RBL-2H3-celler – RBL-2H3’s betydning for allergiske reaktioner og immunologiske undersøgelser
RBL-2H3-cellelinjen er en basofil leukæmicellelinje afledt af rotter, der anvendes i immunologisk forskning. Den fungerer som et modelsystem til undersøgelse af mastcellers fysiologi, adfærd og funktioner. Disse celler anvendes også til at undersøge allergiske reaktioner, immunologiske processer samt lægemiddelafprøvning og -udvikling.
- Vækstmedium
- EMEM-medium indeholdende 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og EBSS-salt anvendes til dyrkning af RBL-2H3-cellerne. Mediet bør udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for RBL-2H3-mastceller er ca. 50–60 timer.
- Væksttype
- RBL-2H3 er en adhærent cellelinje.
- Biosikkerhedsniveau
- BSL-2
- Kan bestilles hos
- Cytion — Bestil RBL-2H3
- RBL-2H3-celler: Oprindelse og generelle egenskaber
- RBL-2H3-celler: Oplysninger om dyrkning
- Fordele og begrænsninger ved RBL-2H3-basofilcellelinjen
- RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnesten i immunologisk forskning
- RBL-2H3-cellelinjen: Vigtige ofte stillede spørgsmål til forskere
- Referencer
- RBL-2H3-cellelinjen til avanceret immunologisk forskning
- RBL-2H3-celler: Forskningspublikationer
- Ressourcer til RBL-2H3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
- Ofte stillede spørgsmål
RBL-2H3-celler: Oprindelse og generelle egenskaber
Inden du anvender en basofilcellelinje i din forskning, bør du kende dens oprindelse og generelle egenskaber. Dette afsnit af artiklen giver dig grundlæggende information om RBL-2H3-celler. For eksempel: Hvad er RBL-2H3-mastceller? Hvorfor anvende RBL-2H3-celler? Hvad er RBL-2H3-celler i basofil leukæmi hos rotter? Hvordan ser RBL-2H3-morfologien ud? Er RBL-2H3-celler udødelige?
- RBL-2H3 er basofile leukæmiceller, der stammer fra basofile celler fra Wistar-rotter og blev isoleret i 1978 på National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
- RBL-2H3-celler besidder c-kit-receptortyrosinkinase og mastcelleprotease II (RMCP-II)-receptorer, hvilket gør dem til en potentiel mastcellemodel. Derfor kaldes de almindeligvis mastceller på trods af deres oprindelse fra rottebasofiler [1].
- De frigiver histamin og andre mediatorer ved aktivering og udtrykker IgE-receptorer med høj affinitet.
- RBL-2H3-celler udviser en fibroblastlignende morfologi.
RBL-2H3-celler: Oplysninger om dyrkning
Dette afsnit vil hjælpe dig med at lære nogle vigtige aspekter ved dyrkning af RBL-2H3-cellelinjen. Du vil få viden om: Hvad er RBL-2H3-cellernes fordoblingstid? Hvad er udsåningstætheden for RBL-2H3-celler? Hvad er dyrkningsprotokollen for RBL-2H3-celler? Hvad er frysemediet til RBL-2H3-cellelinjen?
Vigtige punkter ved dyrkning af RBL-2H3-celler
Populationsfordoblingstid:
Fordoblingstiden for RBL-2H3-mastceller er ca. 50–60 timer.
Adhærent eller i suspension:
RBL-2H3 er en adhærent cellelinje.
Subkultiveringsforhold:
For RBL-2H3-celler holdes subkultiveringsforholdet mellem 1:2 og 1:4. Adhærente celler vaskes med en magnesium- og calciumfri 1 x PBS-opløsning. Der tilsættes Accutase til passageringsopløsningen, og cellerne opbevares ved stuetemperatur i 10 minutter for at løsne sig fra bunden af dyrkningsbeholderen. Der tilsættes frisk væske, og cellerne centrifugeres. De høstede celler resuspenderes omhyggeligt i frisk væske og hældes i nye kolber indeholdende vækstmedium.
Vækstmedium:
EMEM-medium indeholdende 10 % FBS, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃ og EBSS-salt anvendes til dyrkning af RBL-2H3-cellerne. Mediet bør udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:
RBL-2H3-celler dyrkes i en befugtet inkubator indstillet til 37 °C og tilsluttet en 5 % CO₂-kilde.
Opbevaring:
Cellerne opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk fryser for at sikre cellernes levedygtighed på lang sigt.
Fryseproces og medium:
CM-1- eller CM-ACF-frysemedier anvendes til at fryse RBL-2H3-celler ved hjælp af en langsom fryseproces. Kort fortalt tillader denne metode et temperaturfald på 1 °C pr. minut og beskytter cellerne mod chok.
Optøningsproces:
RBL-2H3-celler optøs i et forindstillet vandbad (37 °C) i ca. 60 sekunder. Derefter overføres cellerne til frisk dyrkningsmedium og centrifugeres. Dette trin er afgørende for at fjerne komponenter fra frysemediet. Derefter resuspenderes cellepelleten i et vækstmedium, og cellerne overføres til en kolbe til dyrkning.
Biosikkerhedsniveau:
RBL-2H3-cellerne skal opbevares i laboratorier med biosikkerhedsniveau 1.
Udgivet: 2023 | Senest revideret: maj 2026
Fordele og begrænsninger ved RBL-2H3-basofilcellelinjen
RBL-2H3-celler anvendes ofte i immunologisk forskning. Dette afsnit beskriver deres primære fordele og begrænsninger.
Fordele
- Let at dyrke: RBL-2H3-celler kan let dyrkes og opretholdes i laboratoriemiljøet. Dette muliggør omkostningseffektive og reproducerbare eksperimenter, hvilket gør dem til et populært valg til indledende studier inden for immunologi.
Begrænsninger
- Ikke-menneskelig oprindelse: Da RBL-2H3-celler stammer fra basofiler fra rotter, efterligner de muligvis ikke menneskelige biologiske processer nøjagtigt, hvilket kan begrænse deres anvendelighed i menneskespecifikke forskningsstudier. Dette kræver en forsigtig fortolkning af data, når resultaterne ekstrapoleres til menneskelige systemer.
- Forenklet mastcellemodel: Selvom disse celler udgør en grundlæggende model til undersøgelse af mastcellers funktioner, repræsenterer de ikke fuldt ud den komplekse natur af mastcellernes interaktioner i det menneskelige immunsystem. Derfor kan de muligvis ikke på tilfredsstillende vis modellere mastcellernes mangesidede roller i immunresponser eller sygdomstilstande in vivo.
RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnesten i immunologisk forskning
Forskning i basofiler og mastceller ved hjælp af RBL-2H3-cellelinjen
RBL-2H3-cellelinjen, der stammer fra Rattus norvegicus, fungerer som en central model til at studere basofilers og mastcellers biologi. Disse mastceller fra rotter giver vigtig indsigt i mastcellernes frigivelse af mediatorer, hvilket er afgørende for forståelsen af allergiske tilstande såsom allergisk rhinitis. Gennem disse celler undersøger forskere dynamikken i cellereceptorer og etableringen af immunologiske synapser, som er centrale for immunsystemets reaktion på allergener. En interessant undersøgelse, der blev offentliggjort i 2019, anvendte RBL-2H3-cellelinjen og undersøgte mekanismerne bag pseudoallergiske reaktioner fremkaldt af en Qingkailing-injektion. Undersøgelsen viste, at PI3K-RAC1-signalkaskaden delvist udløser denne allergiske reaktion i cellerne [2].
Dynamikken i immunologiske synapser i allergiforskning
RBL-2H3-celler anvendes i vid udstrækning i immunologisk forskning og er særligt effektive til at undersøge dynamikken i immunologiske synapser. Dette bidrager til at belyse immunsystemets kommunikationsprocesser og har anvendelse i studiet af både perifere blod- og peritoneale mastceller. Sådan forskning er afgørende for en omfattende forståelse af immunresponsen i både systemiske og lokaliserede sammenhænge.
Lægemiddelscreening og toksicitetstest
I lægemiddelscreening og -test udnyttes RBL-cellernes reaktionsdygtighed over for forskellige stimuli, herunder undersøgelsen af, hvordan H₂O₂ hæmmer IgE-medierede reaktioner. Disse celler spiller en afgørende rolle i udviklingen af behandlinger mod sygdomme som streptokokinfektioner, hvor streptokokker fra mitis-gruppen hæmmer mastcelleaktivering. Derudover vurderer forskere de toksiske virkninger af forskellige stoffer, herunder kemikalier, lægemidler og nanopartikler, ved hjælp af denne RBL 2H3-mc-model. For eksempel vurderede en nylig undersøgelse (2022) cytotoksiciteten af polystyren-mikroplast på RBL-2H3-celler. Forskerne fandt, at mikroplast beskadiger RBL-2H3-cellernes organeller og fremmer celledød [3]. En anden undersøgelse fra 2021 vurderede det antiallergiske og antiinflammatoriske potentiale af et naturprodukt, neferin, ved hjælp af RBL-2H3-mc-modellen. Undersøgelsen afslørede forbindelsens gode antiallergiske og antiinflammatoriske egenskaber [4].
Avancerede metoder til immunologisk måling
Den konsistente og målbare frigivelse af mediatorer fra RBL-2H3-celler gør dem ideelle til praktisk fluorometri, hvilket muliggør præcise og nøjagtige målinger, der er afgørende for sygdomsforskning og vurdering af terapeutiske midler.
RBL-2H3-cellelinjen, der stammer fra Rattus norvegicus, er et uvurderligt redskab i både grundforskning og anvendt forskning inden for immunologi. Den giver store muligheder for at fremme vores viden om og behandling af immunologiske sygdomme.
RBL-2H3-cellelinje til avanceret immunologisk forskning
RBL-2H3-celler: Forskningspublikationer
Her følger nogle spændende forskningspublikationer om RBL-2H3-mastcellerne:
Narirutins hæmmende virkning på degranulering af RBL-2H3-celler
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i tidsskriftet Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Undersøgelsen foreslog, at narirutin, et naturligt stof, udøver hæmmende virkninger på degranulering af RBL-2H3-celler via regulering af NF-κB, MAPK og tyrosinkinase-signalvejen.
Denne forskning, offentliggjort i International Journal of Molecular Sciences (2020), foreslog, at apigenin-forbindelsen i væsentlig grad undertrykker allergiske og inflammatoriske reaktioner i RBL-2H3- og RAW264.7-celler. Derfor kan det fungere som et potentielt middel til bekæmpelse af immunrelaterede sygdomme.
Denne forskningsartikel i International Journal of Molecular Sciences (2021) vurderede de antiallergiske og antiinflammatoriske virkninger af et naturprodukt, saponarin, ved hjælp af forskellige cellelinjer, herunder RBL-2H3.
Denne undersøgelse, offentliggjort i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014), fandt, at ekstrakter af Benchalokawichian og visse aktive bestanddele udøver potentielle hæmmende virkninger på frigivelsen af β-hexosaminidase fra RBL-2H3-celler.
Denne artikel blev offentliggjort i 2018 i tidsskriftet *International Journal of Biological Macromolecules*. Undersøgelsen fastslog, at spirulina maxima, et naturprodukt, hæmmer degranulering af RBL 2H3 ved at forhindre fosforylering af MAPK'er og AKT.
Ressourcer til RBL-2H3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
RBL-2H3 er en meget udbredt mastcellelinje. De tilgængelige ressourcer vedrørende dyrknings- og transfektionsprotokoller for RBL-2H3 er nævnt her:
- RBL-2H3 MC-model: Denne forskningsartikel indeholder protokoller til vedligeholdelse af RBL-2H3-kulturer og til transfektion af RBL-2H3.
Her er nogle ressourcer, der forklarer protokollen for RBL-2H3-cellekultivering:
- RBL-2H3-celler: Denne hjemmeside er nyttig, hvis du vil lære cellekulturprotokoller for RBL-2H3-cellelinjen. Desuden indeholder den oplysninger om RBL-2H3-cellemedier og dyrkningsbetingelser.
RBL-2H3-cellelinje: Vigtige ofte stillede spørgsmål til forskere
RBL-2H3-celler er en cellelinje, der oprindeligt stammer fra basofil leukæmi hos rotter, og som ofte bruges som model til at studere mastcellebiologi, især i forbindelse med allergiske reaktioner og immunologisk forskning. Disse celler er værdifulde til at analysere basofil- og mastcellemediatorfrigivelse, cellereceptordynamik og dannelsen af immunologiske synapser.
Ja, ved aktivering er RBL-2H3-celler kendt for at frigive histamin og andre inflammatoriske mediatorer. Denne egenskab gør dem meget nyttige til undersøgelser af allergiske reaktioner, da histaminfrigivelse er et centralt element i allergiske reaktioner og inflammatoriske processer.
Fordoblingstiden for RBL-2H3-celler varierer afhængigt af dyrkningsforholdene, men er generelt omkring 24 til 36 timer. Optimale vækstbetingelser som temperatur, pH og næringsstoftilgængelighed kan dog påvirke fordoblingstiden.
Selvom RBL-2H3-celler stammer fra rotter, og der er iboende forskelle mellem arterne, bruges de stadig i vid udstrækning som model til at studere mekanismer, der er relevante for allergiske reaktioner hos mennesker. Resultater fra RBL-2H3-cellestudier skal dog fortolkes omhyggeligt, når de ekstrapoleres til menneskelige systemer.
H2O2, eller hydrogenperoxid, har vist sig at hæmme IgE-medieret degranulering i RBL-2H3-celler. Denne effekt er vigtig for forskere, der studerer moduleringen af allergiske reaktioner på celleniveau.
Ja, RBL-2H3-celler bruges i vid udstrækning til screening af lægemidler, især for forbindelser, der er rettet mod allergiske og inflammatoriske veje. De bruges til at evaluere effekten og sikkerheden af potentielle terapeutiske midler samt deres anti-allergiske og anti-inflammatoriske egenskaber.
Referencer
- Passante, E. og N. Frankish, RBL-2H3-cellelinjen: dens oprindelse og egnethed som model for mastcellen. Inflamm Res, 2009. 58(11): s. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudoallergisk reaktion forårsaget af Qingkailing-injektion delvist via PI3K-Rac1-signalvejen i RBL-2H3-celler. Toxicology Research, 2019. 8(3): s. 353-360.
- Liu, L., et al., Mikro- (nano-)plast af polystyren beskadiger organellerne i RBL-2H3-celler og fremmer MOAP-1 til at inducere apoptose. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: s. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Neferins antiallergiske og antiinflammatoriske virkninger på RBL-2H3-celler. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): s. 10994.