Células de Wilms11

US$ 800,00*

Os produtos são enviados congelados em gelo seco, em criotubos. Cada criotubo contém, normalmente, 3 × 10^⁶ células para linhagens aderentes ou 5 × 10^⁶ células para linhagens em suspensão (consulte o Certificado de Análise [CoA] do lote para obter mais detalhes).

Preços sem impostos, mais custos de envio

cryovial

Número do produto: 300420

Ficha de dados de segurança

Ficha técnica do produto

Certificado de Análise (CoA)

Descrição	A linhagem celular Wilms11 foi derivada de um tumor de Wilms primário (nefroblastoma) em um paciente pediátrico. Ao contrário de muitas outras linhagens celulares de tumor de Wilms, a Wilms11 é caracterizada pela presença do WT1 de tipo selvagem, o que significa que não apresenta mutações no gene WT1, que é tipicamente associado a tumores de Wilms que exibem fenótipos mais agressivos ou estromais. No entanto, o tumor Wilms11 apresentou diferenciação estromal significativa, com grandes áreas de diferenciação rabdomiomatosa, indicativas da presença de elementos mesenquimais no tumor. A presença do WT1 de tipo selvagem, aliada à diferenciação estromal do tumor, oferece um modelo único para a compreensão da biologia do tumor de Wilms em casos em que não há mutações no WT1. Estudos genéticos do Wilms11 demonstraram que essa linhagem celular carrega uma mutação específica do tumor no CTNNB1, o gene que codifica a β-catenina, que desempenha um papel crucial na via de sinalização Wnt. No Wilms11, essa mutação afeta a serina 45, um local-chave de fosforilação envolvido na degradação da β-catenina. A mutação no CTNNB1 resulta na estabilização da β-catenina, levando ao seu acúmulo e à ativação constitutiva da via de sinalização Wnt, um fator determinante da proliferação celular e da tumorigênese. Isso torna o Wilms11 um importante modelo para o estudo da interação entre a sinalização Wnt e o desenvolvimento do tumor de Wilms, particularmente nos casos em que o WT1 permanece intacto. Análises proteômicas do Wilms11 revelaram a ativação de vários receptores de tirosina quinase (RTKs), incluindo PDGFRβ e AXL, que estão envolvidos na promoção do crescimento e da sobrevivência das células tumorais. Vias de sinalização a jusante, como as vias MAPK e PI3K/AKT, também são ativadas nas células Wilms11, contribuindo para seu comportamento tumorigênico. A capacidade das células Wilms11 de sofrerem diferenciação mesenquimal, particularmente diferenciação rabdomiomatosa, destaca seu potencial como modelo para o estudo dos componentes mesenquimais do tumor de Wilms. De modo geral, o Wilms11 serve como uma ferramenta valiosa para investigar os mecanismos moleculares que impulsionam a tumorigênese de Wilms na ausência de mutações no WT1, mas no contexto da ativação da via Wnt.
Organismo	Humano
Tecido	Rim
Doença	Tumor de Wilms
Aplicações	Modelo de cultura celular in vitro. Estudos bioquímicos

Idade	22 meses
Gênero	Masculino
Etnia	caucasiano
Morfologia	Em forma de fuso
Tipo de célula	Células de Wilms
Propriedades de crescimento	Aderente

Referência	Wilms11 (número de catálogo da Cytion 300420)
Nível de biossegurança	1
NCBI_TaxID	9606
Número de acesso do Cellosaurus	CVCL_A5SM

Perfil mutacional	Status da mutação no gene WT1: homozigoto para as mutações c.901c>T e p.R301x no gene WT1. LOH: . Status da mutação no gene CTNNB1: tipo selvagem

Meio de cultura	Kit MSCGM (da Lonza)
Reagente de dissociação	Accutase
Subcultura	Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Meio de congelamento	Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Descongelamento e cultura de células	Verifique se o frasco permanece profundamente congelado no momento da entrega, pois as células são enviadas em gelo seco para manter as temperaturas ideais durante o transporte. Após o recebimento, armazene o criovial imediatamente a temperaturas abaixo de -150 °C para garantir a preservação da integridade celular ou prossiga para a etapa 3, caso seja necessária a cultura imediata. Para cultura imediata, descongele rapidamente o frasco imergindo-o em um banho-maria a 37 °C com água limpa e um agente antimicrobiano, agitando suavemente por 40 a 60 segundos até que reste apenas um pequeno pedaço de gelo. Realize todas as etapas subsequentes em condições estéreis em uma cabine de fluxo, desinfetando o criovial com etanol a 70% antes de abri-lo. Abra cuidadosamente o frasco desinfetado e transfira a suspensão celular para um tubo de centrífuga de 15 ml contendo 8 ml de meio de cultura à temperatura ambiente, misturando delicadamente. Centrifugue a mistura a 300 x g por 3 minutos para separar as células e descarte cuidadosamente o sobrenadante contendo o meio de congelamento residual. Ressuspender suavemente o sedimento celular em 10 ml de meio de cultura fresco. Para células aderentes, dividir a suspensão entre dois frascos de cultura T25; para culturas em suspensão, transferir todo o meio para um frasco T25 a fim de promover a interação e o crescimento celular eficazes. Siga os protocolos de subcultura estabelecidos para o crescimento contínuo e a manutenção da linhagem celular, garantindo resultados experimentais confiáveis.
Atmosfera de incubação	37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
Condições de envio	As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
Condições de armazenamento	Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Esterilidade	A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência. Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Número do lote	Tipo de certificado	Data	Número de catálogo
300420-221	Certificado de Análise	23. May. 2025	300420
300420-240226	Certificado de Análise	25. Mar. 2026	300420

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Informações gerais

Características

Dados regulatórios

Dados biomoleculares

Manuseio

Controle de Qualidade e Análise Molecular

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