Cellules B16-F10 – Étude de la lignée cellulaire de mélanome B16-F10 dans le cadre de la recherche sur les métastases
Les cellules B16-F10 constituent une lignée cellulaire de mélanome dérivée de la souris C57BL/6J. Elles sont largement utilisées dans la recherche sur le cancer de la peau. Les chercheurs utilisent ces cellules pour étudier le développement et la progression des tumeurs, ainsi que les interventions thérapeutiques. Cet article abordera les aspects fondamentaux des cellules de mélanome B16-F10. Il traitera notamment des points suivants :
- Milieu de culture
- Les cellules B16-F10 sont cultivées dans le milieu DMEM. Ce milieu est enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), de 4 mM de L-glutamine, de 1,5 g/L de NaHCO₃, de 4,5 g/L de glucose et de 1,0 mM de pyruvate de sodium pour assurer une croissance cellulaire optimale. Le milieu doit être remplacé 2 à 3 fois par semaine.
- Temps de doublement
- Le temps de doublement des cellules B16-F10 est d’environ 20,1 heures. Il peut varier de 17 à 21 heures, selon les conditions de culture.
- Type de croissance
- La lignée cellulaire B16-F10 est une lignée cellulaire adhérente. Les cellules se développent rapidement et forment des monocouches.
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander la lignée B16-F10
- Origine et caractéristiques générales de la lignée cellulaire B16-F10
- Informations sur la culture des cellules B16-F10
- Cellules B16-F10 : avantages et inconvénients
- Applications de recherche des cellules B16-F10
- Publications portant sur la lignée cellulaire B16-F10
- Ressources sur la lignée cellulaire B16-F10 : protocoles, vidéos et plus encore
- Origine et caractéristiques générales de la lignée cellulaire B16-F10
- Informations sur la culture des cellules B16-F10
- Cellules B16-F10 : avantages et inconvénients
- Applications de recherche des cellules B16-F10
- 5. Publications portant sur la lignée cellulaire B16-F10
- Ressources sur la lignée cellulaire B16-F10 : protocoles, vidéos et plus encore
- Foire aux questions
Origine et caractéristiques générales de la lignée cellulaire B16-F10
Cette section vous donnera un aperçu de l’origine et des caractéristiques distinctives des cellules tumorales de mélanome B16-F10. Elle vous aidera à utiliser efficacement cette lignée cellulaire dans vos travaux de recherche. Vous apprendrez notamment : Que sont les cellules B16-F10? D’où provient la lignée B16-F10? Quelle est la morphologie de la lignée cellulaire B16-F10? Quelle est la taille d’une cellule B16-F10?
- La lignée B16-F10 est un sous-clone de la lignée cellulaire tumorale B16 dérivée de tissu cutané de souris C57BL/6J. Les cellules de mélanome B16F10 ont été développées après injection intraveineuse de la lignée B16 à des souris immunodéprimées ou syngéniques. Ces cellules ont été sélectionnées pour leur capacité à former des colonies pulmonaires métastatiques in vivo, puis établies après dix cycles de formation de colonies pulmonaires in vitro [1]. Elles ont été mises au point par Fidler et ses collègues en 1976.
- Les cellules de la lignée B16-F10 présentent un aspect épithélioïde et fusiforme.
- La taille approximative des cellules B16-F10 est de 15,4 ± 1,4 μm [2].
Cellules B16-F1 et B16-F10
Les cellules B16-F1 et B16-F10 sont issues de la lignée cellulaire parente B16. Toutes deux proviennent de la même source et possèdent des caractéristiques presque similaires. Cependant, leur principale différence réside dans leur capacité métastatique. Les cellules B16-F10 présentent un potentiel métastatique élevé, tandis que celui des cellules B16-F1 est faible [3].
Informations sur la culture des cellules B16-F10
Avant de manipuler et de cultiver une lignée cellulaire, il est essentiel de connaître son temps de doublement, les milieux de culture, les conditions de culture et les protocoles de culture cellulaire. Cette section abordera les questions suivantes : Quel est le temps de doublement des cellules B16-F10? Comment cultiver les cellules B16-F10? Quels sont les milieux de culture des cellules B16-F10? Quelles sont les conditions de culture recommandées pour les cellules B16-F10?
Points clés pour la culture des cellules B16-F10
Temps de doublement :
Le temps de doublement des cellules B16-F10 est d’environ 20,1 heures. Il peut varier entre 17 et 21 heures, selon les conditions de culture.
Adhérentes ou en suspension :
La lignée cellulaire B16-F10 est une lignée cellulaire adhérente. Les cellules se développent rapidement et forment des monocouches.
Rapport de division :
Les cellules B16-F10 sont repiquées selon un rapport de division de 1:2 à 1:4. Les cellules sont lavées avec une solution saline tamponnée au phosphate (1x), puis incubées avec la solution de repiquage Accutase pendant 8 à 10 minutes à température ambiante. On ajoute ensuite un milieu frais aux cellules, puis on les centrifuge. Le culot cellulaire récolté est à nouveau remis en suspension, puis les cellules sont réparties dans un nouveau flacon contenant du milieu de culture frais, selon le rapport de division.
Milieu de croissance :
Les cellules B16-F10 sont cultivées dans le milieu DMEM. Le milieu est enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin (FBS), de 4 mM de L-glutamine, de 1,5 g/L de NaHCO₃, de 4,5 g/L de glucose et de 1,0 mM de pyruvate de sodium pour une croissance cellulaire optimale. Le milieu doit être remplacé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de croissance :
Les cellules B16-F10 sont cultivées dans un incubateur humidifié à 37 °C avec un apport de 5 % de CO₂.
Conservation :
Les cellules congelées sont conservées à une température inférieure à -150 °C dans un congélateur électrique à très basse température ou dans la phase vapeur d’azote liquide afin de préserver leur viabilité.
Procédure de congélation et milieu :
Les cellules B16-F10 sont congelées dans des milieux CM-1 ou CM-ACF en vue de leur entreposage. À cette fin, on recommande un processus de congélation lente ne permettant qu’une baisse de température de 1 °C par minute afin d’éviter tout choc thermique aux cellules.
Procédure de décongélation :
Les cellules B16-F10 congelées sont décongelées dans un bain-marie préréglé à 37 °C pendant 40 à 60 secondes. Ensuite, les cellules sont ajoutées à un milieu frais et centrifugées pour éliminer les composants du milieu de congélation. Les cellules recueillies sont remises en suspension dans un milieu de croissance et versées dans des flacons pour la culture.
Niveau de biosécurité :
Un laboratoire de niveau de biosécurité 1 est requis pour la manipulation et l’entretien de la lignée cellulaire B16-F10.
Cellules B16-F10 : avantages et inconvénients
À l’instar d’autres lignées cellulaires, la lignée B16-F10 présente également certains avantages et inconvénients. Cette section aborde quelques-uns des principaux avantages et inconvénients de cette lignée cellulaire de mélanome cutané.
Avantages
La lignée cellulaire B16-F10 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer. Les avantages des cellules B16-F10 sont les suivants :
Potentiel métastatique
Les cellules B16-F10 de mélanome cutané présentent un fort potentiel métastatique, ce qui les rend précieuses pour l’étude des métastases cancéreuses et des mécanismes sous-jacents.
Modèle tumoral in vitro
Les cellules B16-F10 servent de modèle in vitro pour l’étude de la progression et de la croissance du cancer, aidant ainsi les chercheurs à comprendre les mécanismes cellulaires et moléculaires à l’origine du cancer.
Inconvénients
Les inconvénients associés à la lignée cellulaire B16-F10 sont les suivants :
Lignée cellulaire dérivée de la souris
La lignée cellulaire B16-F10 est dérivée de la souris, ce qui limite son applicabilité aux études spécifiques à l’humain. Les résultats de recherche obtenus à partir de ces cellules ne se traduisent pas toujours fidèlement dans la biologie humaine.
Applications de recherche des cellules B16-F10
La lignée cellulaire B16-F10 est largement utilisée dans la recherche sur le cancer. Quelques applications prometteuses de cette lignée cellulaire sont abordées ici.
- Recherche sur le cancer : La lignée cellulaire B16-F10 constitue un modèle précieux pour l’étude des processus des cellules cancéreuses, notamment la prolifération, l’invasion, la migration et la mort cellulaire ou apoptose. De plus, elle aide les chercheurs à mieux comprendre les mécanismes moléculaires et les voies qui régissent ces processus cellulaires. Une étude menée en 2018 a exploré le rôle du CCR5 (récepteur des chimiokines C-C de type 5) dans la transition épithélio-mésenchymateuse et les métastases des cellules de mélanome. Les résultats ont révélé qu’une déficience en CCR5 limite la croissance tumorale et les métastases, tandis qu’une expression élevée entraîne une croissance et des métastases accrues des cellules B16-F10. D’autres recherches ont montré que le CCR5 régule l’expression du TGFβ1, qui à son tour régule la voie de signalisation PI3K/AKT/GSK3β afin de favoriser la transition épithélio-mésenchymateuse et la migration cellulaire [4].
- Essais et développement de médicaments : Les cellules tumorales de mélanome B16F10 sont très agressives et conviennent donc parfaitement à l’évaluation de médicaments et de traitements antitumoraux potentiels. Les chercheurs utilisent ces cellules pour évaluer l’effet de différents composés sur la croissance, la prolifération et la métastase cellulaires, ce qui facilite le développement de médicaments. Une étude menée en 2018 par Valentina Nanni et ses collègues a examiné les effets thérapeutiques de l’extrait hydroalcoolique de fleurs de Spartium junceum. L’étude a suggéré que l’extrait de fleurs était efficace pour induire la sénescence dans les cellules B16-F10, ce qui entraîne une suppression de la croissance cellulaire et de la mélanogenèse; il pourrait donc exercer des activités anticancéreuses potentielles [5].
5. Publications portant sur la lignée cellulaire B16-F10
Voici quelques publications de recherche importantes portant sur la lignée cellulaire de mélanome B16-F10 :
Cette étude a été publiée dans Nutrients (2020). Elle suggère que l’extrait éthanolique de Sorghum bicolor possède un effet anti-mélanogénique sur les cellules de mélanome cutané B16-F10.
Le calcitriol inhibe la prolifération et induit potentiellement l’apoptose dans les cellules B16-F10
La recherche publiée dans Medical Science Monitor Basic Research (2022) suggère que le calcitriol exerce des effets antitumoraux sur les cellules de mélanome B16-F10 en inhibant leur prolifération et en induisant l’apoptose.
Cet article a été publié dans Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). Les résultats ont révélé que les cardols, des lipides résorcinoliques, exercent une cytotoxicité intense sur la lignée cellulaire B16-F10.
L’étude publiée dans Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) a exploré le potentiel antimétastatique de l’extrait d’exocarpe de Ginkgo biloba à l’aide de cellules B16-F10.
Cette recherche publiée dans *World Neurosurgery* (2018) a suggéré que la thymoquinone pourrait constituer un traitement efficace contre les lésions métastatiques intracérébrales, car elle inhibe la croissance des cellules B16-F10 et induit l’apoptose.
Ressources sur la lignée cellulaire B16-F10 : protocoles, vidéos et plus encore
Les cellules endothéliales B16F10 sont largement utilisées dans la recherche sur le cancer de la peau. Voici quelques ressources en ligne expliquant leurs protocoles de culture et de transfection :
- Transfection des cellules de mélanome B16-F10 : Ce tutoriel vidéo vous aidera à maîtriser le protocole de transfection des cellules B16-F10.
- Transfection des cellules B16-F10 : ce document explique le protocole de transfection d’ADN in vitro pour les cellules de mélanome cutané B16-F10.
Le lien suivant contient le protocole de culture cellulaire des cellules B16-F10 :
- Sous-culture des cellules B16-F10 : Ce site Web contient des renseignements utiles sur les cellules tumorales de mélanome B16-F10. Il aborde notamment les milieux de croissance, le temps de doublement, les conditions de culture et le protocole de sous-culture des cellules, ainsi que la manipulation des cultures cryoconservées et prolifératives.
Références
- Poste, G., et al., Comparaison des propriétés métastatiques de clones de mélanome B16 isolés à partir de lignées cellulaires en culture, de tumeurs sous-cutanées et de métastases pulmonaires individuelles. Cancer Research, 1982. 42(7) : p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono et S. Sugita, « Mécanophénotypage de variantes cellulaires du mélanome B16 pour l’évaluation de l’efficacité du traitement par le (-)-épigallocatéchine gallate à l’aide d’un dispositif microfluidique conique ». Micromachines, 2019. 10(3) : p. 207.
- Danciu, C., et al., Comportement de quatre sous-lignées différentes de cellules de mélanome murin B16 : peau de C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2) : p. 73-80.
- Liu, J., et al., Une forte expression du CCR5 dans le mélanome favorise la transition épithélio-mésenchymateuse et les métastases par l’intermédiaire du TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4) : p. 481-493.
- Nanni, V., et al., L’extrait hydroalcoolique de fleurs de Spartium junceum L. inhibe la croissance et la mélanogénèse dans les cellules B16-F10 en induisant la sénescence. Phytomedicine, 2018. 46 : p. 1-10.