U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 细胞

€800.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 300174

安全数据表

产品介绍

分析证书（CoA）

第三方协议

说明	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 是一种转基因细胞系，来源于人类骨肉瘤 U-2 OS 母系。该细胞系通过 CRISPR-Cas9 基因编辑技术，在 NUP96 基因座上定向插入了单体增强型绿色荧光蛋白（mEGFP）标签。NUP96 是核孔复合体的一部分，对核转运至关重要，它与 mEGFP 的融合可以在荧光显微镜下实时观察核孔动态，为了解核转运机制和核细胞质转运提供宝贵的信息。这个编号为 195 的克隆因其稳定表达 NUP96-mEGFP 融合蛋白而被选中，并保持了 U-2 OS 系的典型特征，包括在癌细胞迁移和转移相关研究中至关重要的强健细胞骨架结构。CRISPR 技术的应用确保了基因编辑的精确性，最大程度地减少了可能影响实验结果完整性的脱靶效应。这使得 U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 195 号克隆特别适用于高分辨率成像技术和详细的细胞结构研究，有助于细胞生物学、癌症研究和核运输现象的高级研究。
有机体	人类
组织	骨质
疾病	骨肉瘤

年龄	15 年
性别	女性
种族	高加索人
形态学	上皮样
生长特性	附着物

引用	U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP克隆编号195（赛通产品编号300174）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_B7FJ
存款人	艾伦伯格实验室（EMBL）
转基因生物现状	GMO-S1：这种人类骨肉瘤细胞系（U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP，克隆 195）含有 CRISPR 工程化的 NUP96-mEGFP 融合体，通过慢病毒递送导入，可对核孔复合体进行荧光跟踪。该修饰已稳定整合。此分类仅适用于德国国内，其他地区可能有所不同。

蛋白质表达	MEGFP（核孔复合体蛋白 96，mEGFP 标记）

培养基	McCoys 5a，w：3.0 克/升葡萄糖，w：稳定谷氨酰胺，w：2.0 毫摩尔丙酮酸钠，w：2.2 克/升 NaHCO3（Cytion 文章编号 820200a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
解离试剂	Accutase
亚培养	去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
播种密度	2至3×10^⁴个细胞/^平方厘米
流体更新	每周 2 至 3 次
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	为了在解冻后获得最佳附着力和存活率，我们建议使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板。
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

地段编号	证书类型	日期	目录编号
300174-151124	分析证书	23. May. 2025	300174
300174-130226	分析证书	13. Mar. 2026	300174
300174-322	分析证书	23. May. 2025	300174

请注意，标准 Cytion MTA 无法提供该细胞系，因为需要第三方协议和/或与原始许可人协商。

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U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP 细胞

一般信息

特点

监管数据

生物分子数据

处理

质量控制/基因图谱/HLA

分析证书（CoA）

第三方协议