خلايا HROG06 T0 M2 HROG06 T0 M2

‏٨٠٠٫٠٠ €*

يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 ⁶ خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 10⁶ خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 300883

صحيفة بيانات السلامة

ورقة المنتج

اتفاقية الطرف الثالث

الوصف	HROG06 T0 M2 هو خط خلايا أولي لورم أرومي دبقي متعدد الأشكال (GBM) بشري تم إنشاؤه من أنسجة ورم تم استئصالها حديثًا من مريض بالغ تم تشخيصه بورم أرومي دبقي من الدرجة الرابعة حسب تصنيف منظمة الصحة العالمية. يشير التسمية "T0" إلى أن عينة الورم تم الحصول عليها في التدخل الجراحي الأولي، بينما يشير "M2" إلى النموذج الثاني الذي تم إنشاؤه بشكل مستقل في المختبر والمشتق من نفس الورم الأولي. تم تطوير خط الخلايا ضمن منصة HROG (Hansestadt Rostock Glioma)، التي تركز على إنتاج مزارع ورم دبقي ذات تمريرات منخفضة للغاية تحافظ على الخصائص البيولوجية والجزيئية لورم المريض الأصلي. ينمو HROG06 T0 M2 بشكل ملتصق في ظروف استنبات قياسية ويظهر شكلًا مغزليًا يشبه الخلايا الليفية، وهو شكل نموذجي لثقافات الورم الدبقي المتعدد الأشكال الأولي. تظهر التحليلات المناعية عبر سلسلة HROG التعبير عن علامات السلالة العصبية والدبقية مثل البروتين الحمضي الليفي الدبقي (GFAP) ونيستين وفيمنتين، مما يدعم أصل الورم النجمي. تتضمن الخصائص الجزيئية ضمن منصة HROG تقييم المؤشرات الحيوية ذات الصلة سريريًا مثل حالة مثيلة MGMT، وتضخيم EGFR، وملف تعريف طفرات الجينات بما في ذلك TP53 و IDH1/2 و KRAS و BRAF، مما يؤكد الحفاظ على التغيرات الجينومية المرتبطة بالورم في مزارع المراحل المبكرة. تم استخدام HROG06 T0 M2 للتقييم المختبري للاستجابات العلاجية لعلاجات الورم الدبقي القياسية، بما في ذلك عوامل العلاج الكيميائي المُألكلة، وكذلك المثبطات الموجهة. تشير التحليلات المقارنة داخل مجموعة HROG إلى استقرار الشكل، وحركية نمو قابلة للتكرار، وملامح حساسية متسقة للأدوية في المراحل المبكرة، مما يدعم ملاءمتها كنموذج بحثي مترجم. باعتبارها خط خلايا GBM منخفض التمرير مشتق من المريض، توفر HROG06 T0 M2 منصة ذات صلة سريرية لدراسة بيولوجيا الورم الأرومي الدبقي، وتغاير الأورام، وآليات مقاومة العلاج.
كائن حي	الإنسان
الأنسجة	الدماغ
المرض	الورم الأرومي الدبقي

العرق	قوقازي
خصائص النمو	ملتزم

اقتباس	HROG06 T0 M2 (كتالوج سايتون رقم 300883)
مستوى السلامة البيولوجية	1
NCBI_TaxID	9606
سيلوسوروسأكسيون	CVCL_B7FP

الوسط الثقافي	DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
المكملات الغذائية	قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك	أكوتاس
الاستزراع الفرعي	قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
وسيط التجميد	كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 50% من الوسط القاعدي + 40% من الحمض الأميني القاعدي + 10% من DMSO، أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
إذابة الخلايا وزراعتها	تأكد من بقاء القارورة مجمدة بعمق عند التسليم، حيث يتم شحن الخلايا على ثلج جاف للحفاظ على درجات الحرارة المثلى أثناء النقل. عند الاستلام، إما تخزين القارورة المبردة على الفور في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية لضمان الحفاظ على سلامة الخلايا، أو الانتقال إلى الخطوة 3 إذا كانت الزراعة الفورية مطلوبة. للاستزراع الفوري، قم بإذابة القارورة بسرعة عن طريق غمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية بماء نظيف وعامل مضاد للميكروبات، مع التحريك برفق لمدة 40-60 ثانية حتى تبقى كتلة ثلج صغيرة. إجراء جميع الخطوات اللاحقة في ظروف معقمة في غطاء تدفق، مع تطهير القارورة المبردة بنسبة 70% من الإيثانول قبل فتحها. افتح القارورة المعقمة بعناية وانقل معلق الخلية إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل يحتوي على 8 مل من وسط المستنبت بدرجة حرارة الغرفة مع الخلط برفق. اطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 × جم لمدة 3 دقائق لفصل الخلايا وتخلص بعناية من المادة الطافية التي تحتوي على وسط التجميد المتبقي. يُعاد ترسيب كريات الخلية برفق في 10 مل من وسط مزرعة جديد. بالنسبة للخلايا الملتصقة، قم بتقسيم المعلق بين قارورتي مزرعة T25؛ أما بالنسبة لمزارع التعليق، انقل كل الوسط إلى قارورة T25 واحدة لتعزيز تفاعل الخلايا ونموها بشكل فعال. الالتزام ببروتوكولات الاستزراع الفرعي المعمول بها لاستمرار نمو خط الخلية والحفاظ عليه، مما يضمن نتائج تجريبية موثوقة.
أجواء الاحتضان	37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
طلاء القارورة	لا شيء
إجراء التجميد	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
شروط الشحن	يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
ظروف التخزين	للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

العقم	يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

يُرجى ملاحظة أن هذا الخط الخلوي غير متاح بموجب اتفاقية سايتون MTA القياسية، حيث يتطلب اتفاقية طرف ثالث و/أو يخضع للتفاوض مع المرخص الأصلي.

خلايا HROG06 T0 M2 HROG06 T0 M2

معلومات عامة

الخصائص

البيانات التنظيمية

البيانات الجزيئية الحيوية

المناولة

مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA

اتفاقية الطرف الثالث