HK-2-Zellen
Allgemeine Informationen
Beschreibung | Die humane Nieren-2 (HK-2)-Zelllinie ist ein Typ von proximalen tubulären Zellen (PTC), die aus einer normalen menschlichen Niere stammen. HK-2-Zellen wurden durch Transfektion mit einem rekombinanten Retrovirus erzeugt, das die E6/E7-Gene des humanen Papillomavirus 16 (HPV-16) enthält. Dieser Prozess führte zur Immortalisierung der Zellen und zur Etablierung einer kontinuierlich wachsenden Zelllinie. Die HK-2-Zellen wurden eingehend charakterisiert, und die Forschung hat gezeigt, dass sie einen Phänotyp aufweisen, der auf gut differenzierte PTCs hindeutet. Die Zellen exprimieren EGF und benötigen es für ihr Wachstum und Überleben. Sie sind positiv für verschiedene Gene, darunter alkalische Phosphatase, Gamma-Glutamyltranspeptidase, Leucin-Aminopeptidase, saure Phosphatase, Cytokeratin, Alpha-3- und Beta-1-Integrin und Fibronektin. Darüber hinaus behalten die Zellen funktionelle Merkmale des proximalen Tubulus und sind zur Glukoneogenese fähig. HK-2-Zellen sind verankerungsabhängig, d. h. sie benötigen eine Oberfläche, an der sie sich festhalten können, um zu wachsen. Sie können nicht in Methylcellulose, Weichagar oder Suspension wachsen. Die Zellen haben einen mittleren Durchmesser von 18,2 Mikrometern, und ihre Verdoppelungszeit liegt zwischen 47,3 und 61,7 Stunden. HK-2-Zellen werden in der toxikologischen Forschung häufig verwendet, da sie die mit frisch isolierten PTCs erzielten Versuchsergebnisse reproduzieren können. So wurden HK-2-Zellen beispielsweise zur Untersuchung der Auswirkungen von Umweltgiften wie Cadmium und Cisplatin auf Nierenzellen verwendet. Die Zellen wurden auch verwendet, um die Mechanismen zu untersuchen, die Nierenkrankheiten wie der diabetischen Nephropathie und der akuten Nierenschädigung zugrunde liegen. Es ist jedoch zu beachten, dass die Anfälligkeit der HK-2-Zellen für toxische Verbindungen durch die Anzahl der Passagen beeinflusst werden kann. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass HK-2-Zellen eine gut charakterisierte PTC-Zelllinie sind, die für eine Vielzahl von biologischen Forschungsanwendungen, insbesondere in der Toxikologie, verwendet werden kann. Forscher sollten sich jedoch der möglichen Auswirkungen der Passage auf die Empfindlichkeit dieser Zellen gegenüber toxischen Substanzen bewusst sein, und die Anzahl der Passagen sollte bei der Interpretation der Versuchsergebnisse berücksichtigt werden. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Niere, Kortex, proximaler Tubulus |
Synonyme | Hk-2, HK2, Menschliche Niere-2 |
Merkmale
Alter | Erwachsener |
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Geschlecht | Männlich |
Ethnizität | Europäisch |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | HK-2 (Cytion-Katalognummer 305021) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Exprimierte Rezeptoren | Epidermaler Wachstumsfaktor (EGF), exprimiert |
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Proteinexpression | Alkalische Phosphatase, Gamma-Glutamyltranspeptidase, Leucin-Aminopeptidase, saure Phosphatase, Cytokeratin, Alpha 3, Beta 1 Integrin, Fibronectin |
Handhabung
Nährboden | DMEM:Ham's F12, w: 3,1 g/L Glucose, w: 1,6 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a) |
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Mittlere Supplemente | Supplementierung des Mediums mit 10% FBS, 10 Mikrogramm/L IGF-1, 10 Mikrogramm/L EGF, 1 mg/L Transferrin, 0,5 Mikrogramm/L TGF-b1, 0,2 mg/L Biotin 0,05 mg/ml BPE |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:4 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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STR profile |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 13
D13S317: 9
D16S539: 11,12
D5S818: 12
D7S820: 10,11
TH01: 9
TPOX: 8,9
vWA: 17,18
D3S1358: 16,17
D21S11: 28,30
D18S51: 12
Penta E: 10,11
Penta D: 9,12
D8S1179: 10,14
FGA: 20,22
D1S1656: 12,13
D6S1043: 12,13
D2S1338: 17,25
D12S391: 17.3,22
D19S433: 15,15.2
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