LM/TK(LMTK-) Zellen
Allgemeine Informationen
Beschreibung | Diese Zelllinie, die von einer Unterlinie der L-M-Mausfibroblasten-Zelllinie abgeleitet ist, die gegen BUdR resistent ist, kann für genetische und biochemische Studien wie Gentransfer und somatische Zellhybridisierung verwendet werden. |
---|---|
Organismus | Maus |
Gewebe | Subkutanes Bindegewebe, Brustwarzenhof und Fett |
Synonyme | L-M[TK-], LM TK negativ, L-M (TK-), L M (TK-), LM(TK-), LM(tk-), LM-TK-, LMTK-, L Zellen (TK-), L(TK-), L(tk-) |
Merkmale
Alter | 100 Tage alt |
---|---|
Geschlecht | Männlich |
Morphologie | Fibroblasten-ähnlich |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | LM/TK(LMTK-) (Cytion-Katalognummer 305176) |
---|---|
Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Antigenexpression | H-2k |
---|---|
Tumorigene | Ja, in Nacktmäusen (Tumore entwickelten sich innerhalb von 21 Tagen mit einer Häufigkeit von 100 % (5/5) in Nacktmäusen, die subkutan mit 1?10^7 Zellen geimpft wurden). |
Handhabung
Nährboden | DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a) |
---|---|
Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1: 3 bis 1: 4 |
Medienwechsel | 2 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
|
Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
---|