CCD-1095Sk-Zellen

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
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Produktnummer: 300642

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Product sheet

Beschreibung	CCD-1095Sk ist eine Fibroblasten-Zelllinie, die von der Haut eines männlichen Menschen stammt. Sie wurde aus einer Biopsie unbeteiligter Haut von einem Patienten mit einem Plattenepithelkarzinom gewonnen. Diese Zelllinie wird vor allem in Studien verwendet, die die Wechselwirkungen zwischen Hautzellen und Krebszellen untersuchen, insbesondere wie nicht-kanzeröse Zellen in der Mikroumgebung des Tumors das Wachstum und die Progression des Tumors beeinflussen können. Die CCD-1095Sk-Zelllinie ist daher wertvoll für die Krebsforschung, insbesondere für das Verständnis der stromalen Aspekte von Hautkrebs. Die CCD-1095Sk-Zellen weisen eine Fibroblastenmorphologie auf, die durch eine spindelförmige, längliche Form gekennzeichnet ist, die typisch für Bindegewebszellen ist, die extrazelluläre Matrixkomponenten produzieren, die für die Gewebereparatur und strukturelle Integrität wichtig sind. Diese Zellen sind adhärent, wachsen in Monolayern und sind für ihre Robustheit unter verschiedenen experimentellen In-vitro-Bedingungen bekannt. Sie werden verwendet, um das Fibroblastenverhalten in normaler Haut zu modellieren und um Veränderungen der Fibroblastenaktivität unter Krebsbedingungen zu untersuchen, wozu auch die Sekretion von Wachstumsfaktoren, Zytokinen und Matrixmetalloproteinasen gehören kann. Als solche sind sie ein unschätzbares Instrument für pharmakologische Studien und die Entwicklung therapeutischer Strategien, die auf die Tumorumgebung abzielen.
Organismus	Menschen
Gewebe	Haut
Krankheit	Duktales Karzinom
Anwendungen	3D-Zellkultur
Synonyme	CCD1095Sk

Alter	37 Jahre
Geschlecht	Weiblich
Morphologie	Fibroblasten
Wachstumseigenschaften	Adhärent

Zitat	CCD-1095Sk (Cytion Katalognummer 300642)
Biosicherheitsstufe	1

Nährboden	EMEM, w: 2 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: EBSS, w: 1 mM Natriumpyruvat, w: NEAA (Cytion-Artikelnummer 820100c)
Mittlere Supplemente	Supplemente des Mediums mit 10% FBS
Passage-Lösung	Accutase
Subkultivierung	Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Einfriermedium	CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100)
Handhabung von kryokonservierten Kulturen	Vergewissern Sie sich, dass das Fläschchen bei der Lieferung tiefgefroren ist, da die Zellen auf Trockeneis versandt werden, um während des Transports optimale Temperaturen zu erhalten. Lagern Sie das Kryofläschchen nach Erhalt entweder sofort bei Temperaturen unter -150 °C, um die Unversehrtheit der Zellen zu gewährleisten, oder fahren Sie mit Schritt 3 fort, wenn eine sofortige Kultivierung erforderlich ist. Für eine sofortige Kultivierung tauen Sie das Fläschchen schnell auf, indem Sie es in ein 37°C warmes Wasserbad mit sauberem Wasser und einem antimikrobiellen Mittel eintauchen und 40-60 Sekunden lang vorsichtig schütteln, bis ein kleiner Eisklumpen zurückbleibt. Führen Sie alle nachfolgenden Schritte unter sterilen Bedingungen in einer Abzugshaube durch und desinfizieren Sie das Kryo-Fläschchen vor dem Öffnen mit 70%igem Ethanol. Das desinfizierte Fläschchen vorsichtig öffnen und die Zellsuspension unter vorsichtigem Mischen in ein 15-ml-Zentrifugenröhrchen mit 8 ml Kulturmedium bei Raumtemperatur überführen. Zentrifugieren Sie das Gemisch 3 Minuten lang bei 300 x g, um die Zellen abzutrennen, und verwerfen Sie den Überstand mit dem restlichen Gefriermedium vorsichtig. Sie können die Zentrifugation auch überspringen, aber das restliche Gefriermedium nach 24 Stunden entfernen. Das Zellpellet vorsichtig in 10 ml frischem Kulturmedium resuspendieren. Bei adhärenten Zellen die Suspension auf zwei T25-Kulturflaschen aufteilen; bei Suspensionskulturen das gesamte Medium in eine T25-Flasche überführen, um eine effektive Zellinteraktion und ein effektives Wachstum zu fördern. Halten Sie sich an die festgelegten Subkulturprotokolle, um ein kontinuierliches Wachstum und die Aufrechterhaltung der Zelllinie zu gewährleisten und zuverlässige Versuchsergebnisse zu erzielen.

Sterilität	Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

CCD-1095Sk-Zellen

Allgemeine Informationen

Merkmale

Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation

Expression / Mutation

Handhabung

Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA