خلايا HMC3
٥٥٠٫٠٠ €*
يتم شحن المنتجات مجمدة على ثلج جاف في أنابيب تبريد. يحتوي كل أنبوب تبريد عادةً على 3 × 10 6 خلايا للخطوط الملتصقة أو 5 × 106 خلايا للخطوط المعلقة (يرجى الرجوع إلى شهادة تحليل الدفعة للحصول على التفاصيل).
معلومات عامة
| الوصف | تم تطوير سلالة الخلايا الدبقية الدبقية الدقيقة البشرية 3 (HMC3) في عام 1995 من قبل فريق البروفيسور تارديو من خلال تخليد الخلايا الدبقية الدقيقة البشرية المعتمدة على SV40 من أنسجة النخاع الشوكي البشري والأنسجة القشرية المأخوذة من أجنة تتراوح أعمارها بين 8 إلى 12 أسبوعاً. وقد تمت زراعة هذه الخلايا الأولية، التي تتميز بانقسامها البطيء وأشكالها المعقدة، في البداية لمدة 10-15 يوماً قبل أن يتم تخليدها. احتفظت خلايا HMC3 بالعديد من السمات الرئيسية للخلايا الدبقية الصغيرة الأولية، مثل التعبير المتنوع للعلامات النخاعية مثل CD68 وCD11b وCD14، على الرغم من أن مستويات التعبير تختلف بشكل ملحوظ مع اختيار الجسم المضاد الأولي، خاصةً بالنسبة ل CD68. بعد الخلود، أظهرت خلايا HMC3 معدلات تكاثر معززة، مع مضاعفة زمن التكاثر بين 24 و48 ساعة، مع الحفاظ على العديد من الخصائص المظهرية والمورفولوجية لنظيراتها الأولية. والجدير بالذكر أنه كان هناك نسبة أعلى من الخلايا الإيجابية CD68 EBM/11 وانخفاض في النشاط البلعمي مقارنةً بالخلايا الأولية. تم تأكيد الثبات في التعبير المستضدي عبر 35 ممرًا، مع بقاء الخلايا إيجابية لـ NSE وCD68 وCD11b، ولكنها سلبية لـ CD14 وMHCII وCD4 في ظل الظروف الأساسية. ومع ذلك، فقد أدى التعرض للإنترفيرون γ (IFNγ) إلى ارتفاع تعبير MHCII، مما يتماشى بشكل أكبر مع استجابات المستنبتات الأولية لنفس العلاج. من الناحية الوظيفية، تميز خط HMC3 بإنتاج مستويات أعلى من الإنترلوكين-6 (IL-6) في الظروف القاعدية مقارنةً بالمستنسخات الأخرى. وعلى الرغم من ذلك، لا تزال المقارنة المباشرة مع إنتاج الخلايا الدبقية المجهرية الأولية للسيتوكين صعبة بسبب الاختلافات المنهجية. بدت الاستجابة لتحفيز عديدات السكاريد الشحمية (LPS) في هذه السلالات غير الخالدة أقل مقارنةً بالمزارع الأولية. واتساقًا مع خصائص الخلايا الدبقية الدبقية المجهرية الأولية، لم تنتج خلايا HMC3 وغيرها من السلالات المستنسخة عامل نخر الورم ألفا (TNFα)، سواء بشكل تلقائي أو بعد التحفيز المؤيد للالتهابات، مما يسلط الضوء على سمة محددة للخلايا الدبقية المجهرية الجنينية البشرية. |
|---|---|
| كائن حي | الإنسان |
| الأنسجة | دماغ الجنين |
| التطبيقات | مزرعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، علم الأعصاب، التهاب الأعصاب |
| المترادفات | مستنسخ الخلايا الدبقية المجهرية البشرية 3، CHME-3، CHME3 |
الخصائص
| العمر | الجنين |
|---|---|
| الجنس | غير محدد |
| علم الصرف | البلاعم |
| نوع الخلية | الخلية الدبقية الصغيرة |
| خصائص النمو | ملتزم |
البيانات التنظيمية
| اقتباس | HMC3 (كتالوج سايتون رقم الكتالوج 300102) |
|---|---|
| مستوى السلامة البيولوجية | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| سيلوسوروسأكسيون | CVCL_II76 |
| حالة الكائنات المعدلة وراثيًا | GMO-S1: يحتوي خط خلايا الخلايا الدبقية الدبقية الصغيرة الجنينية البشرية (HMC3) على تركيبة SV40 T-Antigen تم إدخالها عن طريق نقل العدوى، مما يدعم الخلود. وتوجد هذه التركيبة بشكل مستقر في الخلايا المشتقة من الخلايا الدبقية الصغيرة. ينطبق هذا التصنيف داخل ألمانيا فقط وقد يختلف في أماكن أخرى. |
البيانات الجزيئية الحيوية
| الفيروسات | يتم دمج المادة الوراثية لفيروس SV40 بشكل ثابت في جينوم الخلية. لا يوجد إنتاج أو إطلاق نشط للجسيمات الفيروسية الكاملة، مما يخفف من مخاوف السلامة البيولوجية المحتملة. |
|---|
المناولة
| الوسط الثقافي | DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a) |
|---|---|
| المكملات الغذائية | قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS |
| كاشف التفكك | أكوتاس |
| مضاعفة الوقت | 24 و48 ساعة |
| الاستزراع الفرعي | قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد. |
| وسيط التجميد | كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد. |
| إذابة الخلايا وزراعتها |
|
| أجواء الاحتضان | 37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب. |
| طلاء القارورة | لا شيء |
| إجراء التجميد | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| شروط الشحن | يتم شحن سلالات الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب. |
| ظروف التخزين | للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في مرحلة البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل. |
مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA
| العقم | يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي. |
|---|
شهادة التحليل (CoA)
| رقم القطعة | نوع الشهادة | التاريخ | رقم الكتالوج |
|---|---|---|---|
| 300102-220524 | شهادة التحليل | 23. May. 2025 | 300102 |
| 300102-230623 | شهادة التحليل | 23. May. 2025 | 300102 |
| 300102-290125 | شهادة التحليل | 23. May. 2025 | 300102 |
اتفاقية نقل المواد
إذا كنت تنوي استخدام خطوط الخلايا Cytion حصريًا لأغراض البحث الداخلي في موقع بحثي واحد، يرجى ملء وتوقيع اتفاقية نقل المواد (MTA) الخاصة بنا وإرسالها مع طلبك.
لأي تطبيقات تجارية - بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الأعمال مقابل أجر، واختبارات مراقبة الجودة، وإطلاق المنتجات، والاستخدام التشخيصي، أو الدراسات التنظيمية - يرجى ملء نموذج الاستخدام المقصود حتى نتمكن من إعداد اتفاقية مناسبة ومصممة خصيصًا لمشروعك.
يرجى ملاحظة: تنطبق اتفاقية نقل المواد (MTA) على سلالات خلوية معينة فقط. إذا ظهر هذا الإشعار ووثيقة اتفاقية نقل المواد (MTA) على صفحة المنتج، فإن الاتفاقية تكون سارية. بالنسبة للسلالات الخلوية التي لا تشملها اتفاقية نقل المواد (MTA)، لن تظهر أي إشارة إلى الاتفاقية. اتفاقية نقل المواد (MTA) غير صالحة للعملاء في الأمريكتين أو الصين أو تايوان. يرجى الاتصال بكياننا في الولايات المتحدة للحصول على الاتفاقية المناسبة.