Cellules A549-RFP

La lignée A549-RFP est un dérivé marqué par fluorescence de la lignée cellulaire humaine A549 d’adénocarcinome pulmonaire, modifiée génétiquement pour exprimer de manière constitutive la protéine fluorescente rouge (RFP) à des fins de visualisation et de suivi en temps réel. La lignée parentale A549 a été établie à partir d’un adénocarcinome pulmonaire provenant d’un donneur adulte et présente une morphologie épithéliale avec des caractéristiques de croissance adhérente. Les cellules A549 conservent les caractéristiques des cellules épithéliales alvéolaires de type II, notamment l’expression des cytokératines et la capacité de produire des protéines associées au surfactant. L’introduction d’une cassette d’expression stable de la RFP permet une fluorescence continue sans altérer de manière significative les propriétés prolifératives et métaboliques intrinsèques de la lignée parentale, ce qui rend la lignée A549-RFP adaptée aux études d’imagerie longitudinales.

La caractérisation fonctionnelle des cellules A549 au sein de vastes panels de cellules cancéreuses a démontré que la taille cellulaire, la teneur en protéines et le taux de synthèse protéique sont positivement corrélés au volume cellulaire, et que les cellules plus volumineuses ont tendance à proliférer plus lentement. Dans les analyses comparatives, les cellules A549 se situent parmi les lignées de cellules cancéreuses épithéliales relativement plus petites et à prolifération plus rapide, contrairement aux cellules plus volumineuses, de type plus mésenchymateux, qui présentent une expression plus élevée de la vimentine et des niveaux plus faibles d’E-cadhérine. Ces distinctions métaboliques et phénotypiques sont pertinentes pour l’interprétation expérimentale, car les taux de synthèse protéique et les flux métaboliques varient en fonction de la taille cellulaire et influencent la sensibilité aux agents ciblant la prolifération ou les voies anaboliques régulées par mTOR. La modification RFP préserve l’adéquation des cellules A549 pour de telles études métaboliques et pharmacologiques tout en permettant une visualisation directe.

La lignée A549-RFP est largement utilisée dans les systèmes de co-culture, les modèles de xénogreffes orthotopiques et ectopiques, ainsi que dans les essais d’invasion ou de métastases où le marquage fluorescent facilite la distinction des cellules tumorales des composants stromaux ou de l’hôte. La fluorescence rouge stable permet des applications telles que l’imagerie de cellules vivantes, le criblage à haut contenu, la quantification par cytométrie en flux et l’imagerie optique in vivo. En tant que variante traçable d’un modèle d’adénocarcinome pulmonaire bien caractérisé, A549-RFP offre une plateforme robuste pour l’étude de la prolifération des cellules tumorales, de la transition épithélio-mésenchymateuse, de la réponse aux médicaments et des interactions entre la tumeur et son microenvironnement, tant in vitro qu’in vivo.

Modification génétique : Modifié de façon stable par transduction lentivirale à réplication incompétente pour exprimer un rapporteur à protéine fluorescente rouge (RFP); maintenu sous forme de population polyclonale sous sélection à la puromycine (1–5 µg/mL). Confinement S1/BSL-1.