Linha celular A375 – Um guia sobre a pesquisa do melanoma
A375 é uma linha celular de melanoma humano amplamente utilizada em pesquisas de toxicologia e imuno-oncologia. Os pesquisadores utilizam essa linha celular para estudar a biologia do câncer e as vias de sinalização, testar ou selecionar potenciais agentes anticâncer e desenvolver novas e eficazes terapias.
- Meio de crescimento
- Consulte a página do produto
- Tempo de duplicação
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- Tipo de crescimento
- Adere
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível na
- Cytion — Encomende A375
- Origem e características gerais das células A375
- Células A375: Informações sobre cultura celular
- Vantagens e limitações da linhagem celular A375
- Compre agora suas células A375
- Aplicações de pesquisa da linhagem celular A375
- Células A375: Publicações
- Recursos para a linha celular A375: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes (FAQ) sobre as células A375
- Referências
- Perguntas frequentes
Origem e características gerais das células A375
Conhecer a origem e as características gerais de uma linha celular pode ajudar você a planejar seu uso em pesquisas. Esta seção do artigo abordará a origem e as características da linha celular A375. Por exemplo, o que é a linha celular A375? Quais são as características da linha celular A375? De onde vêm as células A375? Qual é a morfologia das células de melanoma A375? Qual é o tamanho das células A375?
- A linha celular de câncer de pele A375 teve origem na cultura de explante de um tumor sólido de uma mulher de 54 anos com melanoma maligno [1].
- As células A375 apresentam morfologia de tipo epitelial.
- O tamanho das células A375 é relativamente menor em comparação com outras linhagens celulares. Elas possuem, aproximadamente, um diâmetro de 12 µm.
- As células do melanoma A375 são hipotriploides. O número modal de cromossomos para essa linhagem celular é 62. Normalmente, cada célula possui nove cromossomos marcadores e uma cópia dos cromossomos normais N2, N6 e N22.
Células A375: Informações sobre cultura celular
As culturas de células A375 são fáceis de manter. Elas não apresentam requisitos complexos de cultura celular. Esta seção ajudará você a conhecer as informações necessárias sobre a cultura celular, como, por exemplo, qual é o tempo de duplicação das células A375. Qual é o meio de cultura da linhagem celular A375? Qual é a densidade de semeadura das células A375? As células de melanoma A375 são aderentes?
Pontos-chave para a cultura de células A375
Tempo de duplicação populacional:
O tempo de duplicação das células A375 é de 20 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A A375 é uma linha celular de melanoma humano aderente.
Densidade de semeadura:
A densidade celular de 1 x 10⁴ células/cm² é ideal para culturas de células A375. As células aderentes são lavadas com solução salina tamponada com fosfato (PBS) 1x e incubadas com solução de passagem (Accutase). Em seguida, as células são adicionadas ao meio de cultura e centrifugadas. As células colhidas são ressuspensas em meio de cultura e transferidas para novos frascos para crescimento.
Meio de crescimento:
Recomenda-se o DMEM como meio ideal para A375 quando suplementado com 10% de soro fetal bovino (FBS), 4,5 g/L de glicose, 1,5 g/L de NaHCO₃, 4 mM de L-glutamina e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio para A375 deve ser renovado 2 a 3 dias por semana.
Condições de crescimento:
As células de melanoma A375 são cultivadas em uma incubadora umidificada (37 °C) com um suprimento de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células A375 congeladas devem ser mantidas a temperaturas inferiores a -150 °C na fase de vapor de nitrogênio líquido ou em um freezer elétrico.
Processo de congelamento e meio:
Os meios CM-1 ou CM-ACF são utilizados para congelar a linhagem celular A375. Optou-se por um processo de congelamento lento, que permite uma redução gradual da temperatura de 1 °C, a fim de proteger a viabilidade celular.
Processo de descongelamento:
O frasco com as células de melanoma A375 congeladas é agitado rapidamente em banho-maria por 40 a 60 segundos, até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. As células são adicionadas a meio fresco e centrifugadas para remover os resíduos do meio de congelamento. O sedimento celular obtido foi novamente ressuspenso e transferido para novos frascos.
Nível de biossegurança:
As culturas de A375 são manuseadas e mantidas em laboratórios com nível de biossegurança 1.
Vantagens e limitações da linhagem celular A375
Assim como outras linhas celulares, a linha celular de melanoma A375 apresenta uma combinação única de vantagens e limitações, o que a torna uma ferramenta valiosa para a pesquisa sobre o câncer de melanoma. Esta seção lista apenas alguns dos principais prós e contras da linha celular A375.
Vantagens
As principais vantagens das células A375 são mencionadas a seguir:
- Modelo tumoral de melanoma: a linha celular A375 foi derivada de um tumor de melanoma maligno, servindo, assim, como um modelo tumoral inestimável para investigar a biologia do melanoma e intervenções terapêuticas. Essas células apresentam propriedades semelhantes às do melanoma, como alta taxa de proliferação e invasividade.
- Tumorigenicidade: As células A375 são altamente tumorigênicas, o que significa que podem formar tumores. Relata-se que as células A375 produzem melanomas amelanóticos agressivos em camundongos NIH Swiss tratados com soro antitimócito (um agente imunossupressor).
- Bem caracterizada: A A375 é uma linhagem celular geneticamente bem caracterizada. Ela possui mutações genéticas específicas, semelhantes às do melanoma. As mutações da A375 incluem a alteração do gene BRAF, tornando-a sensível a inibidores específicos do BRAF. Esse perfil genético torna, portanto, as células A375 uma excelente ferramenta de pesquisa sobre o câncer para estudar vias moleculares subjacentes e terapias direcionadas.
Limitações
As limitações associadas às células A375 são:
- Limitações in vitro: A A375 é um modelo tumoral in vitro. Embora imite as características do melanoma, ela não consegue representar totalmente a complexidade dos tumores de melanoma. Portanto, deve-se ter cautela ao generalizar os resultados in vitro para estudos clínicos.
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Aplicações da linha celular A375 na pesquisa
A linha celular A375 tem amplas aplicações na pesquisa sobre o câncer. Aqui estão algumas das áreas mais comuns em que as células A375 são utilizadas.
- Pesquisa sobre câncer: as células A375 têm ampla aplicação na pesquisa sobre melanoma. Pesquisadores utilizaram essas células para investigar a biologia do câncer de pele, seus processos e os mecanismos de sinalização celular subjacentes, incluindo proliferação, migração e invasão celular. Isso também pode ajudar os pesquisadores a identificar novos alvos terapêuticos moleculares. Um estudo conduzido por Lin Zhu e colegas em 2019 utilizou células de melanoma A375 altamente agressivas e descobriu o papel do microRNA-3662 no crescimento e na invasão das células de melanoma A375. Os resultados do estudo indicam que o microRNA-3662 tem como alvo o gene ZEB1 e regula o crescimento das células de melanoma in vitro e in vivo no modelo tumoral A375 [2]. Da mesma forma, uma pesquisa realizada em 2018 constatou que as vias PI3K/AKT e MAPK/ERK estão envolvidas na proliferação e metástase da linhagem celular A375 [3].
- Descoberta e testes de medicamentos: a linhagem celular A375 é um modelo tumoral in vitro útil para testar e selecionar potenciais agentes anticâncer. Pesquisadores avaliam a toxicidade e a eficácia de novos medicamentos quimioterápicos, compostos e outras terapias utilizando essas células de melanoma A375. Por exemplo, um estudo explorou as propriedades anticâncer de micro e nanovesículas derivadas da toranja em células cancerosas de melanoma humano A375. Os resultados revelaram que as micro e nanovesículas induzem a parada do ciclo celular e a apoptose, além de inibir a expressão gênica na proliferação, migração e invasão celular [4].
Células A375: Publicações
Algumas publicações científicas significativas que abordam as células A375 são mencionadas aqui.
Este estudo foi publicado no Journal of Oncology em 2019. O estudo propôs que o tratamento combinado com vitamina D e seus análogos melhora a atividade anticâncer da cisplatina e da dacarbazina nas células de melanoma A375.
Esta pesquisa foi publicada no Journal of Herbal Medicine em 2022. Este estudo explorou os efeitos antimelanoma do gel de aloe vera em células de melanoma A375.
Este estudo publicado na revista Oncogene (2021) propôs que o membro 2 da família da fermitina (FERMT2 ou kindlin-2) estimula a progressão do melanoma por meio da ativação da MAPK, através da ligação com p-α-Pix e Rac1.
Este estudo publicado na revista The American Journal of Dermatopathology (2019) propôs que a FARP1 pode facilitar o desenvolvimento e a progressão do melanoma cutâneo. Assim, ela pode ser um alvo terapêutico útil.
Este artigo de pesquisa foi publicado na revista *Bioengineered* (2019). Este estudo explorou a atividade citotóxica e apoptótica de um extrato da planta *Phyllodium elegans* em linhagens celulares de carcinoma humano, incluindo a A375.
Recursos para a linhagem celular A375: protocolos, vídeos e muito mais
A seguir, apresentamos alguns recursos on-line sobre as células A375.
- Transfecção de células A375: este tutorial em vídeo ajudará você a aprender passo a passo como realizar a transfecção de células A375.
- Cultura celular: este vídeo traz informações muito úteis sobre o cultivo de linhagens celulares.
Os protocolos de cultura celular para as células A375 estão listados aqui.
- Linha celular A375: este link contém informações úteis sobre o cultivo e a manutenção da linha celular A375, incluindo meios de cultura para A375 e o manuseio de culturas A375 congeladas e em proliferação.
A linhagem celular A375 é uma linhagem de células de melanoma humano derivada de um tumor de melanoma maligno. É comumente utilizada na pesquisa sobre o câncer devido ao seu perfil genético bem caracterizado.
As células A375 são utilizadas em diversos estudos, incluindo os efeitos do rutosídeo no melanoma, o silenciamento da expressão do TMSB4X e a terapia fotodinâmica para tumores.
O xenoenxerto da linha celular A375 é um modelo comum para o estudo da progressão tumoral e de intervenções terapêuticas in vivo. Os pesquisadores implantam células A375 em camundongos para criar xenoenxertos que imitam o melanoma humano.
Estudos que envolvem a exposição a ondas milimétricas na faixa de GHz exploram seus efeitos nas células A375, incluindo possíveis alterações no comportamento celular e na expressão da apoptose.
Demonstrou-se que o tratamento com rutosídeo afeta o citoesqueleto e o citoesqueleto de actina das células A375, o que pode influenciar suas propriedades biomecânicas e sua capacidade de invasão.
As pesquisas costumam se concentrar na expressão de proteínas relacionadas à apoptose, nos níveis de Tβ4 e nas interações com compostos associados ao melanoma, a fim de compreender os mecanismos moleculares subjacentes ao melanoma.
Os pesquisadores podem acessar o certificado de análise, baixar a ficha de dados de segurança e consultar o certificado de origem das células A375 para garantir que elas atendam aos padrões de qualidade e segurança.
As células A375 apresentam modos específicos de crescimento e formam camadas celulares distintas, o que as torna adequadas para diversas configurações experimentais na pesquisa sobre o melanoma.
A terapia fotodinâmica, que envolve o azul de metileno e outros fotossensibilizadores sob ação da luz, é utilizada para induzir a morte celular em células cancerosas A375, oferecendo novas perspectivas sobre possíveis tratamentos para o melanoma.
Estudos sobre o cariótipo, as características de células-tronco e as células migratórias do melanoma ajudam a compreender a natureza agressiva e o potencial metastático das células A375 na pesquisa sobre o melanoma.
Referências
- Avram, S., et al., Padronização de modelos de melanoma humano A375 na membrana corioalantóica de embriões de galinha e em camundongos Balb/c nude. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
- Zhu, L., et al., O microRNA-3662 tem como alvo a ZEB1 e atenua a invasão da linhagem celular de melanoma A375, altamente agressiva. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
- Peng, X., et al., A oxyfadichalcone C inibe a proliferação e a metástase das células do melanoma A375 por meio da supressão das vias PI3K/Akt e MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
- Stanly, C., et al., Micro e nanovesículas derivadas da toranja apresentam perfis metabolômicos distintos e atividades anticâncer na linhagem celular de melanoma humano A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.