 Stunden, mit einem Durchschnitt von etwa 35 Stunden. |
Subkultivierung | Die Zellsuspension im Kolben durch Auf- und Abpipettieren vorsichtig homogenisieren, dann eine repräsentative Probe zur Bestimmung der Zelldichte pro ml entnehmen. Die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 10^5 Zellen/ml verdünnen und die eingestellte Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben aliquotieren. |
Splitverhältnis | Beginnen Sie die Kulturen mit 1 x 10^5 Zellen/ml und lassen Sie die Zellkonzentration nicht über 1 x 10^6 Zellen/ml ansteigen |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | Verwenden Sie als Kryokonservierungsmedium ein komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren. |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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STR profile |
CSF1PO: 11,13
D13S317: 13
D16S539: 11,12
D5S818: 11,12
D7S820: 10
TH01: 8,9.3
TPOX: 8,11
vWA: 16
D3S1358: 15,17
D21S11: 30,31.2
D18S51: 13,14
Penta E: 11,15
Penta D: 10,12
D8S1179: 10,14
FGA: 24,25
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HLA-Allele |
A*: '02:01:01
B*: '15:11:01
C*: '03:03:01
DRB1*: '01:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:01:01, '01:02:01
DQB1*: '05:01:01, '06:02:01
DPB1*: '02:01:02G, '04:02:01G
E: '01:03:02
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Erforderliche Produkte
Ursprünglich für das Wachstum menschlicher Leukämiezellen in Suspensions
- und Monolayerkulturen konzipiert, hat sich RPMI 1640 Medium durch Modifikationen von Forschern und kommerziellen Anbietern weiterentwickelt und ist heute für eine Vielzahl von Säugetierzellen geeignet. Es ist außergewöhnlich kompatibel mit Zelllinien wie HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, Astrozyten und Karzinomen.
RPMI 1640 Medium hebt sich von anderen Zellkulturmedien durch seine einzigartige Zusammensetzung ab. Es enthält eine erhebliche Menge an Phosphat, Aminosäuren und Vitaminen. Insbesondere enthält es Biotin, Vitamin B12 und PABA, die in Eagle's Minimal Essential Medium oder Dulbecco's Modified Eagle Medium nicht vorhanden sind. Außerdem weist RPMI 1640 Medium deutlich erhöhte Konzentrationen der Vitamine Inositol und Cholin auf. Es enthält jedoch keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren. Daher ist in der Regel eine Ergänzung mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS) erforderlich, um optimale Bedingungen für das Zellwachstum zu schaffen.
Das Puffersystem von RPMI 1640 Medium basiert auf Natriumbicarbonat und erfordert eine 5-10%ige CO2-Umgebung, um einen physiologisch angemessenen pH-Wert zu erhalten. Durch die Zugabe des Reduktionsmittels Glutathion unterscheidet sich dieses Medium weiter von anderen.
Qualitätskontrolle
Steril gefiltert
Lagerung und Haltbarkeit
Vor Licht geschützt bei +2°C bis +8°C lagern.
Nach dem Öffnen bei 4°C lagern und innerhalb von 6-8 Wochen aufbrauchen.
Versandbedingungen
Umgebungstemperatur
Pflege
Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Vermeiden Sie Einfrieren und häufiges Erwärmen auf +37°C, da dies die Produktqualität beeinträchtigt.
Erwärmen Sie das Medium nicht über 37°C und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellengeräte.
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, entnehmen Sie die erforderliche Menge und erwärmen Sie sie vor der Verwendung auf Raumtemperatur.
Zusammensetzung
Kategorie
Bestandteile
Konzentration (mg/L)
Aminosäuren
Glycin
10.00
L-Alanyl-L-Glutamin
434.40
L-Arginin
200.00
L-AsparaginH2O
56.82
L-Asparaginsäure
20.00
L-Cystin 2HCl
65.20
L-Glutaminsäure
20.00
L-Histidin HClH2O
20.27
L-Hydroxy-L-Prolin
20.00
L-Isoleucin
50.00
L-Leucin
50.00
L-Lysin HCl
40.00
L-Methionin
15.00
L-Phenylalanin
15.00
L-Prolin
20.00
L-Serin
30.00
L-Threonin
20.00
L-Tryptophan
5.00
L-Tyrosin 2Na 2H2O
28.83
L-Valin
20.00
Vitamine
p-Amino-Benzoesäure
1.00
D-Biotin
0.20
Cholinchlorid
3.00
D-Calciumpantothenat
0.25
Folsäure
1.00
myo-Inositol
35.00
Nicotinamid
1.00
Pyridoxin HCl
1.00
Riboflavin
0.20
Thiamin HCl
1.00
Vitamin B12
0.005
Anorganische Salze
Ca(NO3)2 4H2O
100.00
KCl
400.00
MgSO4 7H2O
100.00
NaCl
6000.00
NaHCO3
2000.00
Na2HPO4
800.00
Andere Bestandteile
D-Glucose
2000.00
L-Glutathion Reduziert
1.00
Phenolrot Natriumsalz
5.30
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) ist eine weit verbreitete Pufferlösung in der biologischen und chemischen Forschung. Sie spielt eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung des pH-Gleichgewichts und der Osmolarität während verschiedener experimenteller Verfahren, einschließlich Gewebeverarbeitung und Zellkultur. Unsere PBS-Lösung wird sorgfältig mit hochreinen Inhaltsstoffen formuliert, um Stabilität und Zuverlässigkeit bei jedem Experiment zu gewährleisten. Die Osmolarität und die Ionenkonzentration unserer PBS-Lösung sind denen des menschlichen Körpers sehr ähnlich, so dass sie isotonisch und für die meisten Zellen ungiftig ist.
Zusammensetzung unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist eine pH-angepasste Mischung aus hochreinen Phosphatpuffern und Kochsalzlösungen. Bei einer 1fachen Arbeitskonzentration enthält sie:
8000 mg/L Natriumchlorid (NaCl)
200 mg/L Kaliumchlorid (KCl)
1150 mg/L Natriumphosphat dibasisch wasserfrei (Na2HPO4)
200 mg/L Kaliumphosphat einbasig wasserfrei (KH2PO4)
Diese Zusammensetzung gewährleistet ein optimales pH
- und Ionengleichgewicht und eignet sich für eine breite Palette biologischer Anwendungen.
Anwendungen unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist ideal für verschiedene Anwendungen in der biologischen Forschung. Aufgrund ihrer isotonischen und ungiftigen Eigenschaften eignet sie sich für die Verdünnung von Substanzen und die Spülung von Zellbehältern. PBS-Lösungen, die EDTA enthalten, sind wirksam, um anhaftende und verklumpte Zellen abzulösen. Zweiwertige Metalle wie Zink sollten jedoch nicht zu PBS hinzugefügt werden, da dies zu Ausfällungen führen kann. In solchen Fällen werden Good's Puffer empfohlen. Außerdem ist unsere PBS-Lösung eine akzeptable Alternative zu viralen Transportmedien für den Transport und die Lagerung von RNA-Viren, einschließlich SARS-CoV-2.
Qualitätskontrolle
Steril gefiltert
Lagerung und Haltbarkeit
Vor Licht geschützt bei +2°C bis +25°C lagern.
Nach dem Öffnen bei 2°C bis 25°C lagern und innerhalb von 24 Monaten verbrauchen.
Versandbedingungen
Umgebungstemperatur
Pflege
Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Vermeiden Sie Einfrieren und häufiges Erwärmen auf +37°C, da dies die Produktqualität beeinträchtigt.
Erwärmen Sie das Medium nicht über 37°C und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellengeräte.
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, entnehmen Sie die erforderliche Menge und erwärmen Sie sie vor der Verwendung auf Raumtemperatur.
Zusammensetzung
Kategorie
Bestandteile
Konzentration (mg/L)
Salze
Kaliumchlorid
200
Kaliumphosphat monobasisch wasserfrei
200
Natriumchlorid
8000
Natriumphosphat zweibasisch wasserfrei
1150