RBL-2H3-celler – RBL-2H3’s betydning for allergiske reaktioner og immunologiske undersøgelser
RBL-2H3-cellelinjen er en basofil leukæmicellelinje afledt af rotter, der anvendes i immunologisk forskning. Den fungerer som et modelsystem til undersøgelse af mastcellers fysiologi, adfærd og funktioner. Disse celler anvendes også til at undersøge allergiske reaktioner, immunologiske processer samt lægemiddelafprøvning og -udvikling.
- Vækstmedium
- EMEM-medium indeholdende 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og EBSS-salt anvendes til dyrkning af RBL-2H3-cellerne. Mediet bør udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for RBL-2H3-mastceller er ca. 50–60 timer.
- Væksttype
- RBL-2H3 er en adhærent cellelinje.
- Biosikkerhedsniveau
- BSL-2
- Kan bestilles hos
- Cytion — Bestil RBL-2H3
- RBL-2H3-celler: Oprindelse og generelle egenskaber
- RBL-2H3-celler: Oplysninger om dyrkning
- Fordele og begrænsninger ved RBL-2H3-basofilcellelinjen
- RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnesten i immunologisk forskning
- RBL-2H3-cellelinjen: Vigtige ofte stillede spørgsmål til forskere
- Referencer
- RBL-2H3-cellelinjen til avanceret immunologisk forskning
- RBL-2H3-celler: Forskningspublikationer
- Ressourcer til RBL-2H3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
- Ofte stillede spørgsmål
RBL-2H3-celler: Oprindelse og generelle egenskaber
Inden du anvender en basofilcellelinje i din forskning, bør du kende dens oprindelse og generelle egenskaber. Dette afsnit af artiklen giver dig grundlæggende information om RBL-2H3-celler. For eksempel: Hvad er RBL-2H3-mastceller? Hvorfor anvende RBL-2H3-celler? Hvad er RBL-2H3-celler i basofil leukæmi hos rotter? Hvordan ser RBL-2H3-morfologien ud? Er RBL-2H3-celler udødelige?
- RBL-2H3 er basofile leukæmiceller, der stammer fra basofile celler fra Wistar-rotter og blev isoleret i 1978 på National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
- RBL-2H3-celler besidder c-kit-receptortyrosinkinase og mastcelleprotease II (RMCP-II)-receptorer, hvilket gør dem til en potentiel mastcellemodel. Derfor kaldes de almindeligvis mastceller på trods af deres oprindelse fra rottebasofiler [1].
- De frigiver histamin og andre mediatorer ved aktivering og udtrykker IgE-receptorer med høj affinitet.
- RBL-2H3-celler udviser en fibroblastlignende morfologi.
RBL-2H3-celler: Oplysninger om dyrkning
Dette afsnit vil hjælpe dig med at lære nogle vigtige aspekter ved dyrkning af RBL-2H3-cellelinjen. Du vil få viden om: Hvad er RBL-2H3-cellernes fordoblingstid? Hvad er udsåningstætheden for RBL-2H3-celler? Hvad er dyrkningsprotokollen for RBL-2H3-celler? Hvad er frysemediet til RBL-2H3-cellelinjen?
Vigtige punkter ved dyrkning af RBL-2H3-celler
Populationsfordoblingstid:
Fordoblingstiden for RBL-2H3-mastceller er ca. 50–60 timer.
Adhærent eller i suspension:
RBL-2H3 er en adhærent cellelinje.
Subkultiveringsforhold:
For RBL-2H3-celler holdes subkultiveringsforholdet mellem 1:2 og 1:4. Adhærente celler vaskes med en magnesium- og calciumfri 1 x PBS-opløsning. Der tilsættes Accutase til passageringsopløsningen, og cellerne opbevares ved stuetemperatur i 10 minutter for at løsne sig fra bunden af dyrkningsbeholderen. Der tilsættes frisk væske, og cellerne centrifugeres. De høstede celler resuspenderes omhyggeligt i frisk væske og hældes i nye kolber indeholdende vækstmedium.
Vækstmedium:
EMEM-medium indeholdende 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃ og EBSS-salt anvendes til dyrkning af RBL-2H3-cellerne. Mediet bør udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:
RBL-2H3-celler dyrkes i en befugtet inkubator indstillet til 37 °C og tilsluttet en 5 % CO₂-kilde.
Opbevaring:
Cellerne opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk fryser for at sikre cellernes levedygtighed på lang sigt.
Fryseproces og medium:
CM-1- eller CM-ACF-frysemedier anvendes til at fryse RBL-2H3-celler ved hjælp af en langsom fryseproces. Kort fortalt tillader denne metode et temperaturfald på 1 °C pr. minut og beskytter cellerne mod chok.
Optøningsproces:
RBL-2H3-celler optøs i et forindstillet vandbad (37 °C) i ca. 60 sekunder. Derefter overføres cellerne til frisk dyrkningsmedium og centrifugeres. Dette trin er afgørende for at fjerne komponenter fra frysemediet. Derefter resuspenderes cellepelleten i et vækstmedium, og cellerne overføres til en kolbe til dyrkning.
Biosikkerhedsniveau:
RBL-2H3-cellerne skal opbevares i laboratorier med biosikkerhedsniveau 1.
Udgivet: 2023 | Senest revideret: maj 2026
Fordele og begrænsninger ved RBL-2H3-basofilcellelinjen
RBL-2H3-celler anvendes ofte i immunologisk forskning. Dette afsnit beskriver deres primære fordele og begrænsninger.
Fordele
- Let at dyrke: RBL-2H3-celler kan let dyrkes og opretholdes i laboratoriemiljøet. Dette muliggør omkostningseffektive og reproducerbare eksperimenter, hvilket gør dem til et populært valg til indledende studier inden for immunologi.
Begrænsninger
- Ikke-menneskelig oprindelse: Da RBL-2H3-celler stammer fra basofiler fra rotter, efterligner de muligvis ikke menneskelige biologiske processer nøjagtigt, hvilket kan begrænse deres anvendelighed i menneskespecifikke forskningsstudier. Dette kræver en forsigtig fortolkning af data, når resultaterne ekstrapoleres til menneskelige systemer.
- Forenklet mastcellemodel: Selvom disse celler udgør en grundlæggende model til undersøgelse af mastcellers funktioner, repræsenterer de ikke fuldt ud den komplekse natur af mastcellernes interaktioner i det menneskelige immunsystem. Derfor kan de muligvis ikke på tilfredsstillende vis modellere mastcellernes mangesidede roller i immunresponser eller sygdomstilstande in vivo.
RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnesten i immunologisk forskning
Forskning i basofiler og mastceller ved hjælp af RBL-2H3-cellelinjen
RBL-2H3-cellelinjen, der stammer fra Rattus norvegicus, fungerer som en central model til at studere basofilers og mastcellers biologi. Disse mastceller fra rotter giver vigtig indsigt i mastcellernes frigivelse af mediatorer, hvilket er afgørende for forståelsen af allergiske tilstande såsom allergisk rhinitis. Gennem disse celler undersøger forskere dynamikken i cellereceptorer og etableringen af immunologiske synapser, som er centrale for immunsystemets reaktion på allergener. En interessant undersøgelse, der blev offentliggjort i 2019, anvendte RBL-2H3-cellelinjen og undersøgte mekanismerne bag pseudoallergiske reaktioner fremkaldt af en Qingkailing-injektion. Undersøgelsen viste, at PI3K-RAC1-signalkaskaden delvist udløser denne allergiske reaktion i cellerne [2].
Dynamikken i immunologiske synapser i allergiforskning
RBL-2H3-celler anvendes i vid udstrækning i immunologisk forskning og er særligt effektive til at undersøge dynamikken i immunologiske synapser. Dette bidrager til at belyse immunsystemets kommunikationsprocesser og har anvendelse i studiet af både perifere blod- og peritoneale mastceller. Sådan forskning er afgørende for en omfattende forståelse af immunresponsen i både systemiske og lokaliserede sammenhænge.
Lægemiddelscreening og toksicitetstest
I lægemiddelscreening og -test udnyttes RBL-cellernes reaktionsdygtighed over for forskellige stimuli, herunder undersøgelsen af, hvordan H₂O₂ hæmmer IgE-medierede reaktioner. Disse celler spiller en afgørende rolle i udviklingen af behandlinger mod sygdomme som streptokokinfektioner, hvor streptokokker fra mitis-gruppen hæmmer mastcelleaktivering. Derudover vurderer forskere de toksiske virkninger af forskellige stoffer, herunder kemikalier, lægemidler og nanopartikler, ved hjælp af denne RBL 2H3-mc-model. For eksempel vurderede en nylig undersøgelse (2022) cytotoksiciteten af polystyren-mikroplast på RBL-2H3-celler. Forskerne fandt, at mikroplast beskadiger RBL-2H3-cellernes organeller og fremmer celledød [3]. En anden undersøgelse fra 2021 vurderede det antiallergiske og antiinflammatoriske potentiale af et naturprodukt, neferin, ved hjælp af RBL-2H3-mc-modellen. Undersøgelsen afslørede forbindelsens gode antiallergiske og antiinflammatoriske egenskaber [4].
Avancerede metoder til immunologisk måling
Den konsistente og målbare frigivelse af mediatorer fra RBL-2H3-celler gør dem ideelle til praktisk fluorometri, hvilket muliggør præcise og nøjagtige målinger, der er afgørende for sygdomsforskning og vurdering af terapeutiske midler.
RBL-2H3-cellelinjen, der stammer fra Rattus norvegicus, er et uvurderligt redskab i både grundforskning og anvendt forskning inden for immunologi. Den giver store muligheder for at fremme vores viden om og behandling af immunologiske sygdomme.
RBL-2H3-cellelinje til avanceret immunologisk forskning
RBL-2H3-celler: Forskningspublikationer
Her følger nogle spændende forskningspublikationer om RBL-2H3-mastcellerne:
Narirutins hæmmende virkning på degranulering af RBL-2H3-celler
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i tidsskriftet Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Undersøgelsen foreslog, at narirutin, et naturligt stof, udøver hæmmende virkninger på degranulering af RBL-2H3-celler via regulering af NF-κB, MAPK og tyrosinkinase-signalvejen.
Denne forskning, offentliggjort i International Journal of Molecular Sciences (2020), foreslog, at apigenin-forbindelsen i væsentlig grad undertrykker allergiske og inflammatoriske reaktioner i RBL-2H3- og RAW264.7-celler. Derfor kan det fungere som et potentielt middel til bekæmpelse af immunrelaterede sygdomme.
Denne forskningsartikel i International Journal of Molecular Sciences (2021) vurderede de antiallergiske og antiinflammatoriske virkninger af et naturprodukt, saponarin, ved hjælp af forskellige cellelinjer, herunder RBL-2H3.
Denne undersøgelse, offentliggjort i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014), fandt, at ekstrakter af Benchalokawichian og visse aktive bestanddele udøver potentielle hæmmende virkninger på frigivelsen af β-hexosaminidase fra RBL-2H3-celler.
Denne artikel blev offentliggjort i 2018 i tidsskriftet *International Journal of Biological Macromolecules*. Undersøgelsen fastslog, at spirulina maxima, et naturprodukt, hæmmer degranulering af RBL 2H3 ved at forhindre fosforylering af MAPK'er og AKT.
Ressourcer til RBL-2H3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
RBL-2H3 er en meget udbredt mastcellelinje. De tilgængelige ressourcer vedrørende dyrknings- og transfektionsprotokoller for RBL-2H3 er nævnt her:
- RBL-2H3 MC-model: Denne forskningsartikel indeholder protokoller til vedligeholdelse af RBL-2H3-kulturer og til transfektion af RBL-2H3.
Her er nogle ressourcer, der forklarer protokollen for RBL-2H3-cellekultivering:
- RBL-2H3-celler: Denne hjemmeside er nyttig, hvis du vil lære cellekulturprotokoller for RBL-2H3-cellelinjen. Desuden indeholder den oplysninger om RBL-2H3-cellemedier og dyrkningsbetingelser.
RBL-2H3-cellelinje: Vigtige ofte stillede spørgsmål til forskere
Referencer
- Passante, E. og N. Frankish, RBL-2H3-cellelinjen: dens oprindelse og egnethed som model for mastcellen. Inflamm Res, 2009. 58(11): s. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudoallergisk reaktion forårsaget af Qingkailing-injektion delvist via PI3K-Rac1-signalvejen i RBL-2H3-celler. Toxicology Research, 2019. 8(3): s. 353-360.
- Liu, L., et al., Mikro- (nano-)plast af polystyren beskadiger organellerne i RBL-2H3-celler og fremmer MOAP-1 til at inducere apoptose. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: s. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Neferins antiallergiske og antiinflammatoriske virkninger på RBL-2H3-celler. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): s. 10994.