威爾姆斯8型細胞

USUSD$800.00*

產品以乾冰冷藏，並裝於低溫管中運送。每支低溫管通常含有 3 × 10^⁶ 個細胞（適用於貼壁細胞系）或 5 × 10⁶ 個細胞（適用於懸浮細胞系）（詳情請參閱該批次的分析證書）。

價格不含稅，另加運費

cryovial

產品編號： 300416

安全資料表

產品說明書

說明	Wilms8 細胞系源自一名攜帶胚系 WT1 突變的兒童患者所患的原發性威爾姆斯腫瘤。該細胞系的特徵在於 WT1 基因存在純合性無義突變（c.1168 C>T, p.R390X），導致 WT1 功能完全喪失。 WT1 對於腎臟的正常發育至關重要，其失活是某些侵襲性威爾姆斯腫瘤亞型的共同特徵，特別是那些表現出間質分化的腫瘤。因此，Wilms8 提供了一個寶貴的模型，用於研究 WT1 缺失對腫瘤形成的影響，特別是在具有明顯間質成分的威爾姆斯腫瘤背景下。除了 WT1 突變外，Wilms8 細胞還攜帶 CTNNB1 基因（p.S45A）的突變，該基因編碼 Wnt 訊號傳導路徑的關鍵調節因子 β-catenin。絲氨酸 45 位的突變會干擾導致 β-catenin 降解的正常磷酸化過程，使其在細胞核內穩定並積聚。這導致 Wnt 訊號傳導的持續活化，進而驅動細胞增殖，並促成 Wilms8 細胞系的致癌特性。 Wilms8 細胞中 WT1 缺失與異常 Wnt 訊號傳導之間的相互作用，使其成為理解威爾姆斯腫瘤生物學中這些路徑分子機制的重要模型。 Wilms8 細胞呈現間質表型，其特徵為表達維曼汀，且缺乏細胞角蛋白等上皮標記物。這與原始腫瘤中觀察到的間質分化現象相符。這些細胞展現出有限的進一步間質分化能力，例如在特定條件下形成類肌肉細胞。對 Wilms8 的蛋白質體學分析揭示了多種受體酪胺酸激酶（RTKs）的活化，包括 PDGFRβ 和 AXL，這些激酶參與細胞存活、遷移和增殖等關鍵過程。下游訊號傳導路徑的活化，尤其是 MAPK 和 PI3K/AKT 路徑，進一步加劇了 Wilms8 細胞的侵襲性特徵。總體而言，Wilms8 細胞系是探究由 WT1 缺失及 Wnt 訊號傳導異常所驅動的威爾姆斯腫瘤分子基礎的重要工具。其遺傳與表型特徵，使其成為研究這些關鍵路徑之間相互作用，以及識別具有間質成分之威爾姆斯腫瘤潛在治療標靶的可靠平台。
生物體	人類
組織	腎臟
疾病	威爾姆斯腫瘤
應用	體外細胞培養模型。生化研究

年齡	8個月
性別	男性
族裔	高加索人
形態學	紡錘狀
細胞類型	威爾姆斯細胞
生長特性	依附者

引用	Wilms8（Cytion 型號 300416）
生物安全等級	1
NCBI_TaxID	9606
Cellosaurus 編號	CVCL_A5SJ

突變譜	WT1 突變狀態：c.1168C>T 純合子，p.390x，LOH：，CTNNB1 突變狀態：TCT>GCT 雜合子，p.S45A

培養基	MSCGM 套組（由 Lonza 提供）
解離試劑	Accutase
傳代培養	從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
冷凍培養基	作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
細胞解凍與培養	請確認小瓶在送達時仍處於深度冷凍狀態，因為細胞是透過乾冰運送，以確保在運輸過程中維持最佳溫度。收到後，請立即將冷凍管儲存於低於 -150°C 的溫度下，以確保細胞完整性；若需立即進行培養，則請直接進行步驟 3。若需立即進行培養，請將試管浸入含有清潔水及抗菌劑的 37°C 水浴中，並輕輕搖動 40-60 秒，直至僅剩一小塊冰塊，以迅速解凍試管。後續所有步驟均須在無菌條件下於通風櫥內進行，開啟冷凍試管前請先以 70% 乙醇消毒。小心地打開已消毒的試管，將細胞懸浮液轉移至含有 8 毫升室溫培養基的 15 毫升離心管中，並輕輕混合。將混合物以 300 x g 離心 3 分鐘以分離細胞，並小心地棄去含有殘留冷凍培養基的上清液。將細胞沉澱輕輕懸浮於 10 毫升的新鮮培養基中。若為貼壁細胞，將懸浮液分裝至兩個 T25 培養瓶中；若為懸浮培養，則將所有培養基轉移至一個 T25 培養瓶中，以促進有效的細胞相互作用與生長。請遵循既定的傳代培養程序，以持續培養和維護細胞系，確保實驗結果的可靠性。
培養環境	37°C，5% CO_₂，加濕環境。
運送條款	冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
儲存條件	若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

不孕症	透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

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一般資訊

特徵

監管數據

生物分子資料

處理方式

品質控制與分子分析