Células de Wilms3

USD 800.00*

Los productos se envían congelados en hielo seco dentro de criotubos. Cada criotubo suele contener 3 × 10^⁶ células en el caso de las líneas adherentes o 5 × 10^⁶ células en el caso de las líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).

Los precios no incluyen impuestos ni gastos de envío

tubo criogénico

Número de producto: 300414

Ficha de datos de seguridad

Ficha del producto

Certificado de análisis (CoA)

Descripción	La línea celular Wilms3 se estableció a partir de un tumor de Wilms primario en un paciente pediátrico, caracterizado por una mutación somática en el gen WT1. A diferencia de muchas otras líneas celulares de tumor de Wilms, Wilms3 presenta una mutación heterocigótica con cambio de marco de lectura en el gen WT1 (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), lo que da lugar a la producción de una proteína WT1 truncada. Esta pérdida parcial de la función de WT1 se asocia con el desarrollo de tumores que presentan un fenotipo estromal o mesenquimal. Sin embargo, la mutación de WT1 en Wilms3 no es homocigótica, lo que añade complejidad a su estudio, ya que conserva parte de la función de WT1 que puede influir en la biología tumoral de manera diferente en comparación con las líneas celulares con pérdida completa de WT1. Wilms3 también presenta una mutación en el gen CTNNB1, que afecta específicamente a la treonina 41 (p.T41A), la cual desempeña un papel fundamental en la vía de señalización Wnt. Esta mutación estabiliza la β-catenina, impidiendo su degradación y dando lugar a la activación constitutiva de la vía Wnt. La activación persistente de la señalización Wnt impulsa la proliferación celular y contribuye a la tumorigénesis en Wilms3, lo que lo convierte en un modelo clave para estudiar el impacto de las mutaciones en CTNNB1 en el contexto de un trasfondo de WT1 parcialmente funcional. Fenotípicamente, las células de Wilms3 presentan una morfología de tipo mesenquimal, expresan vimentina y carecen de citoqueratina, lo cual concuerda con las características estromales observadas en el tumor original. Estas células muestran un potencial de diferenciación limitado, con la capacidad de sufrir cierta diferenciación mesenquimal bajo condiciones específicas. Los análisis proteómicos de Wilms3 han revelado la activación de varios receptores de tirosina quinasa (RTK), entre ellos PDGFRβ y AXL, que favorecen la supervivencia y la proliferación celular. Además, se activan vías de señalización posteriores, como MAPK y PI3K/AKT, lo que refuerza las propiedades malignas de las células de Wilms3. Un aspecto único de Wilms3 es su funcionalidad parcial de WT1, lo que brinda una perspectiva distinta sobre cómo las mutaciones de WT1 contribuyen a la biología del tumor de Wilms cuando la mutación no es completa. La interacción entre la señalización de WT1 y la de Wnt en Wilms3 ofrece una valiosa oportunidad para estudiar los roles matizados que estas vías desempeñan en el desarrollo tumoral. En general, Wilms3 sirve como un modelo importante para investigar los mecanismos moleculares subyacentes al tumor de Wilms en presencia de una pérdida parcial de WT1 y una activación constitutiva de la vía Wnt.
Organismo	Humano
Tejido	Riñón
Enfermedad	Tumor de Wilms
Aplicaciones	Modelo de cultivo celular in vitro. Estudios bioquímicos

Edad	11-12 meses
Género	Hombre
Origen étnico	caucásico
Morfología	En forma de huso
Tipo de célula	Células de Wilms
Propiedades de crecimiento	Adherente

Referencia	Wilms3 (número de catálogo de Cytion 300414)
Nivel de bioseguridad	1
NCBI_TaxID	9606
N.º de acceso de Cellosaurus	CVCL_A5SF

Perfil mutacional	Estado de la mutación en el gen WT1: homocigoto para c.1293-1294insA, p.V432fsx87; pérdida de heterocigosis (LOH): 11p11-11pter; estado de la mutación en el gen CTNNB1: tipo salvaje

Medio de cultivo	Kit MSCGM (de Lonza)
Reactivo de disociación	Accutase
Subcultivo	Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Medio de congelación	Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Descongelación y cultivo de células	Verifique que el vial se mantenga profundamente congelado al momento de la entrega, ya que las células se envían en hielo seco para mantener temperaturas óptimas durante el transporte. Al recibirlo, almacene el criovial inmediatamente a temperaturas inferiores a -150 °C para garantizar la preservación de la integridad celular, o bien continúe con el paso 3 si se requiere un cultivo inmediato. Para el cultivo inmediato, descongele rápidamente el vial sumergiéndolo en un baño de agua a 37 °C con agua limpia y un agente antimicrobiano, agitando suavemente durante 40 a 60 segundos hasta que quede un pequeño trozo de hielo. Realice todos los pasos posteriores en condiciones estériles bajo una cabina de flujo laminar, desinfectando el criovial con etanol al 70 % antes de abrirlo. Abra con cuidado el vial desinfectado y transfiera la suspensión celular a un tubo de centrífuga de 15 ml que contenga 8 ml de medio de cultivo a temperatura ambiente, mezclando suavemente. Centrifugue la mezcla a 300 x g durante 3 minutos para separar las células y deseche con cuidado el sobrenadante que contenga medio de congelación residual. Resuspende suavemente el sedimento celular en 10 ml de medio de cultivo fresco. Para las células adherentes, divide la suspensión entre dos frascos de cultivo T25; para los cultivos en suspensión, transfiere todo el medio a un solo frasco T25 para promover una interacción y un crecimiento celular efectivos. Siga los protocolos de subcultivo establecidos para el crecimiento y mantenimiento continuos de la línea celular, asegurando resultados experimentales confiables.
Atmósfera de incubación	37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
Condiciones de envío	Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
Condiciones de almacenamiento	Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Esterilidad	Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia. Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Número de lote	Tipo de certificado	Fecha	Número de catálogo
300414-221	Certificado de análisis	23. May. 2025	300414

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Información general

Características

Datos normativos

Datos biomoleculares

Manejo

Control de calidad y análisis molecular

Certificado de análisis (CoA)