EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) er et af de mest udbredte basismedier til dyrkning af en bred vifte af pattedyrceller, især adhærente cellelinjer. Denne klassiske formulering, der oprindeligt blev udviklet af Harry Eagle, indeholder de essentielle aminosyrer, vitaminer og uorganiske salte, der er nødvendige for at understøtte væksten af både primære celler og etablerede cellelinjer under standarddyrkningsbetingelser.
Denne brugsklare, sterilt filtrerede flydende formulering er tilsat Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS), 2 mM L-glutamin, D-glukose (1,0 g/l) og 2,2 g/l natriumbicarbonat (NaHCO3), hvilket gør den velegnet til brug i en CO2-kontrolleret inkubatoratmosfære (typisk 5 % CO2). Det medfølgende fenolrød fungerer som en pH-indikator, hvilket muliggør praktisk visuel overvågning af mediets tilstand under cellekulturen.
Nøgleegenskaber
- Klassisk Eagles MEM-formulering med Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS)
- 2 mM L-glutamin inkluderet – klar til øjeblikkelig brug
- 2,2 g/L natriumbicarbonat – bufret til inkubation ved 5 % CO2
- Med D-glukose (1,0 g/l) som primær kulstofkilde
- Med fenolrødt som pH-indikator
- Uden HEPES og uden natriumpyruvat
- Sterilfiltreret flydende medium, klar til brug
- pH 7,0 – 7,6
Typiske anvendelser
EMEM understøtter dyrkning af en lang række pattedyrcellelinjer, herunder HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 og mange primære celler. Almindelige anvendelser omfatter:
- Rutinemæssig vedligeholdelse og ekspansion af adhærente cellelinjer
- Arbejdsgange for virusformering og vaccineproduktion
- Cytotoksicitet og bioassay-anvendelser
- Transfektions- og proteinekspressionsstudier
- Grundlæggende forskning inden for cellebiologi og molekylærbiologi
For at opnå optimal cellevækst tilsættes der typisk 5–10 % føtal bovint serum (FBS) til EMEM og, afhængigt af cellelinjen, ikke-essentielle aminosyrer (NEAA) samt antibiotika såsom penicillin/streptomycin.
Håndtering og opbevaring
Opbevar den uåbnede flaske ved +2 °C til +8 °C, beskyttet mod lys. Efter åbning skal produktet anvendes under aseptiske forhold. L-glutamin i opløsning nedbrydes gradvist – vi anbefaler at anvende mediet inden for 4 uger efter åbning for at opnå den bedste ydeevne, eller at tilsætte frisk L-glutamin før brug, hvis det opbevares i længere perioder. Lad mediet opvarmes til 37 °C, før det tilsættes til cellerne.
Kvalitet
Fremstillet under strenge kvalitetsstandarder. Hver batch testes for sterilitet, pH, osmolalitet og endotoksinniveauer for at sikre ensartet ydeevne i cellekulturapplikationer.
Produktspecifikationer
| Specifikation | Detaljer |
|---|---|
| Produkttype | MEM |
| Produktkategori | Cellekulturmedier |
| Format | Væske |
| Steril | Yeees |
| Størrelse | 500 ml |
| L-glutamin | Med L-glutamin (2 mM) |
| Glukose | Med glukose (1,0 g/l) |
| Natriumbicarbonat | Med NaHCO3 (2,2 g/L) |
| HEPES | Uden HEPES |
| Natriumpyruvat | Uden natriumpyruvat |
| Fenolrød | Med fenolrødt |
| Saltopløsning | Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Endotoksinindhold | Ikke angivet |
| Opbevaring | +2 °C til +8 °C |
Formulering (sammensætning pr. liter)
| Komponent | Koncentration (mg/L) |
|---|---|
| Uorganiske salte | |
| Calciumchlorid · 2H2O | 265,00 |
| Magnesiumsulfat | 97,72 |
| Kaliumchlorid | 400,00 |
| Natriumchlorid | 6.800,00 |
| Natriumdihydrogenphosphat, vandfrit | 122,00 |
| Natriumbicarbonat (NaHCO3) | 2.200,00 |
| Aminosyrer | |
| L-arginin · HCl | 126,00 |
| L-cystin · 2HCl | 31,30 |
| L-glutamin | 292,00 |
| L-histidin · HCl · H2O | 42,00 |
| L-isoleucin | 52,00 |
| L-leucin | 52,00 |
| L-lysin · HCl | 72,50 |
| L-methionin | 15,00 |
| L-phenylalanin | 32,00 |
| L-threonin | 48,00 |
| L-tryptofan | 10,00 |
| L-tyrosin · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-valin | 46,00 |
| Vitaminer | |
| D-Calciumpantothenat | 1,00 |
| Cholinchlorid | 1,00 |
| Folinsyre | 1,00 |
| Myo-inositol | 2,00 |
| Nikotinamid | 1,00 |
| Pyridoxal · HCl | 1,00 |
| Riboflavin | 0,10 |
| Thiamin · HCl | 1,00 |
| Andre komponenter | |
| D(+)-Glukose | 1.000,00 |
| Phenolrød | 10,00 |