Tế bào MM.1S-Luc

Giới thiệu Ham's F-12K (Kaighn's) Medium, một phiên bản cải tiến chuyên biệt của Ham's F-12 medium, được thiết kế để đáp ứng các yêu cầu đặc thù của nghiên cứu sinh học. Loại môi trường tiên tiến này mang lại những ưu điểm nổi bật, giúp tối ưu hóa quá trình nuôi cấy tế bào gan người nguyên phát, cũng như tế bào gan chuột và gà, đặc biệt trong điều kiện giảm huyết thanh.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium được pha chế cẩn thận để tối ưu hóa điều kiện nuôi cấy tế bào. Nó có thành phần giàu dưỡng chất, cung cấp mức độ cao của các thành phần thiết yếu như axit amin và natri pyruvate, cùng với các yếu tố bổ sung bao gồm putrescine, thymidine, hypoxanthine và kẽm. Những thành phần này cho phép các nhà nghiên cứu bổ sung môi trường với lượng huyết thanh hoặc thành phần định nghĩa tối thiểu cho các loại tế bào cụ thể, giúp tạo ra điều kiện thí nghiệm chính xác.

Đáng chú ý, Ham's F-12K (Kaighn's) Medium không chứa protein hoặc yếu tố tăng trưởng. Do đó, việc bổ sung yếu tố tăng trưởng và huyết thanh bò non (FBS) thường là cần thiết, cho phép các nhà nghiên cứu điều chỉnh môi trường nuôi cấy phù hợp với yêu cầu của từng dòng tế bào cụ thể. Để đạt hiệu suất tối ưu, nồng độ FBS phải được tối ưu hóa cẩn thận cho từng dòng tế bào, đảm bảo sự phát triển và chức năng tối ưu.

Để duy trì pH sinh lý, môi trường Ham's F-12K (Kaighn's) sử dụng hệ đệm natri bicacbonat (2,5 g/L), yêu cầu môi trường CO₂ được kiểm soát ở mức 5-10% trong quá trình nuôi cấy. Điều này đảm bảo pH của môi trường nằm trong phạm vi lý tưởng cho sự phát triển và khả năng sống sót của tế bào
Kiểm soát chất lượng

pH = 7.2 ± 0.02 ở 20-25°C.
Mỗi lô đã được kiểm tra về độ vô trùng và không chứa mycoplasma và vi khuẩn.

Bảo quản

Bảo quản trong tủ lạnh ở nhiệt độ +2°C đến +8°C trong điều kiện tối. Việc đông lạnh hoặc làm ấm lên đến +37°C sẽ làm giảm chất lượng sản phẩm.
Không làm nóng môi trường lên trên 37°C hoặc sử dụng các nguồn nhiệt không kiểm soát được (ví dụ: lò vi sóng).
Nếu chỉ sử dụng một phần môi trường, hãy lấy lượng cần thiết ra khỏi chai và làm ấm ở nhiệt độ phòng.
Thời hạn sử dụng của bất kỳ môi trường nào (trừ môi trường cơ bản) là 8 tuần kể từ ngày sản xuất.

Thành phần




Thành phần
mg/L


Muối vô cơ
Canxi clorua x 2H₂O
135,24



Sunfat đồng (II) x 5H₂O
0,00



Sulfat sắt (II) x 7H₂O
0,83



Clorua magiê x 6H₂O
105,72



Magie sunfat x 7H₂O
394,49



Clorua kali
283,29



Phosphat kali dihydrogen
58,52



Natri clorua
7597,20



di-natri hydroxit photphatkhông nước
115,02



Kẽm sunfat x 7H₂O
0,14


Các thành phần khác
D(+)-Glucose khan
1260,00



Hypoxanthine
4,08



DL-α-Axit lipoic
0,21



Phenol đỏ
3,00



Putrescine x 2HCl
0,32



Natri pyruvate
220,0



NaHCO₃
2500,00



Thymidine
0,73


Axit amin
L-Alanine
17,82



L-Arginine x HCl
421,40



L-Asparagine x H₂O
30,02



L-Axit aspartic
26,62



L-Cysteine x HCl x H₂O
70,24



L-Glutamine
292,20



L-Glutamic acid
29,42



Glycine
15,01



L-Histidine x HCl x H₂O
41,92



L-Isoleucine
7,87



L-Leucine
26,24



L-Lysine x HCl
73,04



L-Methionine
8,95



L-Phenylalanine
9,91



L-Proline
69,06



L-Serine
21,02



L-Threonine
23,82



L-Tryptophan
4,08



L-Tyrosine
10,87



L-Valine
23,42


Vitamin
D(+)-Biotin
0,07



D-Canxi pantothenate
0,48



Clorua choline
13,96



Axit folic
1,32



myo-Inositol
18,02



Nicotinamide
0,04



Pyridoxine x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Thiamine x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

Dung dịch tách tế bào Accutase chứa EDTA và Phenol Red – 100 ml

Accutase là dung dịch tách tế bào đã được lọc vô trùng, sẵn sàng sử dụng, được thiết kế như một giải pháp thay thế nhẹ nhàng cho trypsin/EDTA trong việc tách các tế bào động vật có vú bám dính khỏi các dụng cụ nuôi cấy mô tiêu chuẩn bằng nhựa và các bề mặt được phủ chất bám dính. Sản phẩm kết hợp hoạt tính enzyme phân giải protein và collagen trong dung dịch muối cân bằng để mang lại hiệu quả tách tế bào hiệu quả nhưng có kiểm soát, bảo tồn các protein bề mặt tế bào và hỗ trợ khả năng sống sót cao sau khi truyền tế bào cũng như tái bám dính nhanh chóng.

Công thức Accutase dựa trên dung dịch muối đệm phosphate của Dulbecco (DPBS) với EDTA và phenol red làm chỉ thị pH trực quan. Các enzyme có nguồn gốc không phải từ động vật có vú và vi khuẩn, khiến Accutase đặc biệt phù hợp cho nghiên cứu tế bào gốc, quy trình sản xuất vắc-xin và bất kỳ ứng dụng nào cần giảm thiểu tối đa các chất gây ô nhiễm có nguồn gốc từ động vật hoặc vi sinh vật. Dung dịch tự ức chế ở 37 °C, do đó không cần chất trung hòa hoặc môi trường chứa huyết thanh sau khi tách tế bào – tế bào có thể được chuyển trực tiếp vào môi trường mới.

Các tính năng chính

Dung dịch lỏng 1x đã lọc vô trùng, sẵn sàng sử dụng – không cần pha loãng hoặc tái tạo
Hoạt tính enzyme phân giải protein và collagen kết hợp để phân ly nhẹ nhàng
Mỗi lô được tiêu chuẩn hóa theo hoạt tính phân ly xác định để đảm bảo tính nhất quán giữa các lô
Enzyme có nguồn gốc không phải từ động vật có vú và vi khuẩn
Tự ức chế ở 37 °C – không cần dung dịch trung hòa
Được pha chế trong dung dịch PBS của Dulbecco với EDTA
Chứa phenol red làm chỉ thị pH trực quan
pH 6,8 – 7,8


Ứng dụng điển hình
Accutase nhẹ nhàng phân ly nhiều loại tế bào bám dính và nhạy cảm, bao gồm tế bào gốc phôi người (hESCs), tế bào gốc đa năng cảm ứng người (iPSCs), tế bào gốc thần kinh, tế bào thần kinh nguyên phát và các dòng tế bào bám dính được nuôi cấy thường xuyên như HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 và A549. Các trường hợp sử dụng điển hình bao gồm:

Nuôi cấy và truyền tế bào động vật có vú bám dính thường xuyên
Tách tế bào đơn nhẹ nhàng của hESCs, iPSCs và các dòng tế bào nhạy cảm khác
Chuẩn bị mẫu cho phân tích tế bào dòng chảy và phân tích FACS
Phân tích các dấu hiệu bề mặt tế bào khi tính toàn vẹn của epitope là yếu tố quan trọng
Các thử nghiệm về di chuyển, tăng sinh và apoptosis của tế bào
Thử nghiệm trạng thái nghỉ ngơi bằng cách thiếu hụt huyết thanh và nghiên cứu chuyển gen ung thư
Thử nghiệm di chuyển của tế bào ung thư và tế bào nơ-ron
Mở rộng quy mô sản xuất trong quy trình làm việc với bình phản ứng sinh học

Đối với công việc thường ngày, sử dụng khoảng 10 ml Accutase cho mỗi 75 cm2 bề mặt nuôi cấy và ủ trong 5–10 phút ở nhiệt độ phòng. Thời gian ủ tối ưu cần được xác định cho từng dòng tế bào và không được vượt quá một giờ. Trước khi thêm, rửa lớp tế bào bằng dung dịch muối không chứa Ca2+/Mg2+ như DPBS không có canxi và magiê để loại bỏ huyết thanh dư và các cation hóa trị hai.

Xử lý & Bảo quản
Bảo quản chai chưa mở trong tủ đông ở -15 °C hoặc thấp hơn. Rã đông ở nhiệt độ phòng hoặc qua đêm ở +2 °C đến +8 °C. Không rã đông Accutase trong bể nước 37 °C, vì nhiệt độ cao làm giảm hoạt tính enzym. Sau khi rã đông, dung dịch có thể được bảo quản trong tối đa 2 tháng ở +2 °C đến +8 °C; không bảo quản ở nhiệt độ phòng. Không làm ấm trước thuốc thử đến 37 °C trước khi sử dụng – thêm trực tiếp vào các tế bào đã rửa sạch ở nhiệt độ phòng. Để bảo quản lâu dài, nên chia thành các phần dùng một lần để tránh các chu kỳ rã đông lặp đi lặp lại. Luôn làm việc trong điều kiện vô trùng.

Chất lượng
Được sản xuất theo các tiêu chuẩn chất lượng nghiêm ngặt. Mỗi lô Accutase đều được lọc vô trùng và kiểm tra độ vô trùng, pH, hình thức và hoạt tính phân ly để đảm bảo hiệu suất ổn định, có thể lặp lại từ lô này sang lô khác.

Thông số kỹ thuật



Thông số
Chi tiết



Loại sản phẩmChất phản ứng tách tế bào / phân ly
Định dạngDung dịch đã được lọc vô trùng, sẵn sàng sử dụng
Thể tích100 ml
Nồng độ làm việc1x (sẵn sàng sử dụng)
Hoạt tính enzymKết hợp proteolytic và collagenolytic
Nguồn gốc enzymeKhông phải từ động vật có vú và không phải từ vi khuẩn
Hệ đệmDulbecco’s PBS với EDTA
Chất chỉ thị pHPhenol red
Phạm vi pH6,8 – 7,8
Hình thứcDung dịch trong suốt, màu đỏ nhạt đến cam
Nhiệt độ bảo quản-15 °C hoặc thấp hơn
Độ ổn định sau khi rã đôngTối đa 2 tháng ở nhiệt độ từ +2 °C đến +8 °C
Khối lượng sử dụng khuyến nghị~10 ml trên mỗi 75 cm² diện tích nuôi cấy
Thời gian ủ điển hình5 – 10 phút ở nhiệt độ phòng
Điều kiện vận chuyểnĐóng băng trên đá khô
Mục đích sử dụngChỉ dành cho mục đích nghiên cứu và sản xuất tiếp theo



Công thức (Thành phần trên mỗi lít)



Thành phần
Nồng độ (mg/L)




Muối vô cơ

Natri clorua (NaCl)8000,00
Phosphat hydro disodium (Na₂HPO₄)1150,00
Clorua kali (KCl)200,00
Phosphat dihydrogen kali (KH₂PO₄)200,00

Các thành phần khác

EDTA · 4Na (EDTA tetrasodium)220,00
Phenol đỏ3,00
Hỗn hợp enzyme độc quyền (có hoạt tính phân giải protein và collagen)1x



Accutase là nhãn hiệu đã đăng ký của Innovative Cell Technologies, Inc.

Dung dịch đông lạnh CM-1 của Cytion là một dung dịch bảo quản đông lạnh tiên tiến, được thiết kế để đảm bảo mức độ sống sót và chức năng cao nhất của tế bào sau khi rã đông. Dung dịch đa năng này phù hợp với nhiều loại tế bào khác nhau, bao gồm cả tế bào người và động vật, làm cho nó trở thành công cụ thiết yếu cho các ứng dụng nghiên cứu đa dạng. Được pha chế với sự kết hợp cân bằng kỹ lưỡng giữa các chất bảo vệ đông lạnh và dưỡng chất thiết yếu, Dung dịch đông lạnh CM-1 giảm thiểu sự hình thành tinh thể băng và stress tế bào trong quá trình đông lạnh, từ đó bảo vệ tính toàn vẹn của tế bào.
Các tính năng chính của Freeze Medium CM-1 bao gồm:

Tương thích rộng: Hiệu quả cho nhiều loại tế bào khác nhau, bao gồm tế bào nguyên thủy, tế bào gốc và dòng tế bào đã được thiết lập.
Độ sống cao: Được tối ưu hóa để tối đa hóa khả năng phục hồi và độ sống của tế bào sau khi rã đông, đảm bảo kết quả thí nghiệm đáng tin cậy.
Sẵn sàng sử dụng: Được chuẩn bị và tiệt trùng sẵn sàng cho việc sử dụng ngay lập tức, giảm thời gian chuẩn bị và nguy cơ nhiễm khuẩn.
Ổn định cao: Duy trì hiệu suất ổn định trong điều kiện bảo quản đông lạnh tiêu chuẩn, đảm bảo kết quả tái hiện được.
Tuổi thọ dài: CM-1 là môi trường bảo quản đông lạnh chứa huyết thanh, sẵn sàng sử dụng, có thể bảo quản trong tủ lạnh lên đến một năm.


Sử dụng CM-1 để đông lạnh tế bào

Để sử dụng CM-1 để đông lạnh cả tế bào bám dính và tế bào lơ lửng, hãy thực hiện các bước sau

Đối với tế bào bám dính, rửa và tách chúng khỏi nền nuôi cấy. Đối với tế bào treo lơ lửng, tiến hành trực tiếp đến bước tiếp theo.
Đếm tế bào để đảm bảo nồng độ phù hợp.
Ly tâm tế bào để tạo thành cặn, sau đó tái phân tán trong môi trường bảo quản đông lạnh CM-1.
Chuyển tế bào đã hòa tan vào ống đông lạnh.
Sử dụng phương pháp đông lạnh chậm trước khi chuyển tế bào vào lưu trữ lâu dài





Phương pháp
Mô tả
Các bước





❄️
Đóng băng thủ công

Một phương pháp từng bước bao gồm việc giảm nhiệt độ từ từ để đảm bảo sự sống còn của tế bào

1️⃣ Đặt tế bào vào môi trường đông lạnh trong tủ lạnh 4°C trong 40 phút.
2️⃣ Chuyển sang tủ đông -80°C trong 24 giờ.
3️⃣ Bảo quản tế bào trong nitơ lỏng để bảo quản lâu dài



❄️
Sử dụng Mr. Frosty


Một thiết bị tiện lợi cho phép đông lạnh với tốc độ kiểm soát mà không cần nguồn điện

1️⃣ Chuẩn bị tế bào trong ống cryovial với dung dịch đông lạnh.
2️⃣ Đặt ống cryovials vào hộp chứa Mr. Frosty.
3️⃣ Bảo quản ở -80°C trong 24 giờ trước khi chuyển sang nitơ lỏng



❄️
Tủ đông kiểm soát tốc độ


Máy đông lạnh chính xác cao của Thermo Fisher hoặc các nhà sản xuất khác được thiết kế để giảm nhiệt độ theo tốc độ kiểm soát

1️⃣ Cài đặt thiết bị để giảm nhiệt độ từ từ.
2️⃣ Đặt các tế bào đã chuẩn bị vào tủ đông.
3️⃣ Sau chu kỳ đông lạnh, chuyển tế bào sang nitơ lỏng









Bảo quản ống cryovial ở nhiệt độ dưới -130°C hoặc trong nitơ lỏng để bảo quản lâu dài.


Thành phần

Chứa FBS, DMSO, Glucose, Muối
Khả năng đệm: pH = 7.2 đến 7.6


Dung dịch bảo quản đông lạnh CM-1 của Cytion cung cấp giải pháp đáng tin cậy cho việc bảo quản đông lạnh, đảm bảo độ sống và chức năng cao của tế bào sau khi rã đông cho nhiều ứng dụng nghiên cứu khác nhau.

Tổng quan về sản phẩm
Thể tích: 100 ml
Bảo quản: ≤-15°C
Vô trùng: Lọc vô trùng
Dung dịch kháng sinh/kháng nấm (100x) là dung dịch vô trùng, sẵn sàng sử dụng, được thiết kế để giảm nguy cơ nhiễm khuẩn trong nuôi cấy tế bào và các ứng dụng phòng thí nghiệm liên quan. Dung dịch 100x này chứa sự kết hợp đã được chứng minh của penicillin, streptomycin và amphotericin B – cung cấp hoạt tính kháng khuẩn phổ rộng đối với vi khuẩn Gram dương, Gram âm, nấm men và nấm sợi. Công thức này phù hợp để sử dụng trong nuôi cấy tế bào eukaryotic, môi trường nuôi cấy vi khuẩn và các hệ thống nhạy cảm với nhiễm khuẩn khác, hỗ trợ các hoạt động phòng thí nghiệm sạch sẽ và nhất quán.
Ứng dụng và Lợi ích Được tối ưu hóa cho các quy trình nghiên cứu thông thường, dung dịch này được sử dụng rộng rãi để duy trì điều kiện vô trùng trong quy trình nuôi cấy tế bào. Nó cung cấp hiệu suất đáng tin cậy trong môi trường nhạy cảm với nhiễm khuẩn, giúp nhà nghiên cứu giảm nguy cơ tăng trưởng quá mức của vi sinh vật mà không ảnh hưởng đến sức khỏe tế bào hoặc tính tái hiện của thí nghiệm. Công thức đã được lọc vô trùng loại bỏ nhu cầu thực hiện các bước hòa tan bổ sung, hỗ trợ quá trình chuẩn bị môi trường nuôi cấy hiệu quả và giảm biến động trong các quy trình phòng thí nghiệm hàng ngày.
Cách sử dụng và tương thích Để đạt được nồng độ làm việc tiêu chuẩn, pha loãng dung dịch với tỷ lệ 1:100 vào môi trường nuôi cấy hoàn chỉnh của bạn. Sản phẩm tương thích với nhiều dòng tế bào động vật có vú và môi trường cơ bản. Với nguồn cung cấp ổn định, các nhà nghiên cứu được hưởng lợi từ sự liên tục đáng tin cậy của nguồn cung và kế hoạch logistics đơn giản hóa. Dung dịch nên được bảo quản ở ≤ –15 °C và tránh các chu kỳ đông lạnh-rã đông lặp đi lặp lại để duy trì độ ổn định. Chỉ dành cho mục đích nghiên cứu. Không sử dụng trong các quy trình chẩn đoán hoặc điều trị. Không sử dụng cho con người hoặc động vật.