Células A375
US$ 395,00*
Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).
Principais informações sobre as células A375
| Descrição | A linhagem celular de melanoma humano A375, isolada da pele de uma paciente de 54 anos com melanoma maligno, é um recurso significativo na pesquisa sobre o câncer, particularmente no estudo do melanoma humano, uma das formas mais agressivas de câncer de pele. A linhagem celular A375 é conhecida por sua rápida taxa de crescimento e alto potencial tumorigênico, o que a torna adequada para diversas aplicações experimentais, incluindo estudos in vitro sobre proliferação, migração e invasão celular, bem como ensaios de tumorigênese in vivo. As células A375 apresentam alto potencial tumorigênico em camundongos imunossuprimidos, formando melanomas amelanóticos de crescimento rápido. A presença da mutação BRAFV600E nas células A375 torna-as altamente sensíveis à inibição da MEK, proporcionando uma ferramenta valiosa para a investigação de terapias direcionadas no tratamento do melanoma. O tratamento das células A375 com vemurafenibe, por exemplo, demonstrou aumentar a indução de moléculas do MHC de Classe I e Classe II, oferecendo insights sobre as interações entre as células de melanoma e o sistema imunológico. Além de seu papel na pesquisa básica sobre o melanoma, as células A375 são utilizadas na triagem de medicamentos e na investigação de vias de sinalização envolvidas na sobrevivência, proliferação e metástase das células cancerosas. As células A375 têm sido utilizadas também em estudos de apoptose; além disso, as linhagens celulares isogênicas A375 e a introdução de proteínas repórteres como a Luc (luc2) permitem o estudo da função gênica e o monitoramento das respostas celulares em tempo real. A adequação das células A375 como hospedeiras de transfecção e seu uso em linhagens celulares repórteres estáveis também contribuem para sua versatilidade em aplicações de pesquisa. Em resumo, a linhagem celular de melanoma humano A375 é uma ferramenta fundamental na investigação do melanoma humano, oferecendo um modelo abrangente para o estudo dos mecanismos moleculares e celulares subjacentes à progressão do melanoma, à eficácia de agentes terapêuticos e à interação entre as células cancerosas e o sistema imunológico. |
|---|---|
| Organismo | Humano |
| Tecido | Pele |
| Doença | Melanoma |
| Sinônimos | A 375, A-375, A375-MEL, A375-mel, A375mel |
Propriedades da linhagem celular de melanoma A375
| Idade | 54 anos |
|---|---|
| Gênero | Mulher |
| Morfologia | De tipo epitelial |
| Propriedades de crescimento | Aderente |
Especificações
| Referência | A375 (número de catálogo da Cytion 300110) |
|---|---|
| Nível de biossegurança | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| Número de acesso do Cellosaurus | CVCL_0132 |
Genótipo da linha celular A375
| Expressão de antígenos | P53 positivo |
|---|---|
| Tumorigênico | Sim, em camundongos nude |
| Perfil mutacional | Mutação BRAF V600E |
| Cariótipo | As células A375 são caracterizadas por seu cariótipo hipotriploide, com um número modal de cromossomos de 62, e pela presença de nove cromossomos marcadores em cada célula, o que destaca as alterações genéticas associadas ao melanoma maligno. |
Manuseio
| Meio de cultura | DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a) |
|---|---|
| Suplementos | Adicione 10% de FBS ao meio |
| Reagente de dissociação | Accutase |
| Tempo de duplicação | 20 horas |
| Subcultura | Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco. |
| Densidade de semeadura | 1 x 104 células/cm² resultará em uma monocamada confluente em 4 dias. |
| Renovação de fluidos | 2 a 3 vezes por semana |
| Recuperação pós-degelo | Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 4 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas. |
| Meio de congelamento | Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação. |
| Descongelamento e cultura de células |
|
| Atmosfera de incubação | 37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada. |
| Condições de envio | As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado. |
| Condições de armazenamento | Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido. |
Perfil genético
| Esterilidade | A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias. |
|---|
Certificado de Análise (CoA)
| Número do lote | Tipo de certificado | Data | Número de catálogo |
|---|---|---|---|
| 300110-190525 | Certificado de Análise | 21. Jul. 2025 | 300110 |
| 300110-931122w | Certificado de Análise | 15. Apr. 2025 | 300110 |