SW-620-celler – Indflydelse på forskning i og eksperimenter med tyktarmskræft
SW-620-celler udgør den humane kolorektale kræftcellelinje i Dukes-stadium C. De har et højt tumorigenisk og metastatisk potentiale. Derfor anvendes de i vid udstrækning i kræft- og toksikologiske undersøgelser. Denne artikel vil undersøge de grundlæggende aspekter af tyktarmskræftcellelinjen SW-620.
- Vækstmedium
- DMEM-medium tilsat 10 % føtal bovint serum, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 og 1,0 mM natriumpyruvat anvendes til optimal vækst af SW-620-celler. Mediet bør udskiftes to gange om ugen.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for SW-620 ligger mellem 20 og 26 timer.
- Væksttype
- SW-620-cellelinjen er adhærent. Cellerne danner monolag på overfladen af dyrkningsbeholderen.
- Biosikkerhedsniveau
- BSL-1
- Kan bestilles hos
- Cytion — Bestil SW-620
Oprindelse og generelle egenskaber ved SW-620-cellerne
Oprindelse og generelle egenskaber er de vigtigste oplysninger om en cellelinje. Forudgående kendskab til dette er afgørende for forskere, der overvejer at inddrage den i deres forskningsstudie. Dette afsnit af artiklen vil forklare de vigtigste egenskaber og oprindelsen af SW-620-cellelinjen. Du vil hovedsageligt lære: Hvad er SW620-cellelinjen? Hvad er kendetegnene ved SW-620-cellelinjen? Hvad er oprindelsen til SW-620? Hvad er SW-640-cellernes størrelse? Og hvad er forskellen mellem SW-620 og SW-480?
- SW-620, en cellelinje fra kolorektal karcinom, stammer fra en mediatiseret lymfeknudelæsion hos en 51-årig kaukasisk mand med adenokarcinom i tyktarmen [1]. Denne cellelinje blev deponeret af A. Leibovitz og kolleger.
- SW-620-celler har en epitelial morfologi. De består desuden af små, runde og bipolære celler, der svarer til mikrovilli.
- SW-620-cellernes diameter er 14,4 ± 0,3 μm.
- Disse tyktarmskræftceller har en hyperdiploid karyotype. Det modale kromosomantal for SW-620-celler er 50, hvilket kan variere fra 45 til 53.
SW-480 kontra SW-620
SW480 og SW620 er kolorektale kræftcellelinjer. SW-480 stammer fra en primær tumor, mens SW-620 blev etableret ud fra en metastaseret lymfeknude. Desuden adskiller de xenotransplantater, der er udviklet fra disse cellelinjer, sig fra hinanden. SW620-xenotransplantater danner lag af tumorceller, mens SW480-xenotransplantater danner kirtellignende strukturer [2]. Begge cellelinjer har identiske mutationsprofiler.
SW-620-celler: Oplysninger om dyrkning
Det er afgørende at forstå de grundlæggende principper for dyrkning af en cellelinje, da det kan føre til korrekt håndtering og vedligeholdelse. I dette afsnit nævnes nogle vigtige punkter vedrørende dyrkning af SW-620, som kan hjælpe dig med at forstå: Hvad er SW-620-mediet? Hvad er fordoblingstiden for SW-620? Hvordan dyrker man SW-620-celler?
Vigtige punkter ved dyrkning af SW-620-celler
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for SW-620 ligger mellem 20 og 26 timer.
Adhærent eller i suspension:
SW-620-cellelinjen er adhærent. Cellerne danner monolag på overfladen af dyrkningsbeholderen.
Subkultiveringsforhold:
SW-620-celler subkultiveres med et opdelingsforhold på 1:3. De adhærente celler skylles med fosfat-saltvandsbuffer (1X) uden magnesium og calcium. Derefter tilsættes passageringsopløsningen Accutase, og cellerne inkuberes ved stuetemperatur i 8 til 10 minutter. Der tilsættes frisk væske, og cellerne centrifugeres. Derefter resuspenderes de høstede celler omhyggeligt i et vækstmedium og fordeles i nye kolber til vækst.
Vækstmedium:
DMEM-medium tilsat 10 % føtal bovint serum, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,5 g/L NaHCO3 og 1,0 mM natriumpyruvat anvendes til optimal vækst af SW-620-celler. Mediet bør udskiftes to gange om ugen.
Vækstbetingelser:
SW-620-koloncarcinomceller dyrkes i en befugtet inkubator ved 37 °C og med 5 % CO₂.
Opbevaring:
Efter nedfrysning opbevares SW-620-celler ved temperaturer under -150 °C i ultralavtemperaturfrysere eller i dampfasen af flydende nitrogen.
Frysningsproces og medium:
CM-1 eller CM-ACF er et ideelt frysemedium til SW-620-celler. Der anvendes en langsom fryseproces til at fryse SW-620-cellerne ned. Den tillader kun et temperaturfald på 1 °C pr. minut, hvilket beskytter cellernes levedygtighed.
Optøningsproces:
Frosne SW-620-celler optøs i et vandbad, der er forindstillet til 37 °C, i 40 til 60 sekunder. Efter optøning tilsættes dyrkningsmedium, og cellerne centrifugeres for at fjerne rester af frysemediet. Derefter resuspenderes den opnåede cellepellet i et vækstmedium, og cellerne overføres til en ny kolbe til vækst.
Biosikkerhedsniveau:
Der kræves et laboratorium på biosikkerhedsniveau 1 (BSL-1) til håndtering af SW-620-kulturer.
Fordele ved SW-620-celler
Fordele
- Modellering af tyktarmskræft: SW-620-celler fungerer som en vigtig model for tyktarmskræft, hvilket muliggør en indgående undersøgelse af tumor- og metastasemekanismer, især i xenotransplantatmodeller.
- Kræftforskning og terapi: Disse celler letter udforskningen af kræftbiologi, kemoterapeutisk effektivitet og mekanismerne bag celledød, herunder anoikis.
- CD133-ekspression: Ekspressionen af CD133 i SW-620-celler giver indsigt i kræftstamcellers biologi og dens betydning for tumorudvikling og resistens over for behandling.
- Anvendelser inden for flowcytometri: Flowcytometrianalyse af disse celler muliggør vurdering af cellepopulationer, apoptoseniveauer og proliferation.
Forskningsanvendelser af SW-620-cellelinjen
De forskningsområder, hvor SW-620-celler finder lovende anvendelse, beskrives nedenfor:
- Kræftforskning: SW-620 er en uvurderlig cellemodel til at studere biologien bag kolorektal kræft. Forskere anvender denne in vitro-model til at udforske de molekylære mekanismer, der driver kræftcellers vækst, invasion og migration. Desuden kan den bruges til at undersøge mutationer i SW620-cellelinjen, f.eks. p53, APC og KRAS. Forskning udført i 2021 undersøgte effekten af KRAS-mutationen i SW620-cellelinjen på følsomheden over for et nyt lægemiddel, FL118. Forskerne observerede, at overekspression af KRAS øger den FL118-inducerede apoptose i kolorektale celler, mens inaktivering af genet mindsker den. Disse resultater kan bidrage til at forudsige anvendelsen af FL118 hos patienter med tyktarmskræft og KRAS-mutation [3].
- Lægemiddelscreening og -udvikling: SW-620-cellelinjen anvendes i vid udstrækning til at screene og teste potentielle lægemiddelkandidater mod tyktarmskræft. Forskere anvender disse celler til at evaluere lægemidlers cytotoksicitet og effektivitet, hvilket kan føre til udvikling af målrettede behandlingsmetoder. Et eksempel herpå er en undersøgelse, der udforskede de kolorektale kræftbekæmpende egenskaber ved enkelte æteriske olieforbindelser fra kanel og nellike ved hjælp af SW-620-cellelinjen [4].
- Undersøgelser af metastaser: På grund af det høje metastasepotentiale kan SW-620-celler anvendes til at undersøge de molekylære signalveje, der ligger til grund for kræftcellers metastaser. Zhou Yang og hans kolleger fandt eksempelvis, at Grainy-head-like 2 (GRHL2)-genet spiller en rolle i udviklingen og metastaseringen af tyktarmskræft. De fremsatte den hypotese, at GRHL2-genekspression hæmmer udviklingen og metastaseringen af kolorektal kræft ved at undertrykke den epitel-til-mesenkymale overgang (EMT) [5].
Sikr din SW620-cellelinje
SW-620-celler: Publikationer
I dette afsnit vil vi se nærmere på nogle interessante og ofte citerede forskningspublikationer om SW-620-cellerne.
Denne undersøgelse, der blev offentliggjort i Molecular Carcinogenesis (2017), foreslog, at behandlingen med polyfenolet urolithin A inducerer autofagi i den kolorektale kræftcellelinje SW620. Den hæmmede også kræftcellernes metastase.
Denne artikel i *Oncology Letters* (2018) undersøgte det antimetastatiske potentiale af tetrandrin, et bis-benzylisoquinolin-alkaloid, ved hjælp af SW-620-celler.
CDCA3 fremmer celleproliferation ved at aktivere NF-κB/cyclin D1-signalvejen i kolorektal kræft
Denne artikel er offentliggjort i Biochemical and Biophysical Research Communications (2018). Den foreslår, at CDCA3-genet (Cell division cycle associated 3) er opreguleret i kolorektale kræftceller og fremmer deres proliferation via aktivering af NF-κB-signalering.
En undersøgelse i *International Journal of Molecular Sciences* (2021) undersøgte den synergistiske effekt af et bispecifikt antistof (ABL001) og kemoterapeutiske lægemidler på tumorprogression i SW620-xenotransplantatmodeller.
Denne artikel er offentliggjort i tidsskriftet Cells (2018). Her blev Bacopa monnieri-ekstraktet, Bacopaside II, undersøgt for dets antitumoraktiviteter i SW-620-celler og andre kolorektale kræftceller.
Ressourcer til SW-620-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
Her følger nogle online-ressourcer om SW-620-tyktarmskræftcellerne.
- SW-620-transfektion: Denne artikel beskriver kort protokollen for stabil transfektion af SW-620-cellelinjen.
Følgende link indeholder protokollen for SW-620-cellekultur.
- SW-620-cellekulturprotokol: Dette link giver grundlæggende oplysninger om SW-620-cellelinjen. Det vil også hjælpe dig med at lære protokollen for subkultivering af SW-620-celler og håndtering af kryopræserverede og prolifererende SW-620-kulturer.
- Protokoller til cellekultur: Denne video er en fremragende kilde til at lære protokoller for passagering, nedfrysning og optøning af adhærente celler.
Ofte stillede spørgsmål om SW620-celler
SW620-celler er humane kolorektale adenokarcinomceller fra lymfeknudemetastaser fra en patient med tyktarmskræft, hvilket gør dem vigtige for kræftforskningen.
SW620-celler har generelt en diameter på mellem 15 og 30 mikrometer, men det kan variere afhængigt af dyrkningsforholdene.
SW620-celler udviser flere mutationer, herunder i TP53-genet. Disse mutationer kan påvirke cellernes morfologi, hvilket fører til forskellige former og størrelser i populationen.
SW620- og SW480-celler stammer begge fra adenokarcinomer i tyktarmen, men SW620-cellerne kommer fra et metastatisk sted, mens SW480-cellerne stammer fra den primære tumor. Denne forskel kan påvirke deres genetiske sammensætning, opførsel i kultur og reaktion på behandlinger.
SW620-celler er vigtige i studiet af tumorigenese, især på grund af deres evne til at danne tumorer i xenotransplanterede musemodeller og deres udtryk for kræftstamcellemarkører som CD133.
Ja, SW620-celler bruges til at studere celledødsveje, herunder apoptose og anoikis, når de reagerer på forskellige kræftlægemidler og miljøforhold.
SW620-cellernes høje metastatiske potentiale og deres oprindelse fra en metastatisk lymfeknude gør dem til en relevant model til undersøgelse af spredning af tyktarmskræft.
Flowcytometri gør det muligt for forskere at analysere SW620-cellernes egenskaber, herunder CD133-ekspressionsmønstre og omfanget af apoptose eller følsomhed over for anoikis.
SW620-celler har et højt tumorgenetisk potentiale, når de introduceres i immundefekte xenograft-musemodeller, hvilket gør dem værdifulde til in vivo-undersøgelser af kræftprogression.
Referencer
- Siekmann, W., et al., Effekt af lidocain og ropivacain på primære (SW480) og metastatiske (SW620) tyktarmskræftcellelinjer. Oncol Lett, 2019. 18(1): s. 395-401.
- Hewitt, R.E., et al., Validering af en model for udvikling af tyktarmskræft. J Pathol, 2000. 192(4): s. 446-54.
- Thangaiyan, R., et al., Kras-mutationssubtyper påvirker tydeligt kolorektal kræftcellers følsomhed over for FL118, en ny hæmmer af survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 og MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): s. 7458.
- Petrocelli, G., et al., Molekyler i æteriske olier fra planter til forebyggelse og behandling af kolorektal kræft (CRC). Molecules, 2021. 26(4): s. 885.
- Yang, Z., et al., GRHL2 hæmmer udviklingen og metastaseringen af kolorektal kræft ved at undertrykke den epitel-mesenkymale overgang. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): s. 1195-1205.