SUM149PT-Zellen
















Allgemeine Informationen
Beschreibung | Die Zelllinie SUM149PT stammt von einem entzündlichen Brustkrebs (IBC), einem aggressiven Subtyp von Brustkrebs. IBC zeichnet sich durch schnelles Fortschreiten, frühe Metastasierung und eine schlechte Prognose aus. SUM149PT-Zellen werden als dreifach negativer Brustkrebs (TNBC) eingestuft, dem die Expression des Östrogenrezeptors (ER), des Progesteronrezeptors (PR) und des HER2-Rezeptors fehlt, so dass sie auf gängige zielgerichtete Therapien wie endokrine Behandlungen oder HER2-Inhibitoren nicht ansprechen. Stattdessen werden solche Krebsarten in der Regel mit einer zytotoxischen Chemotherapie behandelt, obwohl diese Krebsarten im Laufe der Zeit häufig Resistenzen entwickeln. Bezeichnenderweise weisen die SUM149PT-Zellen eine 2288delT BRCA1-Mutation auf, die zu einem Verlust der BRCA1-Funktion führt. Bei dieser Mutation handelt es sich um eine Frame-Shift-Deletion, die zu einer vorzeitigen Beendigung des BRCA1-Proteins führt, wodurch die DNA-Reparatur beeinträchtigt und die genomische Instabilität gefördert wird, die ein Kennzeichen von BRCA1-mutierten Krebsarten ist. Der Verlust von BRCA1 trägt zu der erhöhten chromosomalen Instabilität bei, die bei SUM149PT beobachtet wird, das zahlreiche chromosomale Aberrationen aufweist. Zusätzlich zur Mutation ist der BRCA1-Locus in SUM149PT verloren gegangen, was die Auswirkungen auf die genomische Stabilität noch verstärkt. Überraschenderweise weisen SUM149PT-Zellen eine CD44+/CD24-/Low-Subpopulation stammartiger Krebszellen auf, die mit Krebsstammzelleigenschaften wie verstärkter Invasion, Tumorigenese und Resistenz gegen Chemotherapie angereichert ist. Diese stammähnlichen Zellen sind auch mit einer Amplifikation des Zentrosoms und einer erhöhten Cyclin E/Cdk2-Aktivität verbunden. Die Hemmung von Cdk2 in SUM149PT zielt selektiv auf diese CSC-Subpopulation ab und stellt eine gewisse Empfindlichkeit gegenüber Chemotherapie wieder her, was darauf hindeutet, dass kombinierte therapeutische Strategien, die auf Cdk2 und konventionelle Chemotherapie abzielen, bei der Behandlung von chemoresistentem IBC wirksam sein könnten. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Brust |
Krankheit | Entzündliches Mammakarzinom |
Synonyme | SUM-149PT, SUM 149PT, SUM149-PT, SUM149, SUM-149, SUM 149, 149 PT, 149PT, BrCL12 |
Merkmale
Alter | 40 Jahre |
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Geschlecht | Weiblich |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | SUM149PT (Cytion Katalognummer 300609) |
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Expression / Mutation
Proteinexpression | p53 positiv |
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Handhabung
Nährboden | Ham's F12, w: 1,0 mM stabiles Glutamin, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820600a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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STR profile |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 12
D13S317: 12
D16S539: 11
D5S818: 11
D7S820: 11
TH01: 09. Mrz
TPOX: 9
vWA: 16,18
D3S1358: 17
D21S11: 28,31.2
D18S51: 14,15
Penta E: 11
Penta D: 8,9
D8S1179: 14,16
FGA: 29
D6S1043: 18
D2S1338: 20
D12S391: 15,18
D19S433: 12,14
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