HL-60-Zellen
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Zusammenfassung über die HL-60-Zelllinie
Beschreibung | HL-60-Zellen, die von einer 36-jährigen Frau mit akuter promyelozytärer Leukämie stammen, dienen als wichtiges Modell in der Krebsforschung, insbesondere bei der Untersuchung hämatologischer Malignome, da sie in der Lage sind, sich in reife weiße Blutzellen zu differenzieren und angeborene Immunreaktionen zu imitieren, was zum Verständnis der leukämischen Progression, der Expression zellulärer Onkogene und der Identifizierung therapeutischer Ziele beiträgt. Die Fähigkeit von HL-60-Zellen, sich durch Wirkstoffe wie Dimethylsulfoxid (DMSO) oder Retinsäure in reife weiße Blutkörperchen wie Granulozyten und Monozyten zu differenzieren, unterstreicht ihre Bedeutung für Studien zur Differenzierung menschlicher myeloischer Zellen und wirft ein Licht auf die Mechanismen, die dem Fortschreiten der Leukämie und der Wirksamkeit therapeutischer Eingriffe zugrunde liegen. Menschliche myeloische Leukämiezellen HL-60 sind ein wesentlicher Bestandteil der Forschung, die sich mit Apoptose, Zellaktivierung und dem Zellzyklus befasst, einschließlich der Regulierung von Schlüssel-Onkogenen wie dem c-myc Proto-Onkogen und dem Tumor-Nekrose-Faktor (TNF-alpha). Ihre Fähigkeit, extrazelluläre Fallen zu bilden, also Strukturen, die Krankheitserreger abfangen und abtöten, was die angeborene Immunantwort von primären Neutrophilen widerspiegelt, macht HL-60-Zellen zu einem nützlichen Modell für die Untersuchung der immunologischen Aspekte der Leukämie und der Interaktion leukämischer Zellen mit dem Immunsystem. Darüber hinaus ist das Ansprechen von HL-60-Zellen auf Signalwege wie den MAPK-Signalweg und verschiedene Kinasen von entscheidender Bedeutung für die Entschlüsselung der molekularen Mechanismen, die die Vermehrung und Differenzierung leukämischer Zellen steuern. Dieser Aspekt ist besonders nützlich für die Identifizierung von therapeutischen Zielen und die Entwicklung neuer Behandlungsstrategien für Leukämie. HL-60-Zellen sind eine wichtige Ressource in der Krebsforschung, da sie durch ihre einzigartigen Differenzierungsfähigkeiten und die Nachahmung von Immunreaktionen Einblicke in hämatologische Malignome, das Fortschreiten von Leukämie und potenzielle therapeutische Ziele bieten. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Blut |
Krankheit | Akute promyelozytäre Leukämie |
Anwendungen | Transfektionswirt |
Synonyme | HL 60, HL.60, HL60 |
Merkmale
Alter | 36 Jahre |
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Geschlecht | Weiblich |
Ethnizität | Kaukasisch |
Morphologie | Runde Zellen |
Zelltyp | Lymphoblasten |
Wachstumseigenschaften | Aufhängung |
Spezifikationen
Zitat | HL-60 (Cytion Katalognummer 300209) |
---|---|
Biosicherheitsstufe | 1 |
Genetik der Promyelozyten-Leukämie-Zelllinie HL-60
Exprimierte Rezeptoren | komplement, Fc |
---|---|
Isoenzyme | G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D,1, Me-2, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1 |
Onkogene | myc+ |
Reverse Transkriptase | negativ |
Produkte | tumor-Nekrose-Faktor (TNF), auch bekannt als Tumor-Nekrose-Faktor alpha (TNF-alpha, TNF alpha), nach Stimulation mit Phorbolmyristinsäure |
Handhabung
Nährboden | RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a) |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Subkultivierung | Die Kulturen durch regelmäßige Zugabe oder Austausch des Mediums aufrechterhalten. Kulturen mit einer Dichte von 2 x 10^5 Zellen/ml anlegen und die Zellkonzentration für optimales Wachstum im Bereich von 1 x 10^5 bis 1 x 10^6 Zellen/ml halten |
Aussaatdichte | 2 x 10^5 Zellen/ml |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
|
Qualitätskontrolle
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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STR profile |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 13,14
D13S317: 8,11
D16S539: 11
D5S818: 12
D7S820: 11,12
TH01: 7,8
TPOX: 8,11
vWA: 16
D3S1358: 16
D21S11: 29,3
D18S51: 14
Penta E: 13
Penta D: 10,12
D8S1179: 13
FGA: 22,24
D1S1656: 15
D6S1043: 11,12
D2S1338: 17
D12S391: 18,2
D19S433: 14
|
HLA-Allele |
A*: 01:01:01
B*: 57:01:01
C*: 06:02:01
DRB1*: 07:01:01
DQA1*: 02:01:01
DQB1*: 03:03:02
DPB1*: 04:01:01, 13:01:01
E: 01:01:01, 01:09
|
Benötigte Produkte
Ursprünglich für das Wachstum menschlicher Leukämiezellen in Suspensions
- und Monolayer-Kulturen konzipiert, hat sich RPMI 1640 Medium durch Modifikationen von Forschern und kommerziellen Anbietern weiterentwickelt und ist heute für eine Vielzahl von Säugetierzellen geeignet. Es ist außergewöhnlich kompatibel mit Zelllinien wie HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, Astrozyten und Karzinomen.
RPMI 1640 Medium hebt sich von anderen Zellkulturmedien durch seine einzigartige Zusammensetzung ab. Es enthält eine erhebliche Menge an Phosphat, Aminosäuren und Vitaminen. Insbesondere enthält es Biotin, Vitamin B12 und PABA, die in Eagle's Minimal Essential Medium oder Dulbecco's Modified Eagle Medium nicht vorhanden sind. Darüber hinaus weist RPMI 1640 Medium deutlich erhöhte Konzentrationen der Vitamine Inositol und Cholin auf. Es enthält jedoch keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren. Daher ist in der Regel eine Ergänzung mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS) erforderlich, um optimale Bedingungen für das Zellwachstum zu schaffen.
Das Puffersystem von RPMI 1640 Medium basiert auf Natriumbicarbonat (2,0 g/L) und erfordert eine 5-10%ige CO2-Umgebung, um einen physiologisch angemessenen pH-Wert zu erhalten. Die Zugabe des Reduktionsmittels Glutathion unterscheidet dieses Medium weiter von anderen.
Dieses RPMI 1640-Medium enthält 4,5 Gramm Glukose pro Liter.
Qualitätskontrolle
pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.
Wartung
Kühl aufbewahren bei +2°C bis +8°C im Dunkeln. Einfrieren und Erwärmen bis zu +37° C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37° C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab Herstellungsdatum.
Zusammensetzung
Bestandteile
mg/L
Anorganische Salze
Kalziumnitrat x 4H2O
100,00
Magnesiumsulfat wasserfrei
48,83
Kaliumchlorid
400,00
Natriumchlorid
5450,00
di-Natriumhydrogenphosphat
800,49
Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose wasserfrei
4500,00
Glutathion (red.)
1,00
HEPES
2383,00
Phenol rot
5,00
Natriumpyruvat
110,00
Aminosäuren
L-Arginin x HCl
241,86
L-Asparagin x H2O
56,82
L-Asparaginsäure
20,00
L-Cystin x 2HCl
65,19
L-Glutamin
300,00
L-Glutaminsäure
20,00
Glycin
10,00
L-Histidin x HCl x H2O
20,27
L-Hydroxyprolin
20,00
L-Isoleucin
50,00
L-Leucin
50,00
L-Lysin x HCl
40,00
L-Methionin
15,00
L-Phenylalanin
15,00
L-Prolin
20,00
L-Serin
30,00
L-Threonin
20,00
L-Tryptophan
5,00
L-Tyrosin x 2Na
28,83
L-Valin
20,00
Vitamine
p-Aminobenzoesäure
1,00
D-(+)-Biotin
0,20
D-Calciumpantothenat
0,25
Cholinchlorid
3,00
Folsäure
1,00
myo-Inositol
35,00
Nicotinamid
1,00
Pyridoxin x HCl
1,00
Riboflavin
0,20
Thiamin x HCl
1,00
Vitamin B12
0,01
NaHCO3
1500,00
Ursprünglich für das Wachstum menschlicher Leukämiezellen in Suspensions
- und Monolayer-Kulturen konzipiert, hat sich RPMI 1640 Medium durch Modifikationen von Forschern und kommerziellen Anbietern weiterentwickelt und ist heute für eine Vielzahl von Säugetierzellen geeignet. Es ist außergewöhnlich kompatibel mit Zelllinien wie HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, Astrozyten und Karzinomen.
RPMI 1640 Medium hebt sich von anderen Zellkulturmedien durch seine einzigartige Zusammensetzung ab. Es enthält eine erhebliche Menge an Phosphat, Aminosäuren und Vitaminen. Insbesondere enthält es Biotin, Vitamin B12 und PABA, die in Eagle's Minimal Essential Medium oder Dulbecco's Modified Eagle Medium nicht vorhanden sind. Darüber hinaus weist RPMI 1640 Medium deutlich erhöhte Konzentrationen der Vitamine Inositol und Cholin auf. Es enthält jedoch keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren. Daher ist in der Regel eine Ergänzung mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS) erforderlich, um optimale Bedingungen für das Zellwachstum zu schaffen.
Das Puffersystem von RPMI 1640 Medium basiert auf Natriumbicarbonat (2,0 g/L) und erfordert eine 5-10%ige CO2-Umgebung, um einen physiologisch angemessenen pH-Wert zu erhalten. Durch die Zugabe des Reduktionsmittels Glutathion unterscheidet sich dieses Medium weiter von anderen.
Die einzigartige Zusammensetzung dieser RPMI-Formulierung umfasst 2,1 mM stabiles Glutamin, 2,0 Gramm pro Liter NaHCO3 und Phenolrot.
Qualitätskontrolle
pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.
Wartung
Kühl aufbewahren bei +2°C bis +8°C im Dunkeln. Einfrieren und Erwärmen bis zu +37° C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37° C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab Herstellungsdatum.
Zusammensetzung
Bestandteile
mg/L
Anorganische Salze
Kalziumnitrat x 4H2O
100,00
Magnesiumsulfat wasserfrei
48,83
Kaliumchlorid
400,00
Natriumchlorid
5,950.00
di-Natriumhydrogenphosphat
800,49
Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose wasserfrei
2,000.00
Glutathion (red.)
1,00
Phenol rot
5,00
NaHCO3
2,000.00
Aminosäuren
L-Arginin x HCl
241,86
L-Asparagin x H2O
56,82
L-Asparaginsäure
20,00
L-Cystin x 2HCl
65,19
L-Alanyl-L-Glutamin
447,00
L-Glutaminsäure
20,00
Glycin
10,00
L-Histidin x HCl x H2O
20,27
L-Hydroxyprolin
20,00
L-Isoleucin
50,00
L-Leucin
50,00
L-Lysin x HCl
40,00
L-Methionin
15,00
L-Phenylalanin
15,00
L-Prolin
20,00
L-Serin
30,00
L-Threonin
20,00
L-Tryptophan
5,00
L-Tyrosin x 2Na
28,83
L-Valin
20,00
Vitamine
p-Aminobenzoesäure
1,00
D-(+)-Biotin
0,20
D-Calciumpantothenat
0,25
Cholinchlorid
3,00
Folsäure
1,00
myo-Inositol
35,00
Nicotinamid
1,00
Pyridoxin x HCl
1,00
Riboflavin
0,20
Thiamin x HCl
1,00
Vitamin B12
0.005
- eine schonende Alternative zu Trypsin
Accutase ist eine Zellablösungslösung, die die Zellkulturindustrie revolutioniert. Es ist eine Mischung aus proteolytischen und kollagenolytischen Enzymen, die die Wirkung von Trypsin und Kollagenase nachahmt. Im Gegensatz zu Trypsin enthält Accutase keine Säugetier
- oder Bakterienbestandteile und ist sehr viel schonender für die Zellen, was es zu einer idealen Lösung für die routinemäßige Ablösung von Zellen von Standardplastikgefäßen für die Gewebekultur und adhäsionsbeschichteten Plastikgefäßen macht. In diesem Blogbeitrag gehen wir auf die Vorteile und Einsatzmöglichkeiten von Accutase ein und zeigen, wie es die Zellkultur verändert.
Vorteile von Accutase
Accutase hat mehrere Vorteile gegenüber herkömmlichen Trypsinlösungen. Erstens kann es immer dann eingesetzt werden, wenn eine sanfte und effiziente Ablösung von adhärenten Zelllinien erforderlich ist, und ist somit ein direkter Ersatz für Trypsin. Zweitens funktioniert Accutase sehr gut bei embryonalen und neuronalen Stammzellen, und es hat sich gezeigt, dass die Lebensfähigkeit dieser Zellen nach der Passage erhalten bleibt. Drittens bewahrt Accutase die meisten Epitope für die anschließende durchflusszytometrische Analyse, was es ideal für die Analyse von Zelloberflächenmarkern macht.
Außerdem muss Accutase bei der Passage von adhärenten Zellen nicht neutralisiert werden. Durch die Zugabe weiterer Medien nach der Zellteilung wird die Accutase verdünnt, so dass sie nicht mehr in der Lage ist, Zellen abzulösen. Dadurch entfällt der Schritt der Inaktivierung, und die Zellkulturtechniker sparen Zeit. Schließlich muss Accutase nicht aliquotiert werden, und eine Flasche ist im Kühlschrank 2 Monate lang haltbar.
Anwendungen von Accutase
Accutase ist ein direkter Ersatz für Trypsinlösung und kann für die Passage von Zelllinien verwendet werden. Darüber hinaus eignet sich Accutase gut zum Ablösen von Zellen für die Analyse vieler Zelloberflächenmarker mittels Durchflusszytometrie und für die Zellsortierung. Andere nachgeschaltete Anwendungen der Accutase-Behandlung umfassen die Analyse von Zelloberflächenmarkern, Viruswachstumstests, Zellproliferation, Tumorzellmigrationsassays, routinemäßige Zellpassage, Produktionsskalierung (Bioreaktor) und Durchflusszytometrie.
Zusammensetzung von Accutase
Accutase enthält keine Bestandteile von Säugetieren oder Bakterien und ist eine natürliche Enzymmischung mit proteolytischer und kollagenolytischer Enzymaktivität. Es ist in einer viel niedrigeren Konzentration als Trypsin und Kollagenase formuliert, wodurch es weniger toxisch und sanfter, aber genauso wirksam ist.
Wirksamkeit von Accutase
Accutase ist nachweislich effizient bei der Ablösung von Primär
- und Stammzellen und erhält die hohe Lebensfähigkeit der Zellen im Vergleich zu Enzymen tierischen Ursprungs wie Trypsin. 100 % der Zellen werden nach 10 Minuten zurückgewonnen, und dank der Selbstverdauung von Accutase ist es unbedenklich, Zellen bis zu 45 Minuten in Accutase zu belassen.
Zusammenfassung
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass Accutase eine leistungsstarke Lösung ist, die das Spiel in der Zellkultur verändert. Mit seiner sanften Natur, Effizienz und Vielseitigkeit ist Accutase die ideale Alternative zu Trypsin. Wenn Sie nach einer zuverlässigen und effizienten Lösung für die Zellablösung suchen, ist Accutase die richtige Lösung für Sie.
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS) ist eine vielseitige Pufferlösung, die in vielen biologischen und chemischen Anwendungen sowie bei der Gewebeverarbeitung eingesetzt wird. Unsere PBS-Lösung ist mit hochwertigen Inhaltsstoffen formuliert, um einen konstanten pH-Wert während der Experimente zu gewährleisten. Die Osmolarität und die Ionenkonzentration unserer PBS-Lösung sind auf die des menschlichen Körpers abgestimmt, so dass sie isotonisch und für die meisten Zellen nicht toxisch ist.
Zusammensetzung unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist eine pH-angepasste Mischung aus hochreinen Phosphatpuffern und Kochsalzlösungen. Bei einer 1fachen Arbeitskonzentration enthält sie 137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 8 mM Na2HPO4 und 2 mM KH2PO4. Wir haben diese Zusammensetzung auf der Grundlage von CSHL-Protokollen und der Molekularen Klonierung nach Sambrook gewählt, die in der Forschungsgemeinschaft etablierte Standards sind.
Anwendungen unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung ist ideal für eine Vielzahl von Anwendungen in der biologischen Forschung. Aufgrund ihrer isotonischen und ungiftigen Eigenschaften eignet sie sich perfekt für die Verdünnung von Substanzen und das Spülen von Zellbehältern. Unsere PBS-Lösung mit EDTA kann auch zum Lösen von angehefteten und verklumpten Zellen verwendet werden. Es ist jedoch wichtig zu beachten, dass zweiwertige Metalle wie Zink nicht zu PBS hinzugefügt werden dürfen, da dies zu Ausfällungen führen kann. In solchen Fällen werden Good's Puffer empfohlen. Darüber hinaus hat sich unsere PBS-Lösung als akzeptable Alternative zu viralen Transportmedien für den Transport und die Lagerung von RNA-Viren, wie z. B. SARS-CoV-2, erwiesen.
Lagerung unserer PBS-Lösung
Unsere PBS-Lösung kann bei Raumtemperatur gelagert werden und ist somit leicht zu verwenden und zugänglich.
Zusammenfassend
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass unsere PBS-Lösung bei vielen biologischen und chemischen Experimenten ein wesentlicher Bestandteil ist. Aufgrund ihrer isotonischen und ungiftigen Eigenschaften eignet sie sich für zahlreiche Anwendungen, von der Zellkultur bis zum Virustransportmedium. Durch die Wahl unserer hochwertigen PBS-Lösung können Forscher ihre Experimente optimieren und genaue und zuverlässige Ergebnisse erzielen.
Zusammensetzung
Bestandteile
mg/L
Anorganische Salze
Kaliumchlorid
200,00
Kaliumdihydrogenphosphat
200,00
Natriumchlorid
8,000.00
di-Natriumhydrogenphosphat wasserfrei
1,150.00