DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham’s F12 er et bredt anerkendt og meget udbredt basismedium inden for cellekultur til biologisk forskning. Det fungerer som en grundlæggende næringskilde til vækst af forskellige pattedyrcellelinjer, især når det tilsættes føtal bovint serum (FBS).
Denne unikke sammensætning kombinerer Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) og Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) i et præcist forhold på 1:1. Tilsætningen af L-glutamin forbedrer sammensætningen yderligere.
DMEM, der stammer fra Eagles Minimal Essential Medium (EMEM), har en højere koncentration af aminosyrer og vitaminer sammenlignet med sin forgænger. Derimod er Ham's F-12 baseret på Ham's F-10-medium, hvilket tilfører et supplerende sæt af essentielle komponenter.
For at understøtte optimal cellevækst er det almindelig praksis at tilsætte FBS til DMEM:Ham's F12 i en typisk koncentration på 5–10 %. Denne tilsætning er nødvendig, da mediet mangler væksthormoner, lipider og proteiner, der er afgørende for celleudviklingen.
DMEM:Ham's F12 indeholder et pH-buffersystem og tilsættes ofte fenolrødt, en pH-indikator. Celler, der dyrkes i DMEM:Ham's F12 eller ethvert andet medium, der anvender bikarbonatbuffersystemet, kræver et kontrolleret CO₂-miljø på 5-10 % for at opretholde passende pH-niveauer.
Kvalitetskontrol
- Sterilfiltreret
Opbevaring og holdbarhed
- Opbevares ved +2 °C til +8 °C, beskyttet mod lys.
- Efter åbning skal produktet opbevares ved 4 °C og bruges inden for 6–8 uger.
Forsendelsesbetingelser
- Omgivelsestemperatur
Opbevaring
- Opbevares i køleskab ved +2 °C til +8 °C i mørke. Undgå frysning og hyppig opvarmning til +37 °C, da dette nedsætter produktets kvalitet.
- Mediet må ikke opvarmes til over 37 °C, og der må ikke anvendes ukontrollerede varmekilder, såsom mikrobølgeovne.
- Hvis kun en del af mediet skal bruges, skal den nødvendige mængde tages ud og opvarmes til stuetemperatur inden brug.
Sammensætning
| Kategori | Bestanddele | Koncentration (mg/L) |
| Aminosyrer | Glycin | 18,75 |
| L-alanin | 4,45 | |
| L-arginin-HCl | 147,50 | |
| L-asparagin H₂O | 7,50 | |
| L-asparaginsyre | 6,65 | |
| L-cystein HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystin 2 HCl | 31,29 | |
| L-glutaminsyre | 7,35 | |
| L-glutamin | 365,00 | |
| L-histidin-HCl-H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucin | 54,47 | |
| L-leucin | 59,05 | |
| L-lysin-HCl | 91,25 | |
| L-methionin | 17,24 | |
| L-phenylalanin | 35,48 | |
| L-prolin | 17,25 | |
| L-serin | 26,25 | |
| L-threonin | 53,45 | |
| L-tryptofan | 9,02 | |
| L-tyrosin 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-valin | 52,85 | |
| Vitaminer | D-biotin | 0,0035 |
| Kolinchlorid | 8,98 | |
| D-calciumpantothenat | 2,24 | |
| Folinsyre | 2,66 | |
| myo-inositol | 12,60 | |
| Nikotinamid | 2,02 | |
| Pyridoxin-HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal-HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Thiamin-HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Uorganiske salte | CaCl₂·2 H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5 H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9 H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂·6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄ 7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄·7H₂O | 0,432 | |
| Andre komponenter | D-glukose | 3151,00 |
| Hypoxanthin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolsyre | 0,042 | |
| Liponsyre | 0,105 | |
| Natriumfenolrød | 8,63 | |
| Putrescin-2-HCl | 0,081 | |
| Natriumpyruvat | 55,00 | |
| Thymidin | 0,365 |