BEWO 細胞系
BeWo 是一種源自人類絨毛膜癌的細胞系，廣泛應用於生物醫學研究。它作為一個寶貴的體外模型，用於探索胎盤發育及人類滋養層細胞合胞體化的複雜過程。 研究人員亦利用這些細胞來研究滋養層細胞的行為、激素分泌，以及物質透過胎盤的轉運。此外，BeWo 細胞在毒理學、感染及疾病傳播研究中亦有應用。
本文涵蓋了關於 BeWo 細胞的基本知識，可協助您在研究中妥善處理這些細胞。內容將包括：
BeWo 細胞的一般特性與來源
在研究中使用某種細胞系之前，了解其來源與一般特性至關重要。本文此部分將探討 BeWo 細胞系的來源、特徵等相關內容。您將在此了解：何謂 BeWo 絨毛癌細胞系？ 何謂 BeWo 合胞體化？BeWo 細胞源自何處？BeWo 細胞的形態為何？BeWo 的倍性為何？
- 胎盤細胞系 BeWo 源自 1968 年一例男性胎兒胎盤的惡性妊娠絨毛癌 [1]。因此，它成為胎盤研究中極具價值的模型。
- BeWo 細胞呈現上皮樣形態。
- BeWo 細胞相對較小，直徑介於 20 至 30 µM 之間 [2]。
- BeWo 細胞具有穩定的核型。其母系倍性為低四倍體。BeWo 細胞的模態染色體數為 86，範圍可能介於 71 至 178 之間。
- BeWo細胞會分泌多種激素，例如人類絨毛體細胞-乳腺激素、人類絨毛性生殖腺刺激素（hCG）以及類固醇激素。
- BeWo 細胞表達多種分子標記，包括 CK 7、E-鈣黏蛋白及 VE-鈣黏蛋白。
B30亞系
B30 是 BeWo 細胞的一個亞系。它常用於研究營養物質的攝取與運輸，這歸因於該細胞在多孔膜上具有旺盛的生長能力。
BeWo 與 JEG-3
BeWo 和 JEG-3 細胞系均源自絨毛癌，並應用於胎盤研究。與 JEG-3 相比，BeWo 細胞分泌的激素（例如人絨毛膜促性腺激素（hCG）和雌二醇）水平較低。
BeWo 細胞系：培養資訊
若不了解關鍵細節，維持細胞培養可能會相當棘手。例如：BeWo 的倍增時間是多少？BeWo 細胞培養基是什麼？該如何培養 BeWo 細胞系？以及該如何冷凍 BeWo 細胞？
BeWo 細胞培養的重點
倍增時間：
BeWo 細胞的細胞數倍增時間約為 30 小時。
貼壁或懸浮培養：
BeWo 屬於貼壁型細胞系。
細胞接種密度：
BeWo 細胞的建議接種密度為 1 × 10⁴ 細胞/cm²。接種時，先將舊培養液從細胞中移除，並以 1×PBS 沖洗細胞。 隨後加入 Accutase（傳代溶液），並於室溫下培養 8 至 10 分鐘。接著，將脫附的細胞加入培養基中並進行離心。收集到的細胞經重新懸浮後，倒入新的培養瓶中。
生長培養基：
BeWo 細胞的培養使用含 10% FBS、2.0 mM L-谷氨醯胺、2.0 mM 丙酮酸鈉及 2.5 g/L NaHCO₃ 的 Ham's F12K 培養基。BeWo 細胞培養基應每週更換 2 至 3 次。
培養條件：
BeWo 細胞維持於設定為攝氏 37 度、並供應 5% 二氧化碳的加濕培養箱中。
儲存：
冷凍的 BeWo 細胞應儲存於電控超低溫冷凍櫃中，溫度需低於 -150°C，或儲存在液態氮的氣相中。
冷凍程序與培養基：
建議使用 CM-1 或 CM-ACF 冷凍培養基來冷凍 BeWo 細胞。細胞應採用緩慢冷凍法進行冷凍。此方法每分鐘僅允許溫度下降 1 度，藉此避免細胞受到任何冷衝擊，並保護細胞的存活率。
解凍程序：
將冷凍細胞浸入預先設定為 37°C 的水浴中 40 至 60 秒，直至僅剩一小塊冰塊為止。 隨後加入新鮮的培養基，並將細胞離心以去除冷凍培養基成分。收集到的細胞沉澱經重新懸浮後，分裝至培養瓶中進行培養。
生物安全等級：
處理及維護 BeWo 細胞培養物，必須在生物安全等級 1 的實驗室中進行。
發佈日期：2023 年 | 最後審閱日期：2026 年 5 月
BeWo 細胞系的優點與缺點
BeWo 細胞具有獨特的特性，並伴隨著特定的優點與缺點。在本節中，我們將探討其中一些值得注意的方面。
優點
BeWo 絨毛癌細胞系的主要優點包括：
-
體外胎盤細胞模型
BeWo 細胞提供了一個用於研究滋養層細胞行為及胎盤合胞體化的體外模型，能夠重現那些在體內難以觀察的過程。
-
激素分泌
BeWo 細胞會分泌人絨毛膜激素（hCG）及胎盤乳素等激素，使其在激素調控研究及生殖生物學研究中具有重要價值。
缺點
BeWo滋養層細胞的缺點包括：
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癌細胞系
BeWo 細胞源自絨毛癌，這是一種胎盤腫瘤。此來源可能無法完全代表正常胎盤細胞的功能。
BeWo細胞的研究應用
BeWo 細胞系廣泛應用於胎盤研究。此處列舉該細胞系的幾項特定應用：
- 胎盤與妊娠相關研究：BeWo 細胞在胎盤及妊娠相關研究中扮演關鍵角色。例如，研究人員利用這些細胞研究物質（包括藥物、營養素和毒素）穿越胎盤屏障的運輸過程。 此外，研究人員亦藉此探究激素的產生與調控，包括人絨毛膜促性腺激素（hCG）、胎盤乳素及類固醇激素。這對於理解懷孕期間的激素變化至關重要。 2018 年的一項研究探討了溴化阻燃劑（BFRs）對人類滋養層細胞系（BeWo）中硫轉移酶活性的影響。該酶參與調節甲狀腺激素的細胞內濃度 [3]。
- 感染與疾病研究：BeWo 細胞亦被用於探究病原體與胎盤細胞之間的相互作用。這項研究對於理解可能由母體傳染給胎兒的疾病，以及制定保護胎兒健康的策略，具有重要價值。 此外，該細胞系有助於研究人員探究妊娠期間發生的併發症，例如子癇前症。例如，米哈莉娜·布拉萊夫斯卡（Michalina Bralewska）於 2023 年進行的一項研究，利用 BeWo 滋養層細胞模型發現，色素顆粒蛋白 A （CgA）及其衍生的胜肽——卡泰斯汀（CST），可能在子癇前症（PE）病理發生的複雜過程中扮演一定角色 [4]。 隨後，另一項研究利用 BeWo 絨毛膜癌細胞系，探討了三七苷的抗癌潛力。該研究更透過在實驗前後進行比較蛋白質體學分析，致力於發現相關生物標記物 [5]。
5. 以 BeWo 細胞為主題的研究論文
以下是一些以 BeWo 滋養層細胞為主題的重要研究論文。
AMPK 訊號傳導調節人類滋養層細胞系 BeWo 中的線粒體自噬與線粒體 ATP 生成
這項發表於《Frontiers in Bioscience-Landmark》（2022年）的研究提出，AMPK 訊號傳導是透過 FUNDC1 及 PRKN 所促進的線粒體自噬途徑，在 BeWo 滋養層細胞中激活線粒體自噬。因此，線粒體自噬有助於維持 ATP 生成及線粒體膜電位。
對羥基苯甲酸乙酯透過Caspase-3途徑誘導人類胎盤BeWo細胞發生凋亡
此篇論文發表於《Animal Cells and Systems》（2020年）。該研究提出，對羥基苯甲酸乙酯是透過調節半胱天冬酶-3（caspase-3）途徑，介導 BeWo 細胞的凋亡。
透過定量蛋白質體學分析人類胎盤組織及細胞系（BeWo、JEG-3、JAR 及 HTR-8/SVneo）對異物及類固醇的代謝潛力
這項發表於《藥物代謝與轉運》（2023年）的研究，利用包括 BeWo、JAR、JEG-3 及 HTR-8/SVneo 在內的胎盤細胞系，探討細胞內外源性物質與類固醇的沉積情況。
人類胎盤中的阿佩林及其受體：在滋養層 JEG‑3 和 BeWo 細胞中的表達、訊號傳導途徑，以及對細胞增殖與細胞週期的調控
這篇發表於《國際分子醫學期刊》（2020年）的研究論文提出，作為APJ受體配體的阿佩林（Apelin），可透過APJ、ERK1/2、Stat3及AMPK訊號傳導途徑促進BeWo細胞增殖。因此，它可能是調節胎盤發育的一種關鍵脂肪因子。
抗癲癇藥物與胎兒營養素：對人類胎盤細胞系中膽鹼轉運蛋白的影響
這項發表於《癲癇》（Epilepsia，2021年）的研究，探討了胎兒營養素與抗癲癇藥物對人類來源滋養層細胞系 BeWo 中膽鹼轉運蛋白的影響。
BeWo 細胞系的相關資源：實驗方案、影片及其他
以下是關於 BeWo 細胞的線上資源：
- 體外轉染：此影片將協助您學習適用於貼壁細胞的體外質體 DNA 轉染操作指南。
以下連結包含 BeWo 細胞的細胞培養資訊：
- BeWo 細胞：此網站包含關於 BeWo 細胞系的重要細胞培養資訊，涵蓋細胞培養基與培養條件等內容，並提供傳代培養、冷凍保存細胞及增殖性培養物的處理操作指南。
參考文獻
- Weber, M. 等，六個人類滋養層細胞系的細胞基因組學。《胎盤》（Placenta），2021 年，103 期：第 72-75 頁。
- Kolokol'tsova, T. 等，《長期培養中滋養層細胞的特徵》。《實驗生物學與醫學公報》，2017 年，164 期：第 259-265 頁。
- Leonetti, C.P.、C.M. Butt 及 H.M. Stapleton，《溴化阻燃劑化學物質對人類絨毛癌胎盤細胞系 BeWo 中甲狀腺激素硫轉移酶活性的干擾》。 《Chemosphere》，2018年，第197卷：第81-88頁。
- Bralewska, M.、T. Pietrucha 及 A. Sakowicz，《子癇前症環境導致 HTR-8/SVneo 及 BeWo 滋養層細胞系中 CgA 衍生的 CST 蛋白水平降低》。《國際分子科學期刊》，2023 年。 24(8)：第 7124 頁。
- 胡，Y.等人，《向 BeWo 細胞系添加藥用成分「三七素」的比較蛋白質體學分析》。《分子》，2022年。27(5)：第 1603 頁。