DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 er et bredt anerkendt og meget udbredt basismedium inden for cellekultur til biologisk forskning. Det fungerer som en grundlæggende næringskilde for væksten af forskellige pattedyrscellelinjer, især når det tilsættes føtal bovint serum (FBS).
Denne unikke formulering kombinerer Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) og Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i et præcist forhold på 1:1. Tilsætningen af L-glutamin forbedrer sammensætningen yderligere.
DMEM, der stammer fra Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM), tilbyder en øget koncentration af aminosyrer og vitaminer sammenlignet med sin forgænger. I modsætning hertil er Ham's F-12 baseret på Ham's F-10-medium, hvilket giver et komplementært sæt af essentielle komponenter.
For at understøtte optimal cellevækst er det almindelig praksis at supplere DMEM:Ham's F12 med FBS i en typisk koncentration på 5-10 %. Denne tilsætning er nødvendig, da mediet mangler væksthormoner, lipider og proteiner, der er afgørende for celleudviklingen.
DMEM:Ham's F12 indeholder et pH-buffersystem og tilsættes ofte fenolrødt, en pH-indikator. Dyrkede celler i DMEM:Ham's F12 eller ethvert medium, der anvender bicarbonatbuffersystemet, kræver et kontrolleret CO2-miljø på 5-10 % for at opretholde passende pH-niveauer.
Kvalitetskontrol
- Sterilfiltreret
Opbevaring og holdbarhed
- Opbevares ved +2 °C til +8 °C, beskyttet mod lys.
- Når produktet er åbnet, skal det opbevares ved 4 °C og bruges inden for 6–8 uger.
Forsendelsesbetingelser
- Omgivelsestemperatur
Opbevaring
- Opbevares i køleskab ved +2 °C til +8 °C i mørke. Undgå frysning og hyppig opvarmning til +37 °C, da dette nedsætter produktets kvalitet.
- Mediet må ikke opvarmes til over 37 °C, og der må ikke anvendes ukontrollerede varmekilder, såsom mikrobølgeovne.
- Hvis kun en del af mediet skal bruges, skal den nødvendige mængde tages ud og opvarmes til stuetemperatur før brug.
Sammensætning
| Kategori | Bestanddele | Koncentration (mg/L) |
| Aminosyrer | Glycin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-arginin-HCl | 147,50 | |
| L-asparagin H₂O | 7,50 | |
| L-asparaginsyre | 6,65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystin 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutaminsyre | 7,35 | |
| L-glutamin | 365,00 | |
| L-histidin-HCl-H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucin | 54,47 | |
| L-leucin | 59,05 | |
| L-lysin-HCl | 91,25 | |
| L-methionin | 17,24 | |
| L-phenylalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-serin | 26,25 | |
| L-threonin | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrosin 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valin | 52,85 | |
| Vitaminer | D-biotin | 0,0035 |
| Cholinchlorid | 8,98 | |
| D-calciumpantothenat | 2,24 | |
| Folinsyre | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nikotinamid | 2,02 | |
| Pyridoxin-HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal-HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Thiamin-HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Uorganiske salte | CaCl2 2 H2O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO3)3 9 H2O | 0,05 | |
| FeSO4 7 H2O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl2 6 H2O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na2HPO4 | 71,02 | |
| NaH2PO4 2 H2O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Andre komponenter | D-glukose | 3151,00 |
| Hypoxanthin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolsyre | 0,042 | |
| Lipoinsyre | 0,105 | |
| Fenolrødt natriumsalt | 8,63 | |
| Putrescin-2-HCl | 0,081 | |
| Natrium-pyruvat | 55,00 | |
| Thymidin | 0,365 |