MG-63-cellelinjen: En detaljeret vejledning til MG-63-celler i forskningen i osteosarkom
MG-63-celler er fibroblastlignende humane osteosarkomceller, der tilbyder en bred vifte af forskningsanvendelser inden for det biomedicinske felt. Dette kan omfatte undersøgelse af knoglerelaterede processer såsom knogleudvikling, differentiering osv. Derudover fungerer MG-63-cellelinjen som en velegnet in vitro-model til at undersøge knoglecellers levedygtighed, proliferation og adhæsion.
Generelle egenskaber og oprindelse af MG-63-cellelinjen
Dette afsnit af artiklen vil omhandle MG-63-cellelinjens oprindelse og generelle egenskaber. Du vil lære: Hvad er MG-63-cellelinjen? Hvad er MG-63-cellelinjens oprindelse? Hvad er MG-63-cellernes morfologi? Hvad er størrelsen på MG-63-cellerne?
- MG-63 er en type osteoblastcellelinje, der stammer fra knoglen hos en 14-årig mandlig osteosarkompatient (kaukasisk). A. Billiau og kolleger deponerede denne cellelinje i 1977.
- MG-63-cellelinjen har en morfologi, der ligner fibroblastceller.
- Humane osteosarkomceller (MG-63) udviser hypotriploidi. Det modale kromosomantal for disse celler er 66, hvilket forekommer hos ca. 44 % af cellepopulationen. Højere ploidier er også rapporteret hos næsten 2 % af cellepopulationen. Derudover forekommer 18–19 markørkromosomer i stort antal i alle celler.
Oplysninger om dyrkning af MG-63-cellelinjen
Vigtige oplysninger om kravene til dyrkning af cellelinjer kan gøre dit arbejde lettere. Dette afsnit af artiklen opregner alle de vigtigste punkter, der er afgørende for dyrkning og vedligeholdelse af MG-63-celler. Her vil du lære: Hvad er fordoblingstiden for MG-63-celler? Hvilke vækstmedier anvendes til MG-63-celler? Hvad er udsåningstætheden for MG-63-celler?
Vigtige punkter ved dyrkning af MG-63-celler
Fordoblingstid
Fordoblingstiden for MG-63-celler ligger mellem 28 og 38 timer, afhængigt af dyrkningsbetingelserne.
Vækstegenskaber
MG-63 er en adhærent cellelinje.
Udsåningstæthed
En celletæthed på 1 x 104 celler/cm2 anbefales til MG-63-celler. Adhærente celler vaskes med 1 x phosphatbuffersaltvand (PBS) uden magnesium og calcium. Disse celler inkuberes derefter med dissociationsopløsning (Accutase), tilsættes frisk medium og centrifugeres. Den opsamlede cellepellet resuspenderes i frisk væske og overføres til en ny kolbe til vækst.
Vækstmedium
DMEM- eller Ham's F12-medier anvendes til dyrkning af MG-63-celler. Disse medier kan tilsættes 5 % føtal bovint serum (FBS), 3,0 g/L glukose, 2,5 mM L-glutamin og 1,2 g/L NaHCO3 for at opnå optimal cellevækst. Mediet bør udskiftes 2-3 gange om ugen.
Vækstbetingelser
Der kræves en befugtet inkubator ved 37 °C og en CO₂-tilførsel på 5 % til dyrkning af MG-63-celler.
Opbevaring
Disse osteoblastlignende celler kan opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved temperaturer under -150 °C for at bevare cellernes levedygtighed.
Fryseproces og medium
CM-1- eller CM-ACF-medier anvendes til nedfrysning af MG-63-celler. Der anbefales generelt en langsom nedfrysningsproces for at forhindre, at cellerne udsættes for chok, og for at beskytte deres levedygtighed.
Optøningsproces
Frosne celler inkuberes i 40 til 60 sekunder i et forvarmet vandbad (37 grader Celsius). Cellerne resuspenderes i frisk vækstmedium og hældes over i en ny kolbe. Efter 24 timers inkubation udskiftes mediet for at fjerne komponenter fra frysemediet.
Biosikkerhedsniveau
Der kræves laboratorieforhold på biosikkerhedsniveau 1 til håndtering og vedligeholdelse af MG-63-kulturer.
- MG-63-cellelinje: Fordele og ulemper
- Oplysninger om dyrkning af MG-63-cellelinjen
- Bestil dine MG-63-celler i dag
- Anvendelser af MG-63-celler
- Forskningspublikationer om MG-63-celler
- Ressourcer til MG-63-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
- Ofte stillede spørgsmål om MG-63-celler
- Referencer
- Ofte stillede spørgsmål
MG-63-cellelinjen: Fordele og ulemper
MG-63 er en udbredt osteoblastcellelinje. Den har flere fordele og ulemper forbundet med sig. Her vil vi nævne nogle af de vigtigste fordele og ulemper ved MG-63-cellelinjen.
Fordele
Fordelene ved MG-63-cellerne er:
-
Osteoblastlignende egenskaber
MG-63-cellelinjen udviser osteoblastlignende egenskaber, hvilket gør den velegnet til at studere knoglerelaterede processer og sygdomme. Den kan også bruges til at undersøge celleadhæsion, proliferation og levedygtighed på titaniumoverflader [1].
-
Egnethed til transfektion
MG-63-celler anvendes i vid udstrækning i transfektionsstudier, hvilket muliggør forskning i genekspression, funktion og cellulære processer.
-
Høj interferonproduktion
MG-63-celler er i stand til at producere store mængder interferon. De kan give et 3,7 gange højere interferonutbytte pr. cm² end diploide fibroblaster, når de induceres med cycloheximid, polyinosinsyre-polycytidylsyre og actinomycin [2].
Ulemper
Ulemperne ved MG-63 B-celler er:
-
Heterogenitet
MG-63-celler udviser heterogenitet inden for cellepopulationen, hvilket kan påvirke reproducerbarheden.
-
Tumorcelle-linje
MG-63 er en kræftcellelinje og repræsenterer muligvis ikke fuldt ud normal celleadfærd og fysiologi, hvilket begrænser dens anvendelse i visse laboratorieforsøg.
Bestil dine MG-63-celler i dag
Anvendelser af MG-63-celler
MG-63-celler er et fremragende forskningsværktøj. De byder på mange lovende anvendelsesmuligheder inden for forskningsområdet. Her er en oversigt over nogle af de vigtigste forskningsanvendelser af MG-63-celler.
- Undersøgelse af knoglerelaterede processer/sygdomme: MG-63-celler er osteoblastlignende (knogledannende) celler. Derfor anvendes disse celler i vid udstrækning til at undersøge knoglesygdomme og cellulære processer, herunder udvikling, differentiering og mineralisering. Derudover anvendes cellerne i vid udstrækning til at screene lægemidler, der fremmer knogledannelse. I en undersøgelse blev MG-63-celler anvendt til at undersøge det terapeutiske potentiale af grønt syntetiserede zinkoxid-nanopartikler fra Scutellaria baicalensis med hensyn til knoglecellers proliferation, mineralisering og differentiering [3].
- Kræftforskning: MG-63-celler anvendes i vid udstrækning inden for kræftforskning. Flere studier har anvendt disse osteosarkomceller til at forstå kræftsignalveje og evaluere lægemidlers cytotoksiske og terapeutiske potentiale. En undersøgelse fra 2019 undersøgte de antitumoregenskaber, som det naturlige stof Tomentosin udviser, ved hjælp af MG-63-celler. Resultaterne viste, at Tomentosin udviser kræftbekæmpende virkninger ved at udløse produktionen af reaktive iltarter (ROS) i cellerne [4].
Forskningspublikationer om MG-63-celler
Nedenfor følger nogle forskningspublikationer, der omhandler MG-63, den osteoblastlignende cellelinje.
miR-192 øger følsomheden over for lægemidlet methotrexat hos MG-63-osteosarkom-kræftceller
Denne artikel blev offentliggjort i tidsskriftet *Pathology - Research and Practice* i 2020. I denne forskning blev MG-63-celler anvendt til at undersøge de molekylære mekanismer, der er involveret i lægemiddelresistens i osteosarkom-kræftceller (MG-63). Resultaterne viste, at miRNA-192 kan være et nyttigt mål for at overvinde methotrexat-lægemiddelresistens i osteosarkom.
Denne forskning er offentliggjort i tidsskriftet *Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology* (2020). Undersøgelsen rapporterede om det kræftbekæmpende potentiale af grønt syntetiserede zinkoxid-nanopartikler (ZnONPs) fra *Rehmanniae Radix* mod knoglekræftceller (MG-63).
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i 2021 i tidsskriftet Materials Science and Engineering. Undersøgelsen fremlagde de knoglehelende egenskaber ved biosyntetiserede zinkoxid-nanopartikler fra planten Scutellaria baicalensis ved anvendelse af MG-63-cellelinjen.
Denne undersøgelse blev offentliggjort i tidsskriftet *Onco Targets and Therapy* i 2021. Forskningen påviste, at curcumin-forbindelsen har antitumoregenskaber mod osteosarkomceller. Forbindelsen udøvede disse terapeutiske virkninger ved at inaktivere p-JAK2/p-STAT3-kræftsignalvejen.
Denne forskning blev offentliggjort i 2018 i tidsskriftet *International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science*. Undersøgelsen viste, at biofeltbehandlet vitamin D3 har en positiv indflydelse på knoglecellers proliferation, modning og differentiering samt forbedrer parametrene for knoglesundhed.
Ressourcer til MG-63-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
Der findes flere ressourcer om MG-63-cellelinjen, der belyser protokollerne for cellekultivering og transfektion.
- Transfektion af MG-63-celler: Denne video forklarer udførligt transfektionsprotokollen for MG-63-celler.
- Passering af adhærente celler: Denne video vejleder i subkultivering eller passering af adhærente cellelinjer. Den vil hjælpe dig med at lære grundlæggende cellekulturprotokoller.
Via følgende link kan du finde dyrkningsprotokollen for MG-63-celler.
- MG-63-cellekultivering: Denne hjemmeside indeholder en enkel og detaljeret protokol til subkultivering eller opdeling af MG-63-cellelinjen.
Ofte stillede spørgsmål om MG-63-celler
MG-63-celler er en human osteosarkomcellelinje, der ofte bruges i forskning til at studere knoglebiologi, kræftbiologi og test af lægemidler. De stammer fra et osteosarkom fra en 14-årig mand og udviser typiske egenskaber for osteoblastiske celler.
MG-63-celler stammer fra humant osteosarkom, en type knoglekræft. Nærmere bestemt stammer de fra ondartet knoglevæv fra en menneskelig patient.
Fordoblingstiden for MG-63-celler ligger typisk mellem 24 og 36 timer, afhængigt af de anvendte dyrkningsbetingelser og medier.
MG-63-celler udviser en unormal karyotype med flere kromosomale abnormiteter. Det omfatter både numeriske og strukturelle afvigelser, som er karakteristiske for kræftceller.
Mens MG-63-celler er osteosarkomceller, stammer humane fibroblaster fra bindevæv og er involveret i sårheling og dannelse af ekstracellulær matrix. Begge celletyper bruges i studier af cellulære interaktioner, især i forbindelse med knogle- og vævsteknik.
MG-63-celler har robuste cellevedhæftningsegenskaber, hvilket gør dem velegnede til undersøgelser, der involverer cellevedhæftning, spredning og interaktion med forskellige biomaterialer. Disse egenskaber er afgørende for at forstå osteoblasternes funktioner og optimere knogleimplantater.
MG-63-celler bruges i forskning til at undersøge adenosins rolle i knoglemetabolismen. Adenosinreceptorer på disse celler medierer forskellige funktioner, herunder knogledannelse og -resorption, hvilket gør dem værdifulde til undersøgelse af de molekylære mekanismer i knoglemetabolismen.
Amelogenin, et protein, der er afgørende for emaljedannelse i tænder, kan også undersøges ved hjælp af MG-63-celler for at udforske dets virkninger på knogleceller og dets potentielle rolle i udvikling og regenerering af knoglevæv.
MG-63-celler er medvirkende til at studere optimeringen af osseointegration, som er den proces, hvor knoglevæv integreres med implantater. Forskere bruger disse celler til at teste nye materialer og overflademodifikationer, der kan forbedre integrationen og stabiliteten af implantater.
Fænotypisk stabilitet refererer til konsistensen af cellulære egenskaber over tid og gennem flere passager. For MG-63-celler er det vigtigt at opretholde fænotypisk stabilitet for at sikre pålidelige og reproducerbare resultater i eksperimenter.
MG-63-celler fungerer som en model til at studere osteoblastfunktioner, herunder knogledannelse og mineralisering, samt patofysiologien ved osteosarkom, hvilket giver indsigt i kræftprogression og potentielle terapeutiske mål.
Yeees, MG-63-celler kan bruges til at undersøge virkningerne af humane interferoner på knoglekræftceller, herunder deres antivirale, antiproliferative og immunmodulerende egenskaber, hvilket bidrager til forståelsen af immunterapi mod kræft.
Referencer
- Wandiyanto, J.V., et al., The Fate of Osteoblast-Like MG-63 Cells on Pre-Infected Bactericidal Nanostructured Titanium Surfaces. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A., et al., Human interferon: masseproduktion i en nyetableret cellelinje, MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): s. 11-5.
- Tang, Y., et al., Osteogen differentiering og mineraliseringspotentiale af zinkoxid-nanopartikler fra Scutellaria baicalensis på humane osteoblastlignende MG-63-celler. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: s. 111656.
- Lee, C.M., et al., Tomentosin udviser en antikarcinogen virkning i humane osteosarkom-MG-63-celler via induktion af intracellulære reaktive iltarter. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): s. 1508.