U2OS-CRISPR-NUP96-mMaple 细胞

€800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 300461

安全数据表

产品介绍

分析证书（CoA）

第三方协议

说明	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple 是一种基因工程骨肉瘤细胞系，源自人类 U-2 OS 细胞系。该克隆使用 CRISPR/Cas9 基因编辑技术进行了改造，在 NUP96 基因中加入了可光电转换的荧光蛋白 mMaple。mMaple 蛋白可用于先进的成像技术，如活细胞成像和超分辨率显微镜，从而提供对核孔复合体（NPC）行为和细胞通过核膜进出口机制的动态了解。 NUP96 基因编码核孔复合体的一个重要组成部分，对核胞质转运至关重要。NUP96 基因的改变不仅会影响转运机制，还会影响整个核结构和功能。因此，该细胞系是研究 NPC 相关病理以及核转运在细胞代谢和信号转导中的作用的绝佳模型。将 mMaple 集成到 NUP96 中可以实时跟踪和可视化 NUP96 在体内的动态变化，使其成为专注于细胞核研究的研究人员以及探索 NPC 功能障碍在癌症和病毒感染等疾病中的影响的研究人员不可或缺的工具。作为一种专用工具，U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple 克隆 16 号支持高分辨率成像，并能提供有关 NPC 成分空间和时间分布的大量数据。它对于需要详细分析生理和病理条件下基因表达、蛋白质定位和核转运的实验特别有价值，有助于在分子水平上更深入地了解细胞过程。
有机体	人类
组织	骨质
疾病	骨肉瘤

年龄	15 年
性别	女性
种族	高加索人
生长特性	附着物

引用	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple（Cytion 目录号 300461）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_B7FK
存款人	艾伦伯格实验室（EMBL）
转基因生物现状	GMO-S1：这种人类骨肉瘤细胞系（U2OS-CRISPR-NUP96-mMaple，克隆 16）含有 CRISPR 介导的 NUP96-mMaple 融合体，可对核孔结构进行光电转换标记。该构建体可稳定存在。该分类仅适用于德国国内，其他地区可能有所不同。

蛋白质表达	NUP96-mMaple（内源性核孔复合体蛋白 96，mMaple 标记）

培养基	McCoys 5a，w：3.0 克/升葡萄糖，w：稳定谷氨酰胺，w：2.0 毫摩尔丙酮酸钠，w：2.2 克/升 NaHCO3（Cytion 文章编号 820200a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
解离试剂	Accutase
亚培养	去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
播种密度	1 × 10^⁴ 个细胞/^平方厘米
流体更新	每周 2 至 3 次
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	为了在解冻后获得最佳附着力和存活率，我们建议使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板。
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

地段编号	证书类型	日期	目录编号
300461-210524	分析证书	18. Aug. 2025	300461

请注意，标准 Cytion MTA 无法提供该细胞系，因为需要第三方协议和/或与原始许可人协商。

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U2OS-CRISPR-NUP96-mMaple 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制/基因图谱/HLA

分析证书（CoA）

第三方协议